苦胆草对博来霉素致大鼠肺纤维化的防治作用

［摘要］目的　探讨苦胆草对博莱霉素致大鼠肺纤维化的防治作用．方法　健康成年SD大鼠40只（200±20）g随机分为4组:正常对照组（未做处理）、生理盐水组（气管滴入生理盐水）、模型组（气管滴入博莱霉素5 mg/kg）和苦胆草干预组［灌胃给予苦胆草片混悬液0.705 g/(100 g.d),2次/d、共5次,末次给药1 h,气管滴入博莱霉素5 mg/kg］．分别于气管内滴注后14 d和28 d处死动物,检测各项指标．采用碱水解法测定肺组织中羟脯氨酸（HYP）含量,HE染色和银染观察肺组织病理变化．结果　与正常对照组和生理盐水组比较,模型组大鼠肺组织HYP含量明显升高（P＜0.01）;与模型组比较,苦胆草干预组大鼠肺组织HYP含量明显降低（P＜0.01）;病理检查发现,模型组大鼠肺组织有明显肺纤维化样改变,苦胆草干预组可明显减轻肺纤维化程度．结论　苦胆草能降低博莱霉素致肺纤维化大鼠肺组织羟脯氨酸含量,减轻肺纤维化程度,有望成为防治肺纤维化的候选药物．     

NRP1基因敲除对放射性肺纤维化进程的影响及其作用机制

目的：观察神经菌毛蛋白1（NRP1）基因对放射性肺纤维化（RIPF）进程的影响,并探讨其在Wnt/β-连环蛋白（β-catenin）信号通路和转化生长因子β1（TGF-β1）/Smads通路介导的上皮间质转化（EMT）发生发展过程和细胞外基质（ECM）沉积中的作用。方法：利用Cre-LoxP重组酶系统构建肺泡Ⅱ型上皮细胞（AT-Ⅱ）特异性敲除NRP1基因的转基因C57BL/6J小鼠并进行鼠尾鉴定,将160只小鼠按照射后不同时间点随机分为4周组、8周组、16周组和24周组,每组小鼠按随机数字表法分为野生型（Con）组、野生型单纯照射（IR）组、NRP1基因特异性敲除（KO-Con）组和NRP1基因特异性敲除+照射（KO+IR）组,每亚组10只。KO-Con和KO+IR组小鼠腹腔注射他莫昔芬特异性敲除AT-Ⅱ细胞NRP1基因,IR组和KO+IR组小鼠采用20 Gy全胸照射建立RIPF小鼠模型。模型构建完成后,利用HE染色法和Masson染色法验证模型是否构建成功;利用免疫组织化学（IHC）法检测小鼠肺组织中Ⅰ型胶原（Col Ⅰ）和α平滑肌肌动蛋白（α-SMA）的蛋白表达水平;Western blotting法检测小鼠肺组织中NRP1、β-catenin、TGF-β1和Smad2蛋白表达水平;实时荧光定量-聚合酶链反应（qRT-PCR）法检测小鼠肺组织中NRP1、Col Ⅰ、α-SMA、β-catenin、TGF-β1、Smad2、上皮型钙黏蛋白（E-cadherin）、神经型钙黏蛋白（N-cadherin）和波形蛋白（Vimentin）mRNA表达水平。结果：HE染色和Masson染色显示RIPF小鼠模型构建成功,IR组小鼠肺部主要为放射性肺炎病理形态表现。与Con组比较,随时间的延长,IR组小鼠肺组织中NRP1蛋白和mRNA表达水平逐渐升高（P<0.05）,24周时达到最高（P<0.01）。与Con组比较,随时间的延长IR组和KO+IR组小鼠肺组织中Col Ⅰ、α-SMA、β-catenin、TGF-β1和Smad2蛋白及mRNA表达水平逐渐升高（P<0.05或P<0.01）;与IR组比较,随时间的延长,KO+IR组小鼠肺组织中Col Ⅰ、α-SMA、β-catenin、TGF-β1和Smad2蛋白和mRNA表达水平均明显降低（P<0.05或P<0.01）,但仍高于Con组（P<0.05或P<0.01）。与Con组比较,随时间的延长,IR组和KO+IR组小鼠肺组织中上皮细胞标志物E-Cadherin mRNA表达水平逐渐降低（P<0.05）,间质细胞标志物N-Cadherin和Vimentin蛋白表达水平升高（P<0.05或P<0.01）,但KO+IR组小鼠肺组织中E-CadherinmRNA表达水平明显高于IR组（P<0.05或P<0.01）,N-Cadherin和Vimentin mRNA表达水平均明显低于IR组（P<0.05或P<0.01）。结论：NRP1基因敲除可抑制RIPF的发生发展,其机制可能与调节小鼠肺组织中Wnt/β-catenin和TGF-β1/Smads信号通路的表达进而抑制EMT进程有关。     

