CAFs在胃癌组织中的表达及与临床病理特征的关系

目的:探讨胃癌患者间质中肿瘤相关纤维母细胞(CAFs)的表达及与胃癌临床病理特征的关系。方法:采用免疫组织化学Elivision二步法检测71例胃癌组织中α-SMA来验证CAFs的表达,并分析其与胃癌临床病理特征及预后的关系。结果:胃癌组织中黏膜细胞与腺细胞排列杂乱,其中α-SMA在胃癌组织中的表达明显;癌旁组织中α-SMA的表达呈强阳性。胃癌组织α-SMA的表达高于正常组织(P<0.05);癌旁组织高于胃癌组织及正常组织(P<0.05)。胃癌组织α-SMA的表达与胃癌患者的性别、年龄、Lauren分型及组织学分级无关(P>0.05),与肿瘤大小和淋巴结转移相关(P<0.05)。肿瘤直径<3 cm预后较好,5年预后未复发率80.0%,肿瘤直径>5 cm患者5年预后复发转移或死亡者在75.0%。结论:胃癌组织及癌旁组织中CAFs呈高表现,其中癌旁组织表达高于癌组织,其与胃癌肿瘤大小和淋巴结转移呈正相关性,预后较差,与胃癌的侵袭转移密切相关。     

人分泌的凋亡相关蛋白1基因酵母双杂交诱饵载体的构建及表达鉴定

目的构建人分泌的凋亡相关蛋白1(secreted apoptosis-related protein 1,SARP1)基因酵母双杂交诱饵载体,为鉴定SARP1基因相互作用蛋白、探讨SARP1基因在瘢痕组织中的生物学功能奠定基础。方法根据GenBank中SARP1的mRNA序列,设计分别带有NdeⅠ和SalⅠ酶切位点的上、下游引物,人工合成SARP1基因片段,扩增SARP1基因片段,构建含pGBKT7-SARP1基因的重组质粒,用NdeⅠ和SalⅠ进行双酶切、PCR,凝胶电泳及测序。用醋酸锂法将序列正确的重组质粒pGBKT7-SARP1(卡那霉素抗性筛选)转化入AH109酵母菌株,在缺陷型培养基上观察pGBKT7-SARP1在AH109中的表达情况。结果 SARP1基因扩增后的片段大小符合预期,并成功克隆入pGBKT7载体中;酶切后凝胶电泳及DNA测序显示pGBKT7-SARP1基因重组载体构建正确,对酵母菌株AH109无毒性,且不具自主激活报告基因的效应。结论成功构建了pGBKT7-SARP1基因酵母双杂交诱饵载体。     

老年人营养状况及相关因素研究现状

随着生活水平的提高,人类的寿命日趋延长。我国2000年人口普查,大于60岁的老年人占总人口数的11%,预测2025年升至20%,2050年达25%,老年人口总数将达到4亿。探讨老年人的营养状况,杜绝不合理膳食营养对老年人健康的影响,具有重要的社会价值和经济效益。本文就老年人营养状况及相关因素的研究现状进行探讨如下。     

萝卜硫素通过Nrf2/ARE信号通路对急性肺损伤小鼠的保护作用研究

目的 探讨萝卜硫素(SF)能否通过上调转录因子NF-E2相关因子2(Nrf2),起到抗炎和抗氧化应激作用减轻小鼠急性肺损伤(ALI)。 方法 将36只健康小鼠随机分成4组:对照组(C组),急性肺损伤组(ALI组),SF溶剂组和SF组。SF组于腹腔注射SF 20 mg/kg,SF溶剂组于腹腔注射同等量的SF载体溶剂,2次/d,连续3 d。第4天时,ALI组、SF溶剂组和SF组腹腔注射脂多糖(LPS)10 mg/kg制备内毒素诱发急性肺损伤模型,C组则腹腔内注射同等容量的生理盐水。注射LPS或生理盐水6 h后,麻醉开腹,从下腔静脉取静脉血,通过ELISA法检测血清中IL-6、肿瘤坏死因子α(TNF-α)含量。光镜下观察肺组织病理学结果,并进行肺损伤评分。检测并计算小鼠肺湿重/干重比,并采用Western blotting法测定肺组织内Nrf2核蛋白表达,比色法检测肺组织匀浆中髓过氧化物酶(MPO)、一氧化氮合酶(iNOS)、超氧化物歧化酶(SOD)的含量。 结果 与C组比较,ALI组和SF溶剂组肺损伤评分、IL-6、TNF-α、MPO、iNOS升高,SOD和湿重/干重比值降低,Nrf2蛋白表达上调(均P<0.05)。与ALI组比较,SF组肺损伤评分、IL-6、TNF-α、MPO、iNOS降低,SOD、湿重/干重比值升高,Nrf2蛋白表达上调(均P<0.05),而SF溶剂组各项指标与ALI组比较差异无统计学意义(均P>0.05)。 结论 SF可通过诱导Nrf2的表达,减轻LPS诱导的小鼠急性肺损伤的严重程度,使血清促炎症介质浓度降低,使组织中氧化应激损伤指标降低,Nrf2转录因子对ALI的保护作用与其抗炎和抗氧化作用有关。      

