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中国汉坦病毒H82O5株G2糖蛋白基因的克隆及在真核细胞中的瞬时表达 总被引:2,自引:1,他引:1
从感染病毒乳鼠脑组织提取总RNA,采用RT-PCR和分子克隆技术将扩增到的G2糖蛋白基因插入含CMV启动子的pcDNA3.1/His质粒载体中,通过脂质体介导转染COS-7细胞,用SDS-PAGE、Western-blot及IFIA方法分别测定表达产物的相对分子量及特异性。结果证明获得正向插入的G2-pcDNA3.1/His重组表达质粒,表达产物的相对分子量为56ku,与理论预期大小一致,并且可与汉坦病毒H8205株的腹水抗体起特异反应。表明构建的G2-pcDNA3.1/His重组质粒所表达的蛋白为中国汉坦病毒株特有,能在哺乳动物细胞中表达并具有抗原性,重组质粒可应用于汉坦病毒的DNA疫苗研究。 相似文献
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人肿瘤特异抗原MAGE-3基因疫苗的构建和表达 总被引:8,自引:1,他引:7
目的:克隆肿瘤特异性共享抗原mage-3基因,制备基于α-病毒复制酶的高效黑色素瘤特异性基因疫苗。方法:用RT-PCR方法从黑色素瘤细胞系LB373中制备mage-3基因,以含α-病毒复制酶的哺乳细胞高效表达质粒pSMART2a为载体,构建重组DNA疫苗。重组子用载体中的T7和T3启动子序列为测序引物进行自动测序。再将鉴定过的重组质粒用脂质体法转化293细胞,用免疫印迹法和免疫组化法鉴定转化细胞中mage-3蛋白的表达。结果:正确构建了mage-3/pSMART2a重组质粒,并且在转化此质粒的293细胞中检测出了mage-3蛋白的表达。结论:此重组mage-3/pSMART2a质粒可以作为肿瘤特异的DNA疫苗,可进行下一步的肿瘤动物模型的疫苗接种及相关免疫学效应研究。 相似文献
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默克公司(Merck)2006年第二季度净收益翻番,达到14.99亿美元,而上年同期仅为7.21亿美元。该季度过敏性哮喘治疗药孟鲁司特(montelukast,Singulalr)和疫苗产品的强劲销售部分抵消了降血脂药辛伐他汀(simvastatin,舒降之)专利到期带来的损失,公司销售收入增长6%。同时,默克上调了全年收益预期。 相似文献
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中华医学会第12次全国病毒性肝炎与肝病学术会议近日在北京召开 总被引:1,自引:0,他引:1
陈新 《北京大学学报(医学版)》2005,37(3):264
中华医学会第12次全国病毒性肝炎与肝病学术会议近日在北京召开。中华医学会肝病学会主任委员庄辉院士表示,近年来乙型肝炎(乙肝)流行病学趁势和特征有所改变。首先,传播途径已有所不同,由于新生儿乙肝疫苗免疫接种的普遍开展,乙肝的母婴传播比例下降,而医源性传播、性行为传播和肠道外传播(如静脉注射毒品等)则明显增多。其次,乙肝e抗原(HBeAg)阴性的患者增多。目前中国大陆地区乙肝e抗原阴性的慢性乙肝患者已上升至21%,中国台湾地区为20%,香港特别行政区为11%。 相似文献
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细胞免疫是机体免疫反应的基础,在抗病毒感染中具有重要的地位,但目前对许多病毒感染和免疫后的细胞免疫状态报告较少,尤其是对狂犬疫苗接种后的反应在国内尚未见报告,淋巴细胞在疫苗免疫后的活性反应、动态变化及其作用等的资料仍不完整。细胞免疫的检查方法常用的是皮肤反应和体外试验,但这些方法手续繁杂,特异性不高,敏感度低,客观性差。近年来所用的~3H-Tdr掺入法测定淋巴细胞转化,提高了敏感性和客观性,因其条件要求较高而影响了 相似文献