磷脂酰肌醇3激酶对TNF-α诱导的大鼠气道平滑肌细胞增殖、凋亡和转化生长因子β1表达的影响

目的 探讨磷脂酰肌醇3激酶（PI3-K）对TNF-α诱导的大鼠气道平滑肌细胞（ASMC）增殖、凋亡和转化生长因子β1（TGF-β1）表达的影响.方法 以肿瘤坏死因子-α（TNF-α）及PI3-K特异性抑制剂wortmannin作为工具药,分别将TNF-α、TNF-α＋wortmannin接种ASMC,置37℃,5%CO2培养箱中培养.逆转录聚合酶链式反应（RT-PCR）检测PI3-Kp85α、TGF-β1 mRNA表达,免疫细胞化学染色法检测PI3-Kp85α、PCNA、Bcl-2蛋白表达及定位,Sandwich ELISA检测NF-κB活性,四甲基偶氮唑蓝（MTT）微量比色法测定ASMC增殖,AnnexinV/PI双标记流式细胞仪分析法检测细胞凋亡,ELISA测定TGF-β1蛋白质含量.结果 （1）培养的ASMC PI3-K p85α的阳性定位在胞浆.TNF-α组ASMC PI3-Kp85α mRNA及蛋白表达水平均显著高于对照组及TNF-α＋wortmannin组（P＜0.01）;（2）TNF-α组ASMCNF-κB活性与对照组相比显著增高（P＜0.01）,TNF-α＋wortmannin组NF-κB活性与TNF-α组相比显著降低（P＜0.01）;（3）TNF-α组ASMC的增殖反应与对照组及TNF-α＋wortmannin组相比显著增加（P＜0.01）;TNF-α组细胞凋亡率与对照组相比差异无统计学意义（P＞0.05）,TNF-α＋wortmannin组细胞凋亡率显著高于TNF-α组及对照组（P＜0.01）.（4）TNF-α组ASMC的PCNA、Bcl-2蛋白表达量均显著高于对照组及TNF-α＋wortmannin组（P＜0.01）;（5）TNF-α组ASMC的TGF-β1的mRNA表达水平、培养液上清TGF-β1的蛋白质含量均显著高于对照组及TNF-α＋wortmannin组（P＜0.01）.结论 PI3-K可能参与调控TNF-α诱导的大鼠气道平滑肌细胞的增殖、凋亡及TGF-β1的表达和分泌,NF-κB作为PI3-K的下游信号参与此过程.     

RANKL／OPG与人多发性骨髓瘤骨病的关系

多发性骨髓瘤(MM)是以骨髓微环境中浆细胞恶性增殖为特征的血液肿瘤。细胞核因子κB受体活化因子配基(RANKL) /护骨素(OPG)与MM发病关系密切。在MM中,存在RANKL表达上调、OPG表达下调;这种RANKL/OPG比率异常与MM骨病及骨病范围、MM的肿瘤负荷、分期和预后均有关。     

应用合成肽研究柯萨奇B病毒衣壳蛋白VP1的共同抗原表位

对柯萨奇B4病毒(CVB4)衣壳蛋白VPl保守区的亲水性和二级结构进行分析和预测,选择可能代表优势抗原表位的肽段进行合成(VPl-l肽,RIYF KPKHVK AYV),并截取了该肽段的前12个残基(VPI-2肽)用同样方法进行合成.用VP1-1肽免疫家兔制备出高效价抗体,应用酶联免疫吸附法(ELISA)检测,这些抗体与CVBI-6病毒均有结合反应,VP1-1肽与型特异性CVB1-6抗体均有良好的结合反应,表明VP1-1肽是CVB的共同抗原表位.用VP1-1肽检测心肌炎患者血清CVBIgM抗体,阳性率在40%左右.     

B超诊断半月板损伤

半月板损伤是常见的膝关节疾病,以往诊断方法主要依靠膝关节造影及膝关节镜,而无创性检查较少。Selby等于1986年首次用高分辩力超声诊断半月板损伤,国内报道较少。 我们自1991年10月至1996年4月用B型超声检查膝关节半月板损伤病人23例(23个半月板),其中男13例。女10例,年龄14—62岁,对其中10例同时应用膝关节镜检查,9例送病理检查证实。     

新等位基因HLA-B*070503的认定

中华骨髓库辽宁分库组织配型实验室常规HLA基因分型工作中发现一个新的HLA-B等位基因，被世界卫生组织HLA因子命名委员会正式命名为HLA-B＊070503（HWS10003243-DQ162803）。     

