益气活血泻肺利水法协同治疗慢性心力衰竭伴利尿剂抵抗效果分析

目的:回顾性分析益气活血泻肺利水法协同治疗慢性心力衰竭(CHF)伴利尿剂抵抗患者的临床效果及对心功能指标和心肌重塑指标的影响。方法:采用随机数字表法将84例CHF伴利尿剂抵抗患者分为研究组与对照组,每组42例。对照组给予常规西药治疗,研究组在对照组基础上给予益气活血泻肺利水中药汤剂治疗。分析两组临床疗效、相关因子水平以及不良反应发生率。结果:治疗4周后,研究组心功能总有效率高于对照组(P<0.01);中医症候积分低于对照组(P<0.01)。研究组心功能指标[左室收缩/舒张末容积(LVESV/LVEDV)、心输出量(CO)、左室射血分数(LVEF)、每搏输出量(SV)]改善效果优于对照组(P<0.01);血清B型利钠肽前体(NT-proBNP)、基质金属蛋白酶2、9(MMP-2、MMP-9)水平也低于对照组(P<0.01)。两组不良反应发生率差异无统计学意义(P>0.05)。结论:中西医结合治疗CHF伴利尿剂抵抗对提高临床疗效,改善心功能、保护心肌可能具有一定优势。     

晚期糖基化终产物受体与自身免疫性疾病相关的研究进展

晚期糖基化终产物受体(receptor for advanced glycation end product,RAGE)是细胞表面Ig超家族中的多配体受体成员,可通过与配体结合激活细胞内多种信号通路,导致活性氧自由基(reactive oxygen species,ROS)产生、免疫炎症反应、细胞增殖或凋亡,是极具吸引力的治疗自身免疫性疾病的新靶点。文章综述了RAGE的结构、配体及其在免疫反应中的作用,重点介绍RAGE在自身免疫性疾病中的研究现状。     

淋巴结血管内T细胞淋巴瘤1例报道及文献复习

目的　探讨血管内淋巴瘤 (IVL)的临床病理特征。方法　对 1例腹股沟淋巴结IVL临床、病理组织学及免疫表型进行观察分析并复习文献。结果　男性 31岁 ,不明原因高热伴消瘦 5 0天 ,右腹股沟直径 1cm淋巴结 1枚 ,B超示肝脏轻度增大 ,血LDH明显升高伴ESR及转氨酶轻度升高 ,外周血WBC 3 3× 10 7/L ,骨髓像、多种病原及各肿瘤相关抗原检测均无异常。病理活检 :腹股沟淋巴结大部分破坏 ,代之以大量扩张的中小血管 ,腔内充满大量异型淋巴样细胞 ,局部伴管壁、管周浸润并累及结外脂肪组织。瘤细胞免疫表型CD4 5、CD4 5RO、CD3阳性 ,CK、CD6 8、CD79α、CD2 0均阴性 ,血管壁及内皮细胞CD31、CD34阳性。行CHOP化疗后症状缓解 ,现仍在随访中。结论　IVL是一罕见的非霍奇金淋巴瘤 ,好发于中枢神经系统及皮肤 ,其他部位少见 ,绝大数为B细胞型 ,T型罕见 ,以浅表淋巴结活检确诊者尚无报道。临床表现有一定提示性 ,确诊靠组织病理学检查 ,部分病例对化疗敏感 ,但多数病例预后差     