医学生人格特质与心理健康情况的典型相关分析研究

目的 医学生作为医生的前身,不仅要求具有精湛的职业技能,还必须具备良好的心理素质。了解当今医学生人格特质及其心理健康状况,分析当今医学生人格特质与心理健康状况的特点,并探讨两者的内在联系,为更有针对性地开展心理健康教育和制定相关干预措施提供科学依据,也为日后相关研究的开展提供一定的理论依据。 方法 在2017年8—11月间,以粤东某高校医学院在校医学生为研究对象,通过SCL-90症状自评量表评估参与者的心理健康状态、大五人格量表调查参与者的人格特质。问卷调查以无记名方式进行。运用Excel 2016和SPSS 20.0统计软件进行数据录入与处理分析,运用典型相关分析方法对医学生人格特质和心理健康的相关性进行分析。 结果 SCL-90问卷得分与全国大学生常模比较,除“强迫症状”“焦虑”“精神病性”外,其余各因子的差异均具有统计学意义(均P<0.05)。典型相关分析中,U₁、V₁典型变量相关系数为0.675(P<0.001),U₂、V₂典型变量相关系数为0.485(P<0.001)。典型相关分析结果表明,神经质和宜人性是反映当代医学生人格特质的主要指标,敌对和偏执是反映医学生心理症状的主要指标。本次研究的结果也表明,宜人性的人格特质有利于降低心理症状水平,而神经质特质则对心理症状水平有强化作用。 结论 从积极心理学的角度去引导医学生宜人特质等积极人格特质的发展和形成,对改善医学生的心理症状水平、提高医学生的心理健康水平、促进医学生的发展有着重要的意义。      

奥沙利铂联合卡培他滨对实验性胃癌大鼠胃癌组织中肿瘤相关因子表达的影响及其协同抗肿瘤作用

目的：探讨奥沙利铂联合卡培他滨对实验性胃癌大鼠胃癌组织中肿瘤相关因子表达和血清炎症因子水平的影响,阐明其抗肿瘤作用的可能机制。方法：60只Wistar大鼠随机分为对照组、模型组、奥沙利铂组、卡培他滨组和奥沙利铂联合卡培他滨组（联合组）,每组12只。采用BGC823胃癌细胞株复制实验性胃癌模型,实验大鼠按分组要求分别给予奥沙利铂（20 mg·kg^-1）和（或）卡培他滨（400 mg·kg^-1）,对照组和模型组大鼠给予等体积生理盐水,连续给药8周。测定大鼠肿瘤平均质量,TUNEL染色检测胃癌细胞的凋亡情况,Western blotting法检测大鼠胃癌组织中P53、信号转导与激活因子3（STAT3）和血管内皮生长因子（VEGF）蛋白表达水平,酶联免疫吸附法（ELISA）测定大鼠血清中白细胞介素6（IL-6）、白细胞介素10（IL-10）和肿瘤坏死因子α（TNF-α）水平。结果：与对照组比较,模型组大鼠胃癌组织中P53、STAT3和VEGF蛋白表达水平及血清中IL-6、IL-10和TNF-α水平明显升高（P<0.05）;与模型组比较,奥沙利铂组、卡培他滨组和联合组大鼠肿瘤平均质量及胃癌组织中P53、STAT3和VEGF蛋白表达水平均明显降低（P<0.05）,胃癌组织中细胞凋亡指数（AI）明显升高（P<0.05）,血清中IL-6、IL-10和TNF-α水平明显降低（P<0.05）;联合组大鼠肿瘤平均质量和胃癌组织中P53、STAT3和VEGF蛋白表达水平及血清中IL-6、IL-10和TNF-α水平明显低于奥沙利铂组和卡培他滨组（P<0.05）。结论：奥沙利铂和卡培他滨能够通过降低大鼠胃癌组织中肿瘤相关因子蛋白表达水平和血清中IL-6、IL-10和TNF-α水平达到抗肿瘤作用,二者联合应用的抗肿瘤作用明显优于单用奥沙利铂或卡培他滨。     

