单细胞转录组测序技术在人精原干细胞研究中的应用

精原干细胞的自我更新、增殖与分化对于维持精子发生至关重要。然而,调控这一过程的分子机制尚未完全阐明。精原干细胞具有不同细胞亚型,其在精子发生过程中扮演不同角色。单细胞转录组测序技术提供有效的手段,揭示各精原细胞亚型及其转录组水平和生物学功能变化,为精原干细胞的分子机制研究提供新思路。     

无精症患者的精液特征及生化分析

无精子症占男性不育病例的10%-20%,其病因多而不确定,用药物和手术等传统治疗效果均不佳。卵细胞内单精子注射(ICSI)技术的出现,给无精子症患者带来了福音。但临床只有通过实验室检查,进行病因分析,才能对症治疗。本文试图通过精液常规和生化检测,分析无精症的精液特征及生化结果,探讨无精症的原因,以便为辅助生殖技术的选择提供更有用的依据。1对象与方法1·1临床病例选择:从本生殖医学中心男性不育患者中随机选择无精子患者136例,年龄在22-40岁之间,不孕时间为2-7年。1·2方法1·2·1精液常规显微镜检查:按照WHO标准对留取的全部精液进…     

猕猴输精管内注射高分子聚合物HFMC后对睾丸组织结构的影响

本实验选用具有生育力成年雄性猕猴７只，在直视下行双侧ＨＦＭＣ输精管内注射，每侧剂量分别为３０ｍｇ１只，６０ｍｇ和１００ｍｇ各３只；于注射后２．５年和３．５年分别处死动物，取睾丸组织进行光镜和电镜观察．结果发现：猕猴注射ＨＦＭＣ２．５年后，睾丸光镜大部分曲细精管生精上皮结构完整，排列整齐。仅见局部少数管腔生精上皮层数减少，上皮细胞轻度水样变性等病理改变。电镜下曲细精管内除支持细胞内脂褐素增多，轻度基底膜增厚和精母细胞内质网扩张外，各级生精细胞，支持细胞及细胞间连接复合体等超微结构未见明显异常。注射ＨＦＭＣ３．５年后猕猴的光镜、电镜结果与注射后２．５年结果相似，但局部改变较２．５年组轻。上述结果表明：猕猴输精管内注射一定剂量ＨＦＭＣ节育不会引起睾丸组织的严重病理改变。但是，由于注射ＨＦＭＣ后，ＨＦＭＣ释放Ｈ＋及其对输精管的暂时阻塞，改变了精子生存的内环境，使睾丸出现局部轻度病理改变，随着ＨＦＭＣ逐渐溶解排出，睾丸功能相继恢复正常，配对产仔。为ＨＦＭＣ应用提供了安全性依据。     

中国人原发无精与严重少精症Y染色体AZF区域微缺失的分子流行病学研究

目的 明确与中国人原发无精和严重少精症密切相关的Y染色体无精症因子(azoospermia factor，AZF)区域微缺失位点及其缺失特点，为开展中国人AZF微缺失基因诊断提供理论依据。方法 采用多重聚合酶链反应技术，针对实验组134例原发无精、118例原发严重少精症患者与对照组210名已正常生育男性，进行AZFa、AZFb、AZFe三个区域共15个序列标签位点(sequence tag site，STS)的微缺失分析。结果 对照组在所有15个STS位点中均未发现缺失，实验组STS位点缺失涉及到13个STS位点，分别是：AZFa区的sY84、sY86，AZFb区的sYl21、sYl23、sYl24、sYl27、sYl34、sYl33，AZFc区的sYl52、sY242、sY254、sY255、sYl57。在5例无精患者中发现AZFa区STS位点缺失，缺失率为2．0％，在7例无精与3例少精患者中发现AZFb区STS位点缺失，缺失率为4．0％，在14例无精与18例少精患者中发现AZFc区STS位点缺失，缺失率为12．7％。统计学分析提示实验组与对照组13个STS位点缺失率差异有极显著性。结论所确定的AZF区域13个STS位点缺失与中国人原发无精和严重少精密切相关，未发现上述STS位点缺失的群体多态现象；中国人原发无精和严重少精症AZF区域微缺失的频率、分布、缺失热区与白人基本一致；所选择的13个STS位点可作为中国人原发无精与严重少精症AZF区域微缺失基因诊断筛查的候选位点。     

