血红素氧化酶在软骨藻酸对细胞DNA损伤中的作用

目的　　研究血红素氧化酶 (hemeoxygenase ,HO)系统在软骨藻酸 (domoicacid ,DA)对H4细胞DNA损伤中的作用。方法　应用单细胞凝胶电泳法 (SCGE)分别测定 0、0 0 64、0 64和 6 4μmol/LDA单独及与HO系统的活性阻断剂ZnPP 9(10 - 5mol/L)联合作用于H4细胞 6、12、2 4和 48h后彗星拖尾细胞率及拖尾尾长。结果　彗星拖尾细胞率 :中剂量和高剂量组各时间点均比对照组高 ,差异有显著性 (P <0 0 5 )。中剂量 +阻断剂组各时间点均相应高于中剂量组 ,差异有显著性 (P <0 0 5 )。彗星拖尾尾长 :中剂量组 12、2 4和 48h比对照组长 ,2 4、48h比低剂量组长 ,差异均有显著性 (P<0 0 5 )。高剂量组各时间点均比对照组、低剂量组和中剂量组长 ,差异有显著性 (P <0 0 5 )。高剂量 +阻断剂组和中剂量 +阻断剂组 2 4、48h分别高于高剂量和中剂量组 ,差异有显著性 (P <0 0 5 )。尾长 时间作Regression分析 ,各剂量组r差异值均有显著性 (P <0 0 1)。结论　软骨藻酸能诱导H4细胞DNA损伤 ,HO系统对这种损伤有一定的保护作用。     

银杏叶提取物抗心肌缺血再灌注损伤作用的研究

目的探讨银杏叶提取物(EGb761)对减轻心肌缺血再灌注(IR)损伤的作用。方法54只兔随机分入单纯IR组(n=18)、EGb761组(n=18)、EGb761 锌原卟啉Ⅸ(ZnPPⅨ)组(n=18),各组兔分别先给予生理盐水5 m l、EGb761(10 mg.kg-1)、EGb761(10 mg.kg-1) ZnPPⅨ(7.5 mg.kg-1)腹腔内注射。24 h后,每组任选6只处死,检测IR前心肌细胞内血红素氧合酶-1(HO-1)的表达与活性;余兔行心肌缺血40 m in再灌注4 h,检测IR后心肌总抗氧化能力(T-AOC)、丙二醛(MDA)含量、中性粒细胞浸润、心肌梗死范围和心肌细胞凋亡指数(AI)。结果与单纯IR组比较,EGb761组心肌细胞HO-1表达及活性显著升高,T-AOC升高,而MDA含量、中性粒细胞浸润及心肌梗死范围和AI均明显降低(P<0.01);EGb761 ZnPPⅨ组HO-1表达增加但活性反而降低(P<0.01),T-AOC降低(P<0.05),但MDA含量及中性粒细胞浸润明显增加(P<0.01),心肌梗死范围及AI则与单纯IR组无显著差异。EGb761 ZnPPⅨ组与EGb761组比较,心肌细胞HO-1表达与活性及T-AOC明显降低,MDA含量、中性粒细胞浸润及心肌梗死范围和AI则显著升高(P<0.01)。结论EGb761可通过诱导HO-1表达,发挥抗氧化与抗炎作用,有效抑制心肌IR损伤。     

低氧预处理对心脏成纤维细胞血红素氧化酶1基因表达的影响

目的：探讨离体培养的心脏成纤维细胞低氧预处理后血红紊氧化酶1（HO-1）mRNA的表达及其经时变化。方法：选用新生Wistar大鼠心脏进行成纤维细胞培养，给予低氧预处理（HPC）及低氧／复氧处理（H／R）。测定细胞培养上清液中乳酸脱氢酶（LDH）浓度。自处理后心脏成纤维细胞提取总RNA并进行逆转录扩增合成cDNA。应用即时定量PCR对HO-1mRNA进行定量分析。结果：HPC后HPC组LDH浓度未见显著升高；经过H／R后，H／R组LDH浓度显著高于HPC组（P〈0．01）。HPC后HO-1mRNA表达迅速增加，30min时达到高峰，此后逐渐下降，24h基本恢复到基线水平。结论：新生大鼠心脏成纤维细胞低氧预处理可减少低氧／复氧对细胞的损伤，低氧预处理后HO-1mRNA被显著诱导，并在12h内维持较高水平，24h后基本恢复至基线水平。     