不同糖代谢状态人群血清CTRP3和25(OH)D水平及其与胰岛素抵抗的关系

目的：测定不同糖代谢状态人群血清中C1q/肿瘤坏死因子相关蛋白3（CTRP3）和25羟维生素D[25（OH）D]的水平,探讨其影响因素并分析其与胰岛素抵抗（IR）的关系。方法：选择初诊2型糖尿病（T2DM）患者44例（T2DM组）、糖耐量减低（IGT）患者42例（IGT组）和体检健康者54人（正常对照组）,测定各组受试者血清中CTRP3、空腹静脉血糖（FPG）、糖化血红蛋白（HbA1c）、甘油三酯（TG）、总胆固醇（TC）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）、空腹胰岛素（FIns）和25（OH）D水平,计算体质量指数（BMI）、稳态模型IR指数（HOMA-IR）、稳态模型胰岛素分泌指数（HOMA-β）,两因素之间相关性分析采用Pearson相关分析法,采用多元逐步回归分析法分析HOMA-IR和HOMA-β的影响因素。结果：与正常对照组比较,IGT组患者血清中HDL-C、25（OH）D水平和HOMA-β值明显降低（P<0.05）,T2DM组患者血清中FPG、HbA1c、TG、TC、FIns水平和BMI、HOMA-IR值明显升高（P<0.05）,而血清中CTRP3、HDL-C、25（OH）D水平和HOMA-β值明显降低（P<0.05）;与IGT组比较,T2DM组患者血清中FPG、HbA1c、TG、FIns水平和HOMA-IR值明显升高（P<0.05）,血清中HDL-C水平和HOMA-β值明显降低（P<0.05）。不同糖代谢状态人群血清中CTRP3水平与HbA1c、FIns水平和HOMA-IR呈负相关关系（r=-0.391,P<0.05;r=-0.198,P<0.05;r=-0.481,P<0.05）;25（OH）D水平与TG、FPG和HOMA-IR呈负相关关系（r=-0.209,P<0.05;r=-0.406,P<0.05;r=-0.306,P<0.05）,与HOMA-β呈正相关关系（r=0.329,P<0.05）。HbA1c和CTRP3为HOMA-IR的独立影响因素,25（OH）D、FPG和HbA1c为HOMA-β的独立影响因素。结论：血清CTRP3和25（OH）D水平与IR呈负相关关系,在糖尿病发生发展过程中起抑制作用。     