OGD增加小鼠离体海马组织内cPKCβII和nPKCε的膜转位

目的:通过观察无糖低氧(OGD)刺激对小鼠海马脑片内蛋白激酶C(PKC)特定亚型膜转位水平(激活程度)的影响,进一步证实我们在整体低氧预适应小鼠模型上所获实验结果,并为离体海马脑片缺血/低氧预适应(I/HPC)模型建立及后续药物干预实验打下基础。方法:急性分离小鼠海马组织、制备400!μm厚度的脑片,并用无糖低氧(OGD)人工脑脊液(ACSF)模拟缺血/低氧刺激;应用SDS-PAGE和Westernbolt等生化技术,并结合GelDoc凝胶成像系统,半定量检测OGD刺激2、5、10、15和30min后海马脑片内cPKCβII和nPKCε的膜转位水平。结果:OGD刺激可增高海马脑片内cPKCβII和nPKCε的膜转位水平,且这种增高从刺激5min开始持续至30min均有显著差异(P<0.001,n=6)。结论:实验结果进一步证实cPKCβII和nPKCε可能参与脑缺血/低氧性预适应的形成过程,并提示OGD10min作为制备离体海马脑片I/HPC模型的预处理刺激较为合理。     

不同胃癌细胞系中B7-H1分子的表达水平及定位

目的 通过检测胃癌细胞系SGC7901/VCR、SCC7901和BGC-823,以及永生化胃上皮细胞系GES中B7-H1的表达,探讨B7-H1与胃癌的发生及多药耐药(MDR)的关系.方法 上述细胞系培养于含10%灭活胎牛血清的RPMI-1640培养基中,利用RT-PCR技术、细胞免疫化学染色以及细胞免疫荧光染色技术与流式细胞术检测4种细胞系中B7-H1 mRNA与B7-H1蛋白的表达情况,并比较其在4种细胞系中的表达强度.结果 B7-H1 mRNA在4种细胞系中均有表达,表达强度按照GES-1、BGC-823、SGC-7901、SGC-7901/VCR的顺序递增;细胞免疫化学染色与免疫荧光染色表明,B7-H1蛋白主要表达在上述细胞的细胞膜和少量细胞浆中.结合流式细胞术检测进一步证实,B7-H1蛋白在4种细胞系中的表达结果与mRNA的表达一致.结论 B7-H1表达在胃上皮细胞上,可能通过抑制机体免疫反应,促进胃癌细胞生长及MDR基因表达.     

NF-κB的诱捕寡核苷酸抑制肺纤维细胞Ⅰ型胶原mRNA表达的实验研究

目的研究NF-κB的诱捕寡核苷酸（decoy-oligonucleotides，Decoy-ODNs）对小鼠肺原代成纤维细胞Ⅰ型胶原形成的影响，为防治肺纤维化的发生提供理论基础。方法设计合成针对NF-κB的Decoy—ODNs，用阳离子脂质体转染小鼠肺原代成纤维细胞，用凝胶迁移变动分析（electrophoretic mobility shift assay，EMSA）研究Decoy—ODNs对NF-κB的抑制作用，RT-PCR观察对成纤维细胞Ⅰ型胶原合成的影响。结果NF-κB的Decoy-ODNs可竞争抑制核转录因子NF-κB的活性，Decoy-ODNs作用18h后，成纤维细胞Ⅰ型胶原mRNA的表达明显降低。结论Decoy-ODNs可以通过拮抗核转录因子NF-κB的活性而抑制Ⅰ型胶原纤维的表达，为防治肺纤维化的发生提供理论基础。     

机械牵张对大鼠心室肌蛋白激酶B磷酸化及心钠素分泌的影响

目的:研究机械牵张对大鼠心肌蛋白激酶B(Akt)活化和心钠素(ANF)分泌的影响。方法:采用Langendorff方法灌流大鼠心脏,膨胀球囊持续牵张左心室,从左心室游离心肌,提取胞浆蛋白,用Western blot检测磷酸化Akt、总Akt水平;收集冠脉流出液,用放射免疫分析法检测冠脉流出液中ANF含量。结果:持续牵张不影响灌流心脏的心率和冠脉流出量。但经过20min持续牵张,牵张组心脏灌流液中ANF含量(209.89±65.45pg/ml)较对照组(108.84±25.18pg/ml)明显增高(P<0.01);牵张组大鼠左心室心肌组织磷酸化Akt水平(0.76±0.03)明显高于对照组(0.32±0.02),而总Akt水平与对照组相比无显著性差异。结论:机械牵张可引起心脏心钠素的分泌增加,其机制可能与胞内Akt信号通路的激活有关。     

