酶解法制备可口革囊星虫抗菌物质的研究

目的 确定可口革囊星虫体壁中抗菌物质的最佳酶解工艺。方法 以可口革囊星虫体壁为原料,利用筛选出的木瓜蛋白酶酶解可口革囊星虫体壁蛋白,获得含可口革囊星虫体壁的酶解产物,并用抑菌圈法比较不同条件下酶解产物对大肠埃希菌活性的影响。在单因素试验的基础上,应用四因素三水平正交设计分析法,探讨酶解温度、pH值、酶解时间、加酶量及底物浓度对酶解产物抑菌活性的影响。结论 木瓜蛋白酶最适合水解可口革囊星虫体壁制备抗菌物质,其最佳工艺条件为：底物浓度为4g/L、加酶量为4000U/g、温度为55℃、pH值为8.0的条件下酶解4h,获得平均抑菌圈大小为(15.78±0.5)mm。     

光裸方格星虫纤溶酶对FeCl3诱导大鼠颈动脉血栓的抗栓作用研究

目的 研究光裸方格星虫纤溶酶（fibrinolytic enzyme from Sipunculus nudus,SNFE）对FeCl₃诱导大鼠颈动脉血栓的抗栓作用。方法 SD大鼠随机分为假手术组、模型组、阿司匹林组（100 mg·kg^-1）和SNFE高、低剂量组（5 000,2 500 IU·kg^-1）,连续灌胃给药14 d后,以30% FeCl₃诱导颈动脉血栓。成栓1 h后腹主动脉取血,测定凝血4项、组织纤溶酶原激活物（tissue-type plasminogen activator,t-PA）及I型纤溶酶原激活物抑制因子（plasminogen activator inhibitor-I,PAI-I）;称量各组血栓的湿重和干重,计算血栓形成抑制率,截取血栓环,进行HE染色。结果 与假手术组比较,模型组凝血酶原时间（prothrombin time,PT）、凝血酶时间（thrombin time,TT）明显缩短,纤维蛋白原（fibrinogen,FIB）含量明显增加（P<0.05或P<0.01）;与模型组相比,SNFE高剂量组PT、活化部分凝血酶时间显著延长,FIB含量减少（P<0.05或P<0.01）,低剂量组各项指标有改善趋势。与假手术组比较,模型组t-PA和t-PA/PAI-I明显减少（P<0.01）,PAI-I无明显差异;与模型组比较,SNFE高、低剂量组的t-PA及高剂量组的t-PA/PAI-I显著增加（P<0.05或P<0.01）,PAI-I无明显差异。与模型组比较,SNFE各剂量组的血栓干重和湿重均降低,SNFE高剂量组的干、湿重分别抑制56.86%和41.67%,低剂量组的干、湿重分别抑制21.57%和11.90%。模型组血管腔内有致密血栓,SNFE低剂量组血栓较模型组少,阿司匹林组及高剂量组无明显血栓块。结论 方格星虫纤溶酶可通过影响凝血系统和纤溶系统抑制FeCl₃诱导的大鼠颈总动脉血栓的形成。     

复方星虫口服液对小鼠免疫功能的影响

经对小鼠免疫功能实验表明，复方星虫口服液能使小鼠免疫器官曾重，并提高胸腺指数与脾指数，尤以胸腺指数的提高更为显著，复方星虫口服液还能显著提高小鼠血清溶血素水平，增强ＳＲＢＣ诱发的迟发超敏反应，结果提示；复方星虫口服液对小鼠的体液免疫与细胞免疫功能均有较强的促进作用。     

方格星虫多糖对记忆障碍模型小鼠学习记忆能力的影响

目的观察方格星虫多糖(SNPS)对东莨菪碱所致小鼠学习记忆障碍的影响。方法 SNPS 3个剂量组100,200和400mg.kg-1每天小鼠灌胃给药1次,连续7天。采用东莨菪碱建立记忆获得障碍模型,再用Morris水迷宫法检测小鼠的学习记忆能力。测试结束后,分别检测血清中SOD活性和MDA含量。结果与模型组比较,SNPS能显著缩短逃避潜伏期和找到平台的时间,显著增加穿越原平台次数;SNPS能显著提高血清SOD活力,降低血清MDA含量。结论 SNPS能改善记忆获得障碍模型鼠的学习记忆能力,提高机体清除自由基、抗氧化能力。     

方格星虫多糖不同提取工艺的比较研究

目的 比较方格星虫多糖的酶法提取、碱法提取以及酶法碱法联合提取这3种方法的优劣.方法 采用硫酸蒽酮法测定多糖含量,以重量法确定多糖得率.结果 酶法提取得率为0.60%,碱法提取得率为1.47%,两种方法联用提取得率为0.20%;3种工艺所得提取物中多糖含量分别为21.83%,87.30%,36.40%.结论 碱法提取工艺得率最高,优于其它两种方法,碱法提取适合于工业生产,是一条高效可行的提取路线.     

海洋星虫胶囊的毒性研究

目的　对海洋生物提取物海洋星虫胶囊进行安全毒性评价。方法　通过急性毒性试验、30d喂养试验以及致突变试验对海洋星虫胶囊进行毒性评价。结果　 (1 )急性毒性试验显示海洋星虫胶囊的LD50 大于 1 0 .0g·kg-1 ;(2 )Ames试验、骨髓微核试验、精子畸形试验均为阴性结果 ;(3) 30d给药结果显示海洋星虫胶囊未见毒性反应 ,未见体内蓄积中毒。结论　海洋星虫胶囊在所试条件下 ,未发现致突变作用 ,未发现遗传毒性 ,无明显体内蓄积中毒     

方格星虫多糖抗菌活性的初步研究

目的研究方格星虫多糖的抗菌活性。方法以方格星虫体壁作为试验材料，经沸水抽提、乙醇沉淀和sevage法去蛋白后得到粗多糖，再经G-50葡聚糖凝胶柱层析纯化。采用硫酸-苯酚法测定多糖的含量，以含不同浓度的方格星虫多糖（50，37．5，25，12。5mg／ml）培养基，分别接种金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌和枯草杆菌培养12、24、36、48h，观察并记录其生长情况。结果不同方格星虫多糖浓度（25—50rag／ml）对三种试验菌的生长均有抑制作用，浓度越高抗菌活性越强。结论方格星虫多糖对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌埃希菌、枯草杆菌有明显的抗菌活性。     

海洋星虫提取物的抗疲劳作用研究

目的　研究海洋星虫提取物的抗疲劳作用。方法　采用盐抽提、分级沉淀、超滤、冷冻干燥等方法从海洋星虫中制备得到海洋星虫提取物。采用小鼠游泳试验测定了海洋星虫提取物对小