端粒和端粒酶与肿瘤关系的研究进展

早在 3 0年代 ,就有学者发现细胞染色体末端有一种能维持染色体结构稳定性的特殊结构 ,并将其命名为“端粒”。它由DNA和蛋白质组成 ,随细胞的分裂逐渐缩短 ,达到一危机点时 ,触发某一信号 ,于是细胞不再分裂而发生衰老、死亡 ,因此它被称为细胞的“分裂时钟”。少数细胞逃逸危机点激活端粒酶 ,它在细胞的增殖、衰老、永生化和癌变中起重要作用。笔者就端粒酶与肿瘤的关系及治疗作如下综述。1　端　　粒1 1　端粒的结构　端粒是真核细胞染色体末端的特殊DNA -蛋白质结构 ,其DNA含有大量的TTAGGGn 串联重复结构 ,该片段在精子细胞中长…     

反义端粒酶催化亚单位抑制喉癌细胞生长的离体实验研究

目的：探讨人端粒酶催化亚单位（hTERT)反义寡核苷酸对人喉癌细胞株Hep-2的生长抑制作用。方法；用脂质体包裹hTERT反义寡核苷酸转染体外培养的Hep-2细胞，分别于转染后24、48、72h用MTT法检测细胞增殖活性，转染的72h行HE染色及端粒酶活性测定。结果：转染后细胞增殖活性降低；细胞生长密度下降；端粒酶活性受到抑制。结论：hTERT反义寡核苷酸短期内可以降低端粒酶活性、抑制喉癌细胞的生长。     

妇科肿瘤癌变的基础研究现状

恶性肿瘤是进行性发展的疾病 ,临床发现时多属晚期 ,治疗亦无过多回旋余地 ,病人的生活质量急剧下降 ,故早期诊断、早期治疗极为重要 ,而早期识别癌前病变则是防止肿瘤发生发展并做出早期治疗的重要环节。1　子宫颈癌子宫颈癌是危害妇女健康的主要恶性肿瘤之一 ,近 4 0年来国内外广泛开展了巴氏涂片和宫颈癌普查普治工作 ,使其发病率及病死率都明显下降。但近年来由于人乳头瘤病毒 (HPV)感染增多 ,宫颈癌发病率有明显上升趋势 ,且患者趋于年轻化 ,故针对癌前病变的基础研究引起人们普遍关注。1.1　HPV感染与宫颈癌前病变自 1976年首次从…     

端粒酶与肺癌

近来年 ,端粒酶与肿瘤相关性研究是肿瘤分子生物学领域的热门课题。正常人体组织中仅生殖细胞、部分造血干细胞及胚胎胎儿时期显示端粒酶活性 ,而恶性肿瘤细胞中端粒酶活性特异性增多。1　端粒与端粒酶端粒 (Tebomere)是真核生物染色体DNA分子末端的特殊结构 ,对维持染色体稳定性和DNA完整复制具有重要作用。这一特殊序列是 2 0世纪 30年代分别由Muller和Mc cIntock发现 ,并由前者命名为端粒 ,由丰富的蛋白质和重复的简单序列DNA构成。 1 988年查明人类染色体端粒序列主要由 5′-TTAGGC - 3′片段重复构成 ,Herley等发现重复序列为 …     

银杏外种皮多糖对SGC-7901细胞p53基因的表达及端粒酶活性的影响

目的　研究银杏外种皮多糖对人胃癌SGC 790 1细胞 p5 3基因表达及端粒酶活性的影响。 方法　应用免疫组织化学ABC法检测 p5 3基因的表达 ;应用TRAP ELISA法检测端粒酶活性。结果　银杏外种皮多糖 (80～ 16 0mg·L-1,4 8h)能抑制人胃癌SGC 790 1细胞突变型 p5 3基因的表达及其端粒酶活性。结论　银杏外种皮多糖抑制SGC 790 1细胞增殖的作用机制可能与其下调突变型 p5 3基因的表达和对端粒酶活性的抑制作用有关     

半边旗多糖对人肺腺癌细胞株SPCA-1凋亡和端粒酶的影响

目的研究半边旗多糖对人肺腺癌细胞系SPCA-1的诱导凋亡作用和对端粒酶活性及亚单位mRNA表达的影响。方法用MTT法、流式细胞术、细胞形态学等方法观察半边旗多糖对SPCA-1细胞的诱导凋亡作用，TRAP-ELISA法测定端粒酶活性，RT-PCR观察端粒酶亚单位mRNA的表达。结果半边旗多糖对SPCA-1细胞有较强的抑制作用，具明显的时间和剂量效应(0．09375-3mg／ml,24h-72h)；可使G0／G1期比例明显升高．G2／M期比例下降、S期先降后升；细胞形态变化较大，有凋亡细胞出现；端粒酶活性明显下降；端粒酶亚单位TP1和hTRTmRNA无明显变化．hTERTmRNA表达减少。结论半边旗多糖可能通过影响细胞周期时相分布、诱导凋亡以及下调端粒酶hTERTmRNA表达，降低端粒酶活性而抑制SPCA-1细胞增殖。     