电离辐射对沉默ATRX的HeLa细胞DNA损伤修复的影响

目的：靶向沉默宫颈癌HeLa细胞中α-地中海贫血/精神发育迟滞综合征X染色相关蛋白（ATRX）,检测电离辐射对ATRX、γH2AX和Rad51蛋白表达及γH2AX和Rad51焦点数的影响,探讨ATRX参与辐射后HeLa细胞DNA损伤修复的作用。方法： 3条ATRX-shRNA和阴性对照（Control-shRNA）的慢病毒载体转染293T细胞,收集慢病毒并感染HeLa细胞,利用puromycin筛选获得稳定沉默ATRX的细胞系,分别命名为shA₁-HeLa、shA₂-HeLa、shA₃-HeLa和shCon-HeLa,采用Western blotting法检测沉默ATRX效率以及电离辐射后ATRX、γH2AX和Rad51蛋白的表达,采用免疫荧光技术观察shCon-HeLa和shA₁-HeLa组中γH2AX和Rad51焦点并计数其数量。结果： shCon-HeLa细胞中可见ATRX蛋白表达,而shA₁-HeLa、shA₂-HeLa和shA₃-HeLa细胞中均无ATRX蛋白表达,表明沉默效率较高。在2和8 Gy剂量照射后1、6和24 h,shCon-HeLa组ATRX蛋白表达量逐渐升高,24 h时表达量最高,且8 Gy照射后1、6和24 h表达量均较高。4 Gy照射后0~6 h,与shCon-HeLa组比较,shA₁-HeLa组γH2AX焦点数在1 h明显升高（P<0.05）,而后逐渐降低,但在6 h焦点数仍明显高于shCon-HeLa组（P<0.01）;Rad51焦点数与γH2AX焦点数变化相一致,与shCon-HeLa组比较,shA₁-HeLa组Rad51焦点数在1 h明显升高（P<0.05）,在6 h时shA₁-HeLa焦点数仍明显高于shCon-HeLa组（P<0.01）。4 Gy照射后0~16 h,shA₁-HeLa组细胞中γH2AX和Rad51蛋白表达量均较shCon-HeLa组增加。结论：成功获得稳定沉默ATRX的HeLa细胞模型,电离辐射可诱导ATRX蛋白表达量增加,且沉默ATRX的HeLa细胞中γH2AX和Rad51焦点数及蛋白表达量均高于对照组,提示ATRX参与了辐射诱导的DNA损伤修复过程。     

老年精神病患者医院内易感病原学与耐药性分析及相关因素调查

目的 分析老年精神病患者医院获得性感染病原学与耐药性的相关影响因素调查,为临床合理用药和对因护理提供依据。 方法 选择2016年2月～2017年2月我院79例老年精神病患者医院获得性感染的状况及相关性因素进行调查分析。 结果 79例患者中,共发生医院获得性感染13例,其中,感染部位：下呼吸道感染占61.54%为最高。感染因素以高龄、侵入性操作、住院时长以及合并基础病为危险高发。医院获得性感染药物敏感性和耐药性分析中,发现阿米卡星和亚安培南应用于革兰阴性菌的耐药率较低,对革兰阴性菌整体有较高的敏感性。 结论 老年精神病患者感染的致病菌以革兰阴性杆菌为主,革兰阴性杆菌中的铜绿假单胞菌、大肠埃希氏菌等是造成压疮患者感染的主要病原菌,临床应根据药敏结果结合耐药趋势进行合理用药,在抗菌药物应用应加强用药合理性,减缓耐药菌的出现。     

活性维生素D3 对阿霉素肾病大鼠CD2AP 的影响

目的 探讨活性维生素D 类似物骨化三醇对阿霉素（ADR）肾病大鼠足细胞CD2 相关蛋白 （CD2AP）表达的影响。方法 随机法选取60 只Sprasue-Dawley 大鼠,单次尾静脉注射ADR 7.5 mg/kg 复制 ADR 肾病模型。2 周后检测24 h 尿蛋白、血清总蛋白（TP）、血浆白蛋白（ALB）、总胆固醇（TC）、血清 肌酐（Scr）水平。将模型大鼠随机均分为模型组（ADR）、治疗组（ADR+VitD3）,另取30 只大鼠作为对照 组。于模型复制成功后2、4、6、8 和10 周检测24 h 尿蛋白。取大鼠肾组织,用Masson 染色观察肾小球的 病理损伤,透射电子显微镜观察足细胞超微结构,免疫组织化学染色和Western blotting 检测CD2AP 定位和 表达。结果 2 周后3 组24 h 尿蛋白、TP、ALB、Scr、TC 比较,差异有统计学意义（P <0.05）,提示模型复 制成功。大鼠24 h 尿蛋白随治疗周数延长而减少（P <0.05）。组织病理学结果显示,模型组肾组织大量纤维 增生,肾小管扩张和肾间质纤维化。透射电子显微镜结果显示,模型组肾足细胞结构损伤,足突广泛融合,核 畸形,脂滴聚集;治疗组较模型组有所改善。免疫组织化学染色结果显示,模型组CD2AP 表达较低,活性维 生素D3 治疗后阳性表达面积增加（P <0.05）。各组大鼠CD2AP 表达水平比较,差异有统计学意义（P <0.05）; 模型组降低,治疗组随时间延长表达增强（P <0.05）。结论 活性维生素D3 通过上调CD2AP 表达,减轻足 细胞的损伤,抑制肾组织病理纤维化增生,发挥肾保护功能,减少蛋白尿的产生。