精索内动静脉高位结扎iNOS的表达与睾丸生精细胞增殖和凋亡的关系

目的：探讨精索内动静脉高位结扎术后，诱导型一氧化氮合酶（inducible nitric oxide synthase．iNOS）的表达与生精细胞增殖和凋亡的关系。方法：免疫组化结合计算机图像分析系统检测iNOS阳性细胞光密度值；免疫组化方法检测并计算PCNA增殖指数（PCNA-Labeling index，PI）；原位末端标记法（terminal deoxynucleotidyl transferase mediated dUTP nick-endlabeling method，TUNEL）检测生精细胞凋亡指数（apoptosis index，AI）。分析iNOS的表达与增殖、凋亡的相关性。结果：iNOS在术后3-15d表达增强，第7d呈强阳性表达。结扎组生精细胞PCNA增殖指数（PI）明显低于对照组（P〈0．01），凋亡细胞指数（AI）明显高于对照组（P〈0．01）。结论：精索内动静脉高位结扎，iNOS的表达与生精细胞PCNA增殖指数呈负相关，与生精细胞凋亡指数呈正相关。iNOS基因表达增强是生精细胞增殖减少和凋亡增加的重要原因。     

体外受精-胚胎移植患者妊娠率与年龄及多精受精关系的研究

目的探讨体外受精-胚胎移植（IVF-ET）患者的妊娠率与年龄及多精受精的关系。方法收集1234个IVF-ET治疗周期,回顾分析不同年龄组的妊娠率及其与多精受精的关系。结果随着年龄的增长,患者IVF-ET周期的妊娠率和多精受精率均降低,并且同年龄组多精受精发生周期的妊娠率高于非多精受精组。结论女性的年龄与IVF-ET周期的妊娠率和多精受精的发生呈负相关,年龄与多精受精率都可作为预测IVF-ET结果的临床指标。     

染色体异常伴原发性无精症一例

患者男,28岁,婚后1年不育来院就诊。女方月经正常。夫妇双方性生活正常。查体:患者身高165cm,男性第二性征胡须浓密,喉结不明显,生殖器官检查外生殖器正常。内分泌检查结果正常。精液常规检查无精子。细胞遗传学检查:外周血培养,G显带,染色体结果:妻子核型为46,XX;患者核型为46,X,t(1;Y)(1qter→1p22∷Yq11→Yqter;Ypter→Yq11∷1p22→1pter)。讨论患者为Y染色体与1号染色体平衡易位,最大的染色体与最小的染色体发生断裂重接较为罕见。患者体格健壮,激素水平正常,但无精子产生,说明Y染色体断裂、易位的部位可能存在着与精子生成有关的…     

补体溶菌试验在霍乱杀弧菌抗体检测中的应用

目的了解不同人群的霍乱杀弧菌抗体水平和对霍乱的免疫状态,并探讨补体溶菌试验检测技术的应用价值。方法采用补体溶菌试验方法检测不同人群杀弧菌抗体水平,并运用统计学方法,对补体溶菌试验与常规分离培养法的检测结果进行分析。结果确诊病人的抗体水平显著高于当地健康人群（P〈0.001）;补体溶菌试验方法与常规分离培养法检测结果差异无统计学意义（P〉0.05）。结论补体溶菌试验法在基层霍乱检测工作中具有一定的应用价值,为霍乱的免疫学和流行病学研究提供了依据。     

噬菌体展示TM-TNF-α模拟肽体内杀瘤效应的研究

目的　研究噬菌体展示TM -TNF- α模拟肽的体内杀瘤效应及机制。方法　大量制备所需的噬菌体展示肽,比较不同展示肽对小鼠的肝癌细胞H2 2的体外杀瘤效应,挑取杀瘤效应最好的展示肽并选择其合适的滴度进行体内实验。小鼠接种H2 2细胞3d后,于肿瘤接种部位皮下注射噬菌体展示肽,观察肿瘤的生长情况。结果　噬菌体展示TM- TNF -α模拟肽在体内能明显抑制肿瘤的生长(P <0 .0 1)。且抑瘤率与展示肽之间呈剂量依赖关系。HE染色发现展示肽治疗组肿瘤组织中有大量淋巴细胞浸润,而sTNF- α治疗组除淋巴细胞浸润还可见中性粒细胞、浆细胞浸润。结论　直接注射噬菌体展示TM -TNF -α模拟肽可在体内有效杀瘤,其杀瘤机制可能不同于分泌型TNF -α。     

长春地区816例遗传咨询患者染色体核型与生育异常分析

目的探讨染色体核型异常与生育异常的关系。方法对2004年5月至2007年4月到吉林大学特殊疾病检测站进行遗传咨询的816例患者进行外周血淋巴细胞培养,进行染色体核型分析。结果受检的生育异常患者为816例,核型异常99例,异常率为12.13%。其中常染色体异常22例,占22.22%,性染色体异常46例,占46.46%,嵌合体异常31例占31.31%。结论染色体异常是生殖异常的重要原因之一,对生育异常患者进行染色体检查可为临床诊断和优生优育提供依据。