艾灸全程干预新型冠状病毒肺炎的可行性

新型冠状病毒肺炎疫情发生以来,艾灸被推荐用于预防以及治疗疑似病例、轻型及恢复期患者。艾灸的消毒灭菌及"天然疫苗"生发作用有利于预防新型冠状病毒肺炎,艾灸的抗炎作用及治疗病毒性肺炎也有一定的临床证据,而对于新型冠状病毒肺炎患者恢复期及康复后可能出现的肺纤维化,艾灸也体现了极大的防治潜力。运用艾灸全程干预新型冠状病毒肺炎,不仅可有效预防和治疗新型冠状病毒肺炎,提高新型冠状病毒肺炎后期患者生活质量,亦可极大缓解医护人员压力。     

博莱霉素与博莱霉素A5诱导小鼠肺组织损伤的差异

目的探讨静脉注射博莱霉素(BLM)和博莱霉素A5(BLM-A5)对小鼠肺组织损伤的不同作用。方法8周龄雌性C57BL/6小鼠49只,随机分为BLM组19只、BLM-A5组20只和对照组10只,分别经尾静脉一次性注射BLM 150 mg/kg、BLM-A5 150 mg/kg和生理盐水。观察每组小鼠体重、生存率,肺组织病理改变及肺组织羟脯胺酸的含量。结果①BLM组和BLM-A5组小鼠最低体重分别为静脉注射处置前的65.46%和66.87%,均较对照组明显降低(P值均小于0.001)。②BLM组、BLM-A5组和对照组小鼠的生存率分别为:43%、55%和100%。③BLM组小鼠注射处置后28 d,在胸膜下及血管周围形成广泛、稳定的间质纤维化病理改变,而BLM-A5组无明显纤维化形成。BLM组与BLM-A5组、正常组比较,肺纤维化病理评分均明显增高(P值均小于0.001)。④BLM-A5组和对照组注射处置后28 d,右肺羟脯氨酸含量分别为471.6±49.4 nmol和405.0±74.6 nmol,两组间无统计学差异。BLM组为978.4±106.1 nmol,与BLM-A5组、对照组比较分别存在显著性差异(P值均小于0.01)。结论静脉注射BLM与BLM-A5,对小鼠肺组织损伤的作用存在着明显的差异,BLM可导致肺间质形成广泛的纤维化,而BLM-A5仅引起轻微的肺组织损伤,不形成明显的间质纤维化。     

支气管肺泡灌洗液中CCL2水平对特发性肺纤维化患者预后的判断价值

目的：探究在临床实践中支气管肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluid,BALF)中趋化因子CCL2[chemokine(C-C motif)ligand 2]和性别-年龄-生理学指标(gender-age-physiological index,GAP)评分对特发性肺纤维化(idiopathic pulmonary fibrosis,IPF)预后的判断价值以及两者之间的相关性。方法：回顾性分析了2017年1月—2019年12月在南京鼓楼医院住院确诊为IPF的患者35例,同期收集了因慢性咳嗽(chronic cough,CC)就诊、但无其他肺部疾病或其他器官疾病的门诊患者10例。 比较两组患者的性别、年龄、用力肺活量占预计值百分比(percentage of predicted forced vital capacity,FVC%)、一氧化碳弥散量占预计值百分比(percentage of predicted diffusing capacity for carbon monoxide,DLCO%)(CC组除外)、血气分析等指标的差异, 同时检测血清和BALF中CCL2的水平,分析不同GAP组间CCL2水平、生存时间的差异以及CCL2与GAP评分之间的相关性。 结果：与CC组相比,IPF组血清和BALF中CCL2均升高。IPF组(Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ期)与CC组4组间比较显示,氧合指数、FVC%、血清和BALF中CCL2水平差异均有统计学意义,IPF组(Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ期)3组间比较显示DLCO%有差异。相关性方面,BALF中CCL2 与FVC%、DLCO%均呈负相关,与GAP评分呈正相关。IPF组(Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ期)3组间生存时间有差异。结论：本研究结果不仅验证了BALF中CCL2和GAP评分对预测IPF预后的价值,同时首次揭示了不同GAP分期患者BALF中CCL2水平具有差异性,且 BALF中CCL2与GAP评分具有相关性。     