血红素加氧酶-1在5/6肾切除大鼠肾脏中的表达及活性

目的:探讨血红素加氧酶-1(HO-1)在慢性肾衰竭大鼠肾脏中的表达、活性及其诱导剂对肾脏病变的保护作用。方法:将大鼠随机分为三组:A组假手术组,B组慢性肾衰竭组,C组给予氯化高铁血红素(Hemin)灌饲慢性肾衰竭组,8周后检测大鼠血压,肾功能,血、尿蛋白,观察肾组织病理改变,免疫组织化学观察HO-1的表达。结果:C组较B组蛋白尿水平明显降低(P<0.05),肾功能明显降低(P<0.05),但较A组明显升高(P<0.05),肾小球硬化及肾小球基底膜增生程度以及肾间质纤维化程度虽较B组减轻,但差异无显著性意义。免疫组织化学显示,B组HO-1的表达较A组、C组均明显降低(平均光度、面密度)(P<0.05),但肾组织中B组、C组之间HO的活性无统计学意义,B、C组较A组均明显降低(P<0.05),血清中HO的活性B组较C组明显降低(P<0.05)。结论:HO-1在慢性肾衰竭大鼠肾脏中的表达及活性是降低的,但其诱导剂对慢性肾衰竭大鼠肾脏病变具有部分保护作用。其机制尚可待进一步研究。     

血红素氧合酶-1对大鼠颈动脉球囊损伤后内膜增殖的影响

目的:观察血红素氧合酶-1(HO-1)对大鼠颈动脉球囊损伤后内膜增殖的影响。方法:健康雄性Wistar大鼠40只,随机分为4组(每组10例)。A组:正常对照组;B组:球囊损伤对照组;C组:氯血红素干预组;D组:原卟啉锌(ZnPP)干预组。A组行假手术(分离颈总动脉,但不损伤内膜),B、C、D组按文献方法制作颈动脉内膜损伤模型。B、C、D组于球囊损伤前3d至术后14d,分别给予0.9%氯化钠溶液1ml/只、氯血红素15mg/kg、ZnPP40μmol/kg隔日1次腹腔注射。球囊损伤后第14天处死大鼠,分离颈总动脉,行苏木精-伊红染色,观察颈动脉内膜增殖情况;RT-PCR及Western blotting分析颈动脉组织HO-1mRNA及蛋白质表达。结果:A组颈动脉内膜无增厚,颈动脉组织无HO-1表达;B组和D组颈动脉内膜明显增厚,D组颈动脉组织无明显HO-1表达,而B组颈动脉组织仅有少量HO-1表达;C组颈动脉内膜增厚明显减轻,HO-1表达量显著增高,与B组和D组比较差异有统计学意义(P<0.01)。结论:氯血红素显著抑制颈动脉球囊损伤后新生内膜的形成,提示HO-1在动脉损伤诱导的新生内膜形成中具有保护作用。     

木香乙醇提取物对高糖诱导血管内皮细胞损伤的作用及机制

目的 观察木香乙醇提取物(ESL)对高糖诱导血管内皮细胞损伤的作用及相关机制。方法 将人脐静脉内皮细胞(HUVEC)分为空白组、模型组(25 mmol·L^-1葡萄糖)、不同浓度ESL组(25、50、100、200μg·m L-1 ESL)。ESL预处理2 h后,模型组与ESL组均经葡萄糖诱导24 h,ELISA法检测肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素(IL)-6、IL-1β及细胞间黏附分子(ICAM)-1、血管细胞黏附分子(VCAM)-1、E选择素(E-selectin)含量。通过单核细胞黏附实验观察HUVEC与人髓系白血病单核细胞(THP-1)黏附情况。采用小干扰RNA(siRNA)转染技术沉默细胞中的血红素加氧酶(HO)-1基因后观察ESL抗炎作用的变化。Western blot法检测细胞中HO-1、NF-E2相关因子2(Nrf2)蛋白表达。结果 与空白组相比,模型组细胞上清液中TNF-α、IL-6、IL-1β、ICAM-1、VCAM-1和E-selectin含量均显著升高(P <0.05)。与模型组相比,不同浓度ESL组TNF-α、IL-6、IL-...     

异丙酚和咪唑安定对发绀型心脏病患儿心内直视手术心肌AngⅡ和HO-1的影响

目的观察比较异丙酚和咪唑安定对发绀型心脏病患儿心内直视手术的心肌保护作用及机制。方法选择ASAⅠ～Ⅱ级行心内直视手术的发绀型心脏病患儿32例,随机分为异丙酚复合小剂量芬太尼组(PF组,n=16)和咪唑安定复合小剂量芬太尼组(MF组,n=16)。观察患儿血流动力学变化,检测开放静脉通路时(T0)、主动脉开放后2 h(T3)、术后24 h(T4)的静脉血血浆中肌钙蛋白I(cTnI)含量。检测主动脉阻断后10～20 min(T1)和主动脉开放后10～20 min(T2)时的心肌组织血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)含量和血红素加氧酶-1(HO-1)的表达。结果 2组患儿围手术期血流动力学和同时点血cTnI水平无显著性差异;2组患儿T2时点心肌中AngⅡ含量均高于T1时点水平,T2时点心肌中AngⅡ含量PF组高于MF组(P<0.05);2组心肌HO-1表达T2时点均高于T1时点(P均<0.01),PF组同时点HO-1表达均高于MF组(P均<0.05)。结论异丙酚和咪唑安定对发绀型心脏病患儿体外循环心内直视手术心肌保护作用相当,咪唑安定抑制心肌AngⅡ表达的作用比异丙酚强,而异丙酚刺激心肌HO-1表达的作用优于咪唑安定。     