香烟烟雾提取物对哮喘大鼠气道平滑肌细胞蛋白激酶C活性的影响

目的：研究香烟烟雾提取物（CSE）对哮喘大鼠气道平滑肌细胞（ASMC）蛋白激酶C（PKC）活性的影响。 方法： 24只Wistar大鼠随机分为哮喘干预组（A组）、单纯哮喘组（B组）、对照干预组（C组）及对照组（D组），用5％ 浓度的CSE干预A、C两组ASMC，分别于干预0、1、2、3和6 h后，分离ASMC，提取胞浆及胞膜PKC，然后用［γ-32P］-ATP催化活性测定法检测PKC的活性。结果:（1）ASMC胞膜、胞浆PKC活性及两者比值：在1 h及2 h时，A组显著强于B、C、D组（均P<0.01）；B、C组显著强于D组（P<0.01，P<0.05）；B组与C组在1 h、2 h时均无显著差异。而B组与C组在1 h、2 h时差异均无显著(P＞0.05)。（2）组内ASMC胞膜、胞浆PKC活性比值：A、B、C 3组：1 h显著高于0 h、2 h（均P<0.01）；B组：2 h显著高于0 h（P<0.05）。 结论:CSE可能通过改变PKC的活性而进一步影响哮喘及其它呼吸系统疾病的发生、发展。     

人类ZAKβ与YWHAZ蛋白相互作用的初步研究

目的研究ZAKβ与YWHAZ蛋白之间的相互作用。方法以ZAKβ为诱饵蛋白,利用酵母双杂交筛选人类肝脏cDNA文库,经GST Pull-down、免疫共沉淀和细胞共定位实验分别验证ZAKβ与猎物蛋白在体外和细胞内的相互作用,构建ZAKβ的截短体以确定相互作用的区域,用磷酸化抗体检测ZAKβ在相互作用中的磷酸化作用,并通过流式细胞仪检测这对蛋白相互作用对细胞周期的影响。结果利用酵母双杂交筛选到一个能与ZAKβ相互作用的蛋白YWHAZ,并在体外和细胞内都验证了这二者的相互作用,发现这两个蛋白都能共定位于293T细胞的胞质中,确定了ZAKβ的N端1~250氨基酸为与YWHAZ蛋白相互作用的区域。体外实验发现了这二者的相互作用涉及到磷酸化反应,发现这对蛋白的相互作用能提高293T细胞的G2期水平。结论首次发现并证实了ZAKβ和YWHAZ之间的相互作用,发现该相互作用涉及到磷酸化过程并能够对细胞周期产生影响。     

γ射线引起HLA—B8表达缺失黑色素瘤细胞株的克隆研究

用７００ｒａｄγ射线照射ＨＬＡ－Ｂ８＋黑色素瘤细胞，于照射后第３天用抗ＨＬＡ－Ｂ８ＩｇＭ型单抗及补体做免疫选择。存活细胞培养１ｗ后，进行第２次免疫选择。存活细胞继续培养１ｗ，然后用有限稀释法在９６孔平底细胞培养板内进行克隆。从５×１０６个受诱变的细胞中共获得６个细胞克隆，其中１个克隆经流式细胞仪表型分析显示ＨＬＡ－Ｂ８无表达，此细胞的ＲＮＡ经ＲＴ－ＰＣＲ电泳分析表明ＨＬＡ－Ｂ各亚型基因的总表达量减弱，提示克隆到ＨＬＡ－Ｂ８表达缺失的突变株。本研究方法的建立及此突变株的获得，为进一步制备广谱型黑色素瘤“瘤苗”以及研究ＨＬＡｃｌａｓｓⅠ各亚型分子在肿瘤免疫中的作用提供了有力工具。