氯化甲基汞对人SHG44胶质瘤细胞抗肿瘤活性的体外实验研究

目的探讨氯化甲基汞(MMC)对人SHG44胶质瘤细胞株的增殖、杀伤和细胞凋亡的影响,为胶质瘤治疗提供理论依据。方法体外培养SHG44胶质瘤细胞,分为空白对照组和MMC实验组(按氯化甲基汞浓度分组)。采用MTT比色法检测不同浓度MMC对体外培养SHG44细胞的增殖抑制和杀伤作用。用流式细胞仪测定MMC对SHG44细胞凋亡/坏死的影响。结果在体外1.25、2.50、5.00和10.00μmol.L-1的MMC均可抑制SHG44胶质瘤细胞的增殖,SHG44胶质瘤细胞存活率明显低于对照组(P0.05),增殖抑制作用随浓度的增加而增强。SHG44胶质瘤细胞接触2.50、5.00和10.00μmol.L-1的MMC后4、8、16和32 h的细胞存活率明显低于对照组(P0.05),细胞杀伤作用随浓度的增加和时间的延长而增强。SHG44胶质瘤细胞接触0.075、0.15、0.3和1.2μmol.L-1氯化甲基汞12 h后细胞凋亡/坏死率呈现剂量依赖性增高趋势(P0.01)。结论MMC具有杀伤SHG44胶质瘤细胞、抑制其增殖、诱导凋亡的抗肿瘤活性,有应用于胶质瘤治疗的潜在价值。     

硒与n-3多不饱和脂肪酸对甲基汞神经毒性影响的研究进展

水产品是人类甲基汞暴露的来源之一,同时包含多种对神经系统发育有重要作用的营养物质,如硒、n-3多不饱和脂肪酸。目前,多项研究提示硒与n-3多不饱和脂肪酸对甲基汞神经毒性可能具有潜在的保护作用。本文回顾了硒与n-3多不饱和脂肪酸对甲基汞神经毒性影响的流行病学与实验研究,重点讨论了其与甲基汞可能的相互作用及作用机制,在此基础上对未来的研究方向进行展望。     

基因组学技术初步分析甲基汞神经毒性功能基因

目的探讨甲基汞神经毒性差异表达基因功能。方法利用基因芯片筛选大鼠暴露体重剂量为0·5mg/Kg的氯化甲基汞后脑中的差异表达基因,并利用基因组学技术分析其功能。结果基因表达谱中差异表达基因共有303条,其中上调基因为170条,下调基因为133条。发生显著性改变的功能基因主要涉及到①免疫应答及解毒作用;②遗传信息传递与表达;③细胞信号传导;④神经传导;⑤细胞增殖与分化;⑥细胞凋亡;⑦其它未知功能等7组。在暴露组样本中,脑中有关细胞信号传导和神经传导功能基因发生了特别显著的差异表达。结论甲基汞通过对信号传导过程的影响,发挥其神经毒性的作用。     

松花江流域渔业生态环境汞污染调查

目的 掌握松花江流域渔业生态环境汞污染的现状水平.方法 于2007-2009年对松花江干流、第二松花江干流共11个断面的水质、底质和鱼类汞含量状况进行了调查研究,并参照渔业水质标准、无公害水产品产地环境要求、无公害水产品安全要求和松花江流域汞的背景值对流域生态环境汞污染进行评价.结果 江水中总汞含量0.000 010～...     

茶多酚对甲基汞致大鼠大脑皮质神经元氧化损伤的防护作用

目的探讨茶多酚(tea polypheonols,TP)对甲基汞(methylmercury,MeHg)所致大鼠大脑皮质神经元氧化损伤的防护作用及机制。方法进行大鼠大脑皮质神经元原代培养,细胞成熟后给予0.01、0.1、1、2μmol/L MeHg分别处理0.5、1、3、6、12 h,通过测定培养液中乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)活力来进行MeHg细胞毒性分析;根据测定结果选择最具代表性的1μmol/L MeHg暴露6 h作为MeHg染毒组。应用同样方法进行TP预处理组选定,向培养液中分别加入终浓度为5、10、20及40μmol/L TP,分别预处理0.5、1、3及6 h后,再加入终浓度为1μmol/L MeHg,继续培养6 h后测定培养液LDH漏出,根据实验结果选定5、10、20μmol/L预处理3 h作为TP预处理剂量及时间;细胞经各剂量TP预处理后,再暴露于1μmol/L MeHg 6 h,测定神经元细胞凋亡率、非蛋白巯基(non-protein sulfhydryl,NPSH)含量、活性氧簇(reactive oxygen species,ROS)水平及Na+-K+-ATPase和Ca2+-ATPase活力。结果与对照组比较,随着染MeHg剂量的升高,培养液中LDH活力逐渐升高,呈现剂量和时间依赖性的效应关系。TP预处理后,LDH活力逐渐降低,在10、20μmol/L TP预处理组显著降低(P0.05或P0.01);1μmol/L MeHg导致神经元凋亡率显著升高,NPSH含量显著降低,ROS水平显著升高,Na+-K+-ATPase和Ca2+-ATPase活力显著降低,差异均有统计学意义(P0.01),TP预处理对上述指标的拮抗作用呈现剂量-效应关系,差异均有统计学意义(P0.05或P0.01)。结论 TP对MeHg所致大鼠大脑皮质神经元氧化损伤具有一定的防护作用。     