尼美舒利对食管癌细胞株ECa-109端粒酶活性的影响

目的：研究特异性COX-2抑制剂尼美舒利对食管癌细胞株ECa109端粒酶活性和凋亡的影响，为特异性COX-2抑制剂运用于食管癌的防治提供新的理论依据。方法：采用人食管癌细胞株ECa109作为研究对象，体外药物敏感实验(MTT)检测不同浓度和作用时间的尼美舒利对细胞的增殖抑制效应和凋亡的影响，用PCR-ELSIA半定量法检测细胞端粒酶活性。结果：尼美舒利对人食管癌细胞株的杀伤率和诱导细胞产生凋亡的强弱具有时间和计量依赖性，同时能显著抑制细胞的端粒酶活性，并呈计量依赖关系。结论：尼美舒利能抑制食管癌细胞株ECa109的端粒酶活性，从而促进细胞凋亡，产生抗肿瘤的作用。     

喉癌及癌旁组织端粒酶活性检测在喉癌手术切缘定界中的意义

目的探讨喉鳞状细胞癌、相应癌旁切缘组织的端粒酶活性表达及其在喉癌手术定界研究中的意义.方法采用多聚酶链反应-酶联免疫吸附法(PCR-ELISA)对47例喉鳞状细胞癌、21例不同距离的相应癌旁组织、20例喉炎性息肉组织的端粒酶活性进行定量检测.结果47例喉癌组织中39例端粒酶呈阳性(83%),而20例喉炎性息肉组织端粒酶均为阴性,两组具有显著性差异(P＜0.001).21例癌旁5 mm处的切缘组织中有6例端粒酶呈阳性(28.6%),但其活性水平均低于相应原发肿瘤组织.而10 mm处的切缘组织端粒酶均呈阴性,两组差异有显著性(P＜0.001).结论端粒酶在喉癌组织中有较高的表达,在不同距离的癌旁切缘组织中有不同程度的表达.喉癌及癌旁组织端粒酶活性可能作为预测喉癌浸润性的指标.可望从分子水平评估喉癌手术的切缘状态,以期为指导喉癌手术分子定界提供客观而有价值的资料.     

肿瘤端粒酶靶向腺病毒载体的表达活性

目的　构建针对端粒酶阳性肿瘤的特异性腺病毒载体 ,研究其介导目的基因在肿瘤细胞内的定向表达能力。方法　将端粒酶逆转录酶 (hTERT )启动子克隆入质粒 pDC3 12的多克隆位点构成外源基因表达盒 ,在基因表达盒上下游分别插入 1个绝缘子序列 ,构建针对端粒酶阳性肿瘤的特异性腺病毒载体pSG TPE ;采用Luciferase报告基因进行hTERT启动子的活性分析 ;以pSG TPE携带绿色荧光蛋白 (EGFP)报告基因 ,重组腺病毒AdTPE EGFP ,观察其介导EGFP在肿瘤细胞内的定向表达能力 ,并与CMV启动子控制的腺病毒AdCMV EGFP作对照。结果　hTERT启动子在正常细胞内几乎没有活性 ,而在肿瘤细胞内的活性与SV 40启动子相近。腺病毒AdTPE EGFP能介导EGFP在肿瘤细胞内定向而稳定表达 ,在正常细胞内不表达 ,而对照腺病毒AdCMV EGFP在肿瘤和正常细胞内均表达EGFP。结论　靶向端粒酶阳性肿瘤的腺病毒载体 pSG TPE ,不但提高了对基因表达调控的特异性 ,而且降低了对正常细胞毒性作用。绝缘子的应用隔断了外源基因表达盒和病毒基因表达调控序列之间的互相干扰 ,进一步提高目的基因的表达效率。该载体对肿瘤的靶向基因治疗具有重要的应用价值。     

反义端粒酶PNA对肺癌细胞株生长的体外抑制作用

目的　探讨反义端粒酶肽核酸 (PNA)片段对肺癌细胞株端粒酶活性及细胞株生长的抑制作用。方法　将人工合成的端粒酶反义PNA片段 ,应用脂质体转染法将反义端粒酶序列导入肺腺癌细胞株A5 49及小细胞癌细胞株NCI H44 6中 ,采用MTT法检测活细胞数 ,采用RT PCR ELLISA法检测端粒酶活性。结果　转染 72h后 ,A5 49、NCI H 44 6细胞株端粒酶活性 (A45 0值 )分别由 0 .5 82± 0 .0 3 9和 0 .5 71± 0 .0 43降低至 0 .2 94± 0 .0 48(P <0 .0 1)和 0 .2 76± 0 .0 5 1(P <0 .0 1) ;而两细胞株的活细胞数 (A5 80值 )分别由 0 .485± 0 .0 0 9和 0 .5 13± 0 .0 15降低至 0 .191± 0 .0 2 7(P <0 .0 1)和 0 .13 8± 0 .0 46(P <0 .0 1) ,细胞生长受到显著抑制。结论　反义端粒酶PNA片段具有抑制肺癌细胞株端粒酶活性的作用 ,并可抑制肺癌细胞的生长