人参皂苷Rg1的体外溶血作用研究

目的：考察人参皂苷Rg1的溶血作用。方法：参照2010版《中国药典》中“溶血”检查法。结果：1％、2％、3％的人参皂苷Rg1对红细胞无溶血作用。结论：长期大剂量静脉给人参皂苷Rg1还需谨慎。     

补肾抗衰片调控动脉粥样硬化大鼠血清及脑内 IDO 水平及对炎症状态、抑郁行为的作用研究

简版：目的：观察补肾抗衰片激活吲哚胺2,3-双加氧酶(Indoleamine 2,3-dioxygenase,IDO)后对动脉粥样硬化(Atheroselerosis,AS)大鼠血清致炎因子的干预作用,阐释该药物防治AS的效应及机制,明确其在抗AS的同时是否介导了实验动物抑郁状态的产生。方法：将39只SD大鼠分为空白组、模型组、补肾抗衰组、阿托伐他汀组。除空白组外,其余各组大鼠建立AS斑块模型,从实验第1天开始予相应药物干预。第8、12、16周记录大鼠体质量、糖水实验、旷场试验结果;第20周末麻醉处死大鼠取外周血清检测肿瘤坏死因子(Tumor neCrosis f''actor,TNF-a)、白细胞介素-6 (Interleukin-6,IL-6)、IDO水平及脑组织5-羟色胺(5-hydroxytryptamine．5-HT)、IDO含量。……     

核因子E2相关因子2/血红素加氧酶1信号通路介导的氧化应激反应对早期小鼠视网膜爆震伤的影响及其作用机制

目的　探讨核因子E2相关因子2(Nrf2)/血红素加氧酶1(HO-1)信号通路介导的氧化应激反应对早期小鼠视网膜爆震伤的影响及其作用机制。方法　取雄性C57BL/6小鼠60只随机分为对照组和模型组,对照组小鼠常规饲养,模型组小鼠接受爆震冲击处理。去除建模过程中5只死亡小鼠,最终纳入对照组16只小鼠、6 h模型组19只小鼠、48 h模型组20只小鼠。分别于建模后6 h、48 h腹腔注射200 g·L^-1戊巴比妥钠过量麻醉处死小鼠,解剖取材。对各组小鼠视网膜组织进行HE染色,计数视网膜神经节细胞（RGC）并测量视网膜神经纤维层（RNFL）厚度。免疫组织化学染色检测各组小鼠视网膜组织Nrf2蛋白、HO-1蛋白、超氧化物歧化酶2(SOD2)蛋白表达情况。Western blot检测各组小鼠视网膜组织Nrf2蛋白、HO-1蛋白、SOD2蛋白、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)蛋白、黑色素瘤分化相关基因5（MDA5）蛋白的相对表达量。结果　与对照组相比,6 h模型组小鼠视网膜组织结构疏松,细胞排列紊乱,神经节细胞层、内核层及外核层出现核浓缩和空泡现象;RGC数减少(P<0.05),RNFL厚度增加(P<0.05);48 h模型组小鼠视网膜组织细胞排列更为杂乱疏松,RGC数明显减少(P<0.05),RNFL进一步增厚(P<0.05),并伴有新生血管生成。与对照组［(7.85±1.16)%］相比,6 h模型组小鼠视网膜组织Nrf2蛋白阳性细胞表达率升高至(16.78±1.38)%;48 h模型组进一步升高至(20.01±1.48)%,差异均有统计学意义(均为P<0.05)。与对照组［(4.67±0.98)%、(4.15±1.11)%］相比,6 h模型组小鼠视网膜组织HO-1蛋白、SOD2蛋白阳性细胞表达率分别升高至(7.95±1.27)%和(6.14±0.90)%;48 h模型组继续升高,分别为(12.34±1.48)%、(10.25±1.46)%,差异均有统计学意义(均为P<0.05)。与对照组相比,6 h模型组小鼠视网膜组织Nrf2蛋白、HO-1蛋白、SOD2蛋白、iNOS蛋白、MDA5蛋白相对表达量均升高,差异均有统计学意义(均为P<0.05);48 h模型组进一步升高,差异均有统计学意义(均为P<0.05)。结论　Nrf2/HO-1信号通路介导的氧化应激反应参与早期视网膜爆震伤的发生,其作用机制与上调SOD2蛋白、MDA5蛋白、iNOS蛋白表达有关。