右美沙芬和利鲁唑对甲基汞染毒大鼠神经毒性的影响

目的研究右美沙芬(dextromethorphan,DM)和利鲁唑(riluzole)对甲基汞染毒大鼠神经毒性的影响。方法将健康清洁级Wistar大鼠28只按体重随机分为对照组、氯化甲基汞组、右美沙芬+氯化甲基汞组、利鲁唑+氯化甲基汞组,每组7只。对照组和氯化甲基汞组皮下注射生理盐水溶液,右美沙芬+氯化甲基汞组和利鲁唑+氯化甲基汞组分别皮下注射13.5μmol/kg右美沙芬、21.35μmol/kg利鲁唑。注射2h后,对照组腹腔注射生理盐水,氯化甲基汞组、右美沙芬+氯化甲基汞组、利鲁唑+氯化甲基汞组腹腔注射氯化甲基汞溶液12.0μmol/kg,注射容量均为5ml/kg。连续进行4周,每周5天,每天染毒氯化甲基汞1次,每周一、三、五染毒右美沙芬、利鲁唑。测定大脑皮质中汞(Hg)、谷氨酰胺(Gln)、谷氨酸(Glu)含量以及小脑中琥珀酸脱氢酶(SDH)、Na+-K+-ATP酶、Ca2+-ATP酶活力。结果与对照组相比,氯化甲基汞组大脑皮质中Hg、Glu含量上升,Gln含量降低,小脑中SDH和Na+-K+-ATP酶、Ca2+-ATP酶活力降低,差异均有统计学意义(P0.05或P0.01)。与氯化甲基汞组相比,右美沙芬+氯化甲基汞组和利鲁唑+氯化甲基汞组大脑皮质Hg、Glu含量降低,Gln含量升高,SDH、Na+-K+-ATP酶和Ca2+-ATP酶活力升高,差异均有统计学意义(P0.05或P0.01)。结论甲基汞可扰乱谷氨酸-谷氨酰胺循环,右美沙芬和利鲁唑对甲基汞神经毒性具有一定的拮抗作用。     

甲基汞对体外培养大鼠胚胎致畸性的形态学研究

采用体外全胚胎培养模型和显微镜检查方法，对接触不同剂量氯化甲基汞的离体ＳＤ大鼠胚胎进行了病理学观察。结果表明：甲基汞浓度为０．１μｇ／ｍｌ时，神经管上皮层细胞脱落，室管膜层变薄和排列无序；尿生殖窦、肝脏等亦出现一定病理变化。随着染毒剂量的增加，上述组织的病理改变更为显著，虽明显的剂量效应关系。０．４～０．８μｇ／ｍｌ甲基汞还可诱发脑室、心脏、前肢芽等组织器官发生病理学改变。甲基汞浓度≤０．８μｇ／ｍｌ时未见对卵黄囊结构的明显损害，揭示甲基汞能迅速通过卵黄囊胎盘而直接攻击胚胎，这就从病理学的角度证明，甲基汞的致畸机制与其直接细胞毒性作用有关     

氯化甲基汞在体外抑制脑毒蕈碱受体结合的恢复效应

为研究甲基汞对脑毒蕈碱（Ｍ）受体的影响及常用拮抗剂对甲基汞引起该受体特异结合抑制的恢复效应，应用放射性配体结合技术进行了体外试验。结果显示，甲基汞能明显抑制３Ｈ－二苯基羟乙酸奎宁酯（３Ｈ－ＱＮＢ）与脑Ｍ受体的特异结合，ＩＣ５０为４．８ｍｍｏｌ／Ｌ。巯基化合物二巯基丙磺酸钠，二巯基苏糖醇，谷胱甘肽及半胱氨酸能使甲基汞抑制的３Ｈ－ＱＮＢ的结合不同程度地恢复，而乙二胺四乙酸、亚硒酸钠则无这种恢复效应，表明甲基汞对脑Ｍ受体的影响是汞与受体上巯基基团相互作用的结果，而含有巯基的拮抗剂能与受体上巯基团结合的甲基汞竞争结合，从而恢复脑Ｍ受体与配体的结合能力。     

硒抗砷,氟,甲基汞致畸作用的体外实验研究

用大鼠全胚胎培养法并结合电镜技术探讨了硒与砷，氟，甲基汞之间是否存在交互作用及作用类型。结果表明三者均能诱发体外培养的胚胎发育异常，并呈剂量反应关系。加入０．５μｇ／ｍｌ硒后明显拮抗１．０μｇ／ｍｌ砷，１０μｇ／ｍｌ氟和０．４μｇ／ｍｌ汞的致畸性及胚胎毒性，但不能缓解３．０μｇ／ｍｌ砷和２０μｇ／ｍｌ氟的发育毒性，主要呈现砷，氟的独立作用。