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101.
目的:采用消散因子石英晶体微天平(QCM-D)原位、实时和动态监测木瓜蛋白酶水解β-酪蛋白生物膜的动力学过程,比较不同浓度酶的水解效率。方法:用β-酪蛋白在QCM-D上建立体外蛋白膜模型,采用不同浓度的木瓜蛋白酶水解膜,观察频率和厚度的改变,运用Boltzmann方程对实验数据进行拟合,单因素方差分析和SNK-q检验比较水解参数B、Δh、V50和C。结果:随着酶浓度增大,膜的厚度Δh减薄,ΔF上升增多,水解参数B增大,C减小,V50缩短(P〈0.05)。结论:在一定浓度范围内水解蛋白生物膜时,酶的水解效率随浓度增大而提高。 相似文献
102.
103.
目的:观察木瓜蛋白酶所致的肺气肿大鼠肺泡壁细胞凋亡,探讨细胞凋亡在肺气肿发病中的作用。方法:大鼠随机分为3组:正常对照组、木瓜蛋白酶组、木瓜蛋白酶联合[60Co]处理组。观察肺组织病理学变化,TUNEL法检测大鼠肺泡壁凋亡细胞,免疫组化法检测肺泡壁细胞PCNA、Bax和SP-C蛋白的表达。TUNEL与SP-C免疫荧光法鉴定凋亡细胞中的II型肺泡上皮细胞。结果: 木瓜蛋白酶组、木瓜蛋白酶联合[60Co]处理组大鼠出现明显肺气肿。木瓜蛋白酶联合[60Co]处理组平均内衬间隔,平均肺泡面积和单位面积肺泡数与木瓜蛋白酶组比较有显著差异。木瓜蛋白酶组,木瓜蛋白酶联合[60Co]处理组大鼠肺泡壁细胞的AI、PI以及Bax染色阳性的细胞百分比显著高于正常对照组;而SP-C染色阳性的细胞百分比显著低于正常对照组。木瓜蛋白酶联合[60Co]处理组大鼠的AI、PI、Bax染色阳性的细胞百分比显著高于木瓜蛋白酶组;而SP-C染色阳性的细胞百分比显著低于木瓜蛋白酶组。部分TUNEL阳性细胞表达II型肺泡上皮细胞标志SP-C。结论:大鼠肺泡壁细胞特别是II型肺泡上皮细胞凋亡参与肺气肿的形成,Bax蛋白的表达上调可能导致肺气肿大鼠肺泡壁细胞的凋亡。 相似文献
104.
可溶性固定化木瓜蛋白酶的制备及性质研究 总被引:8,自引:0,他引:8
目的 制备一种可溶性固定化木瓜蛋白酶(PP)并研究其部分酶学性质.方法 将PP偶联在羧甲基纤维素醋酸琥珀酸酯(AS-L)上,制备得到水溶性固定化PP,并测定游离和水溶性固定化PP最适作用pH、最适作用温度、Km值、热稳定性、酸碱稳定性、低温稳定性和回收稳定性.结果 最适作用pH分别为6.0、5.0,最适作用温度分别为60℃、70℃,Km值分别为2.53、3.07 mg·ml-1;可溶性固定化PP在60℃条件下,保温12 h,仍有62%的活性;在4℃条件下,30 d后活性保留达90%以上;在pH6时稳定性最好,pH4~7范围内也较稳定(相对活性>80%).结论 可溶性固定化PP能够在大于pH5.5的溶液中完全溶解,最适作用pH范围变窄,最适作用温度和Km值升高;热和酸碱的稳定性均明显增强. 相似文献
105.
汞和金属离子及多硫化物对木瓜蛋白酶活性的抑制作用 总被引:2,自引:0,他引:2
目的半胱氨酸蛋白酶参与了很多动植物生理过程和病理过程,是Hg2+及其化合物作用的潜在靶点。木瓜蛋白酶是半胱氨酸蛋白酶家族中最具代表性、研究最为广泛深入的一种蛋白酶,本文以木瓜蛋白酶为模型, 研究了汞等金属离子及其化合物对半胱氨酸蛋白酶活性的抑制作用。结果 Hg2+对木瓜蛋白酶活性的抑制能力很强(Ki=2×10^-7 mol·L^-1)。过量的还原型谷胱甘肽和半胱氨酸能够恢复木瓜蛋白酶的活性。多种金属离子(Cu^2+、Ag^+、Au^3+、Zn^2+、Cd^2+、Fe^3+、Mn^2+、Pb^2+、Yb^3+)对木瓜蛋白酶的活性具有抑制能力,而且抑制能力与金属离子自身的软硬度具有良好的相关性。研究结果表明 Hg2+ 可能作用于木瓜蛋白酶的活性中心。此外,本文首次研究了汞多硫化物复合物对木瓜蛋白酶活性的抑制作用,发现其表观抑制常数(Ki= 7×10^-6 mol·L^-1)与柳硫汞(Ki=2.7×10^-6mol·L^-1)十分接近,而且其caco-2细胞单层的表观渗透能力(1.9×10^-5cm/s) 也较好。结论汞多硫化物复合物可能通过与半胱氨酸蛋白酶或者其它含巯基蛋白分子作用,发挥生物学活性。本文的研究工作可能有助于阐明汞化合物( 特别是朱砂等不溶性汞化合物) 的毒理及药理作用的机制。 相似文献
106.
目的:探讨采用木瓜蛋白酶在兔颞颌关节上腔注射,建立兔颞颌关节骨关节炎动物模型的可行性。方法:对 6只日本大耳白兔行颞颌关节上腔注射,实验侧注射013 ml 116%木瓜蛋白酶溶液,对照侧注射013 ml生理盐水,1 周后重复1次,首次注射后第2、4、6周分批处死实验动物,切取颞颌关节做大体及组织病理学观察。结果:实验侧关节注射木瓜蛋白酶后出现关节软骨变薄、基质分解破坏、滑膜增生等炎症及退行性改变,并随观察时间的延长而进一步发展,但在首次注射后第6周时出现不同程度的修复性改变。结论:兔颞颌关节注射木瓜蛋白酶后的改变与人颞颌关节骨关节炎病理改变具有相似性,可重复,可作为研究颞颌关节骨关节炎病理、发病机理及治疗方法的实验工具。 相似文献
107.
108.
109.
110.
目的研究利用木瓜蛋白酶水解技术以提高豆浆营养素消化吸收率。方法豆浆煮沸后冷却至40℃加入木瓜蛋白酶0.5g/1000ml,保温40-60℃,pH4~10,4小时后煮沸约10分钟即成酶水解豆浆。结果小白鼠吸收试验证实,酶解后豆浆蛋白质及钙的消化吸收率比普通豆浆分别增加25%和30%,锌、铁、磷各增加了10%。有显著性差异(P〈0.05)。结论推广使用酶解豆浆代替普通豆浆,可以进一步提高大豆中蛋白质及矿物质的利用率。 相似文献