维生素D3受体对hsp90β基因表达的调控作用

鉴于热休克蛋白９０β（ｈｓｐ９０β）基因内含子中含有维生素Ｄ３受体（ＶＤＲ）结合位点，为探讨作为核受体家族成员的ＶＤＲ是否对核受体特异分子伴侣的ｈｓｐ９０β基因的表达具有调控作用，我们开展了本项研究。分别将野生型ＶＤＲ、含Ｎ端（１～１３３氨基酸残基）及Ｃ端（２８１～４２７氨基酸残基）片段的ＶＤＲ突变体真核表达质粒与人ｈｓｐ９０β基因调控片段（－１０３９／＋１５３１）介导的氯霉素乙酰基转移酶（ＣＡＴ）报告基因质粒共转染Ｊｕｒｋａｔ细胞，检测正常及经热休克（４２℃，１ｈ）处理后细胞裂解液中ＣＡＴ活性。结果表明ＶＤＲＮ端增强、而Ｃ端抑制ｈｓｐ９０β的组成性表达；在热诱导条件下野生型ＶＤＲ对ｈｓｐ９０β的表达有一定的抑制作用，而其Ｃ端片段的抑制较强。为进一步研究ＶＤＲ对细胞内源性热休克基因表达的影响，我们用ＲＴＰＣＲ方法研究了ＶＤＲ的对细胞内ｈｓｐ９０β基因ｍＲＮＡ水平的影响，发现ＶＤＲ过表达对ｈｓｐ９０β的热诱导表达明显抑制。结果提示ＶＤＲ对ｈｓｐ９０β基因的组成性和热诱导表达的调控机制不同。     

乙型肝炎病毒正链转录及调节的研究进展

乙型肝炎病毒正链转录体(HBV asRNA),通过与HBV负链转录产生的mRNA互补结合成双链RNA(dsRNA),在核内或胞质中下调病毒的转录与表达,是病毒复制表达的重要自身调节分子。HBV通过抑制正链的转录,保护负链的转录产物作为逆转录及翻译相应病毒蛋白的模板,促进自身的复制与表达。因此,研究HBV正链的转录与调节,能深入对HBV分子病毒学机制的探索,为今后的抗病毒治疗提供新的思路。     

SIRS期NF－κB的基因转录调控

炎症反应综合征 (ＳＩＲＳ)是多器官功能失常综合征 (ＭＯＤＳ)重要的发病基础 ,是在多种因素的作用下机体产生细胞因子、炎症介质的应激状态 ,使致炎与抗炎体系失衡的临床症候群。最近的研究发现 ,许多细胞因子和炎症介质由转录因子ＮＦ -κＢ(ｎｕｃｌｅａｒｆａｃｔｏｒ -κＢ)调控[1] 。ＮＦ -κＢ最初是由Ｓｅｎ等[2 ] 从Ｂ淋巴细胞核中提取的一种与免疫球蛋白κ轻链基因的增强子κＢ序列特异结合的蛋白因子 ,后被证明广泛存在于淋巴细胞和非淋巴细胞中。细胞在静息状态下 ,ＮＦ -κＢ以无活性状态潜伏于细胞质中 ,在细胞受到炎症介质…     

顺式串联双拷贝DuIFN—γ基因的真核表达

目的：以鸭γ－干扰素（DuIFN-γ)基因为目的基因,研究同一启动子调控下,不同拷贝数的目的基因的表达状况。方法：采用基因重组技术构建含DuIFN-γcDNA单拷贝和双拷贝重组质粒并转入真核细胞COS－7中进行表达。DuIFN-γ活性采用Griess试剂检测。结果：双拷贝重组质粒和单拷贝重组质粒50％最大活性稀释度分别为1：320和1：160。双拷贝重组质粒转染上清稀释10240倍后,仍保留DuIFN-γ活性,而单拷贝重组质粒转染上清经1280倍稀释后,即丧失活性。结论：在同一启动子作用下,顺式插入双拷贝目的基因可明显增强目的基因在真核细胞中的表达量。     

顺式串联双拷贝DuIFN一γ基因的真核表达

目的:以鸭γ-干扰素(DuIFN-γ)基因为目的基因,研究同一启动子调控下,不同拷贝数的目的基因的表达状况.方法:采用基因重组技术构建含DuIFN-γcDNA单拷贝和双拷贝重组质粒并转入真核细胞COS-7中进行表达.DuIFN-γ活性采用Griess试剂检测.结果:双拷贝重组质粒和单拷贝重组质粒50%最大活性稀释度分别为1:320和1:160.双拷贝重组质粒转染上清稀释10240倍后,仍保留DuIFN-γ活性,而单拷贝重组质粒转染上清经1280倍稀释后,即丧失活性.结论:在同一启动子作用下,顺式插入双拷贝目的基因可明显增强目的基因在真核细胞中的表达量.     

肺炎克雷伯菌KbvR调控I型菌毛FimH的合成与功能研究北大核心CSCD

目的明确KbvR对I型菌毛顶端蛋白编码基因fimH的调控作用及其生物学功能。方法在kbvR基因敲除株的基础上构建kbvR与fimH基因的双敲除株,通过扫描电镜、RT-PCR、酵母凝集试验、细胞试验等方法分析在kbvR基因敲除及ΔkbvRΔfimH基因双敲除时细菌I型菌毛的形成、生物膜产生、对吞噬细胞的侵袭能力改变。结果RNA-seq及RT-PCR半定量试验显示kbvR基因敲除株中fimH基因表达增加,扫描电镜及酵母凝集试验显示kbvR基因敲除株菌毛形成能力增强。通过同源重组的方式在kbvR基因敲除株的基础上成功获得ΔkbvRΔfimH双基因敲除株。相对于kbvR基因敲除株,ΔkbvRΔfimH双基因敲除株菌毛形成降低,对抗巨噬细胞吞噬能力提升,但生物膜形成能力无明显变化。结论KbvR对肺炎克雷伯菌I型菌毛FimH蛋白合成起负调控作用,并通过对I型菌毛的合成而影响细菌的抗吞噬能力,但不参与细菌生物膜形成。     

论医疗事故赔偿纠纷的法律适用

由于我国医疗事故赔偿纠纷处理的有关法律、行政法规及司法解释之间存在着不统一、不配套的矛盾。因此,在审理医疗事故赔偿纠纷案件中的分歧颇大 这既不利于正确地维护医患双方的合法权益,也不利于医疗纠纷的顺利解决及社会秩序的稳定。因此,正确地认识与解决医疗事故赔偿纠纷法律适用中的矛盾,具有十分重要的意义。