B型超声诊断胎儿畸形的价值（附74例报告）

胎儿畸形在我国围产儿死因成份中占17．8％，居死因顺位的第二位。早期诊断有助于终止妊娠，降低围产儿的死亡率。超声检查对产前诊断胎儿畸形具有较高的敏感性与特异性，已成为主要的诊断方法。本文报道B超诊断胎儿畸形74例，并探讨其声像图表现与诊断价值。     

抗人可溶性间皮素相关蛋白单克隆抗体的制备及特性鉴定

目的:制备鼠抗人可溶性间皮素相关蛋白(SMR)的单克隆抗体(mAb),鉴定其生物学特性。方法:应用计算机通过综合预测对间皮素(MSLN)进行B-细胞表位预测。合成相应肽段并免疫BALB/c小鼠,采用杂交瘤技术制备mAb,利用免疫细胞化学和Western blot分析对所制备的mAb进行鉴定。结果:综合预测方法分析间皮素的抗原表位可能于153-162、282-292及471-481氨基酸残基或其附近,选择性合成了可能性最高的位于471-481氨基酸残基的可溶性间皮素相关蛋白表位,制备了mAb(2H10),经免疫细胞化学和Western blot分析该抗体具有较高的特异性。结论:成功地制备了鼠抗人可溶性间皮素相关蛋白的mAb(2H10),该抗体具有较高的特异性,为进一步利用ELISA对可溶性间皮素相关蛋白进行检测奠定了基础。     

高密度脂蛋白亚类与蛋白激酶C活性的关系

目的：观察高密度脂蛋白（HDL）亚类与外周细胞和肝细胞HDL受体结合活性及细胞PKC活性的关系。方法： 以纯化的前β1-HDL及不含apoE的HDL3为配体，分别与人动脉平滑肌细胞（SMC）和肝癌细胞系HepG2反应，观察两种细胞HDL受体结合活性及细胞PKC活性的变化。结果： 前β1-HDL与SMC HDL受体的亲和力不仅显著高于不含apoE的HDL3与SMC HDL受体的亲和力（P＜0.05），而且还显著高于它与HepG2细胞HDL受体的亲和力（P＜0.05）；前β1-HDL和不含apoE的HDL3分别与SMC反应后，均可激活细胞PKC信号传递途径，且前β1-HDL的作用较不含apoE的HDL3更为明显；而这二种HDL亚类分别与HepG2细胞反应后，细胞PKC活性均无明显变化。结论： 前β1-HDL似乎可以比不含apoE的HDL3更为有效的促进细胞胆固醇移出，而且血浆中前β1-HDL可能更多地作用于外周细胞如SMC，并通过外周细胞膜上的HDL受体介导激活PKC信号传递途径，从而促进外周细胞中过剩的胆固醇移出，而肝细胞HDL受体介导的胆固醇进入细胞可能与PKC信号途径无关。     

人B7—1分子对小鼠淋巴细胞活化的辅助刺激作用

本文用脂质体法将人Ｂ７－１基因导入小鼠前胃癌细系ＦＣ及人白血病细胞系ＨＬ６０，获得了稳定高效表达Ｂ７－１分子的ＭＦＣ和ＨＬ６０克隆（分别命名为Ｂ７和ＨＬ６０－Ｂ７）。在ＭＦＣ－Ｂ７及ＨＬ６０－Ｂ７刺激鼠脾淋巴细胞的增殖实验中，野生型肿瘤细胞中只能引起微弱的增殖反应，而转染Ｂ７－１分子的肿瘤细胞能非常显著刺激脾细胞的增殖（Ｐ＜０．００１）。这种效应能被抗Ｂ７－１单抗所阻断。结果表明人Ｂ７－１分子能为鼠淋巴细胞的活化增殖提供辅助刺激信号。     

NF-κB“decoy”寡核苷酸对LPS诱导巨噬细胞IL-10表达的影响

目的：探讨NF-κB “decoy”寡核苷酸（ODNs）对脂多糖（LPS）诱导小鼠巨噬细胞株J774.1表达IL-10的影响。方法： 通过体外细胞培养技术，观察转染NF-κB“decoy”ODNs对LPS刺激巨噬细胞产生IL-10及其表达的影响。结果： 在LPS刺激的巨噬细胞中转染NF-κB“decoy”ODNs对抗炎介质IL-10的合成表达无影响。结论： NF-κB“decoy”ODNs不抑制抗炎介质IL-10的表达，可能由于NF-κB在IL-10转录机制中不占主导地位。