特发性肺纤维化患者慢性肺部感染的发生特点及病原学研究

目的 探讨特发性肺纤维化（IPF）患者慢性肺部感染（CPI）的发生特点及病原学特征。方法 选择我院收治的195例IPF患者为研究对象,将患者分为四组,A组：IPF诊断时CPI阴性且随访期间未出现CPI;B组：IPF诊断为CPI阴性,但在随访期间出现CPI;C组：IPF诊断为CPI阳性,但在随访期间未出现另一种CPI;D组：IPF诊断为CPI阳性,并在随访期间出现另一种CPI。记录患者基线资料及生存状态。结果 在IPF诊断时,31例患者出现CPI（C+D组）,在164例诊断IPF时没有CPI的患者（A+B组）中,28例患者（B组）在平均6.1年（0.01～15.00年）的随访期内出现了CPI。在这28例B组患者中,25例（89.29%）只有1种病原体,3例（10.71%）有2种病原体,2例患者发生了二次感染。检出结核分枝杆菌14例（45.16%）,禽类分支杆菌复合体10例（32.26%）,曲霉属真菌5例（16.13%）,诺卡氏菌属1例（3.23%）,禽类分支杆菌复合体及曲霉属真菌混合感染1例（3.23%）。多变量COX分析发现,BMI<21 kg/m2、PaO2<70 mmHg、KL-6≥2000 U/ml是影响患者CPI发生的独立性危险因素。Log-rank检验显示,有CPI发展组和无CPI发展组患者的生存率差异无统计学意义（P=0.416）。结论 结核分枝杆菌、非结核分枝杆菌、曲霉菌和诺卡氏菌是CPI患者的最常见病原菌。在IPF随访过程中,尤其是BMI<21 kg/m2、PaO2<70 mmHg、KL-6≥2000 U/ml的患者,临床医生应注意CPI的变化情况。     

不同半夏炮制品抗肺纤维化作用的体外筛选及体内评价

目的 探讨不同半夏炮制品体外抗肺纤维化的作用及筛选出的半夏制品对肺纤维化小鼠的干预作用.方法 用10μg/L转化生长因子β1(TGF-β1)诱导人胚肺成纤维细胞系(MRC-5)建立肺纤维化体外模型,经水提生半夏(2.1、4.2、8.4、16.7 g/L)、清半夏(2.1、4.2、8.4、16.7 g/L)、法半夏(2....     

阿魏酸钠对肺纤维化大鼠肺组织Smad4的影响及意义

目的观察阿魏酸钠对肺纤维化大鼠肺组织Smad4 mRNA表达的影响,探讨其治疗肺纤维化的作用及机制。方法将30只SD大鼠随机分为对照组、肺纤维化组和阿魏酸钠治疗组,每组10只。肺纤维化组和阿魏酸钠治疗组以气管内滴入博来霉素(5mg/kg)建立肺纤维化动物模型,治疗组采用阿魏酸钠(150mg/kg体重)灌胃治疗。苏木精-伊红染色检测肺组织病理改变;免疫组化检测Ⅰ型胶原纤维;原位杂交检测Smad4 mRNA的表达。结果与对照组比较,肺纤维化组Ⅰ型胶原纤维(0.97±0.34比0.27±0.08,P<0.001)和Smad4 mRNA(0.17±0.10对0.07±0.03,P<0.01)的表达均显著增高。阿魏酸钠治疗组与肺纤维化组比较,Ⅰ型胶原纤维(0.39±0.25比0.97±0.34,P<0.001)和Smad4mRNA(0.11±0.03对0.17±0.10,P<0.05)的表达均显著降低。结论阿魏酸钠可能通过抑制大鼠肺组织Smad4 mRNA的表达,从而具有抗肺纤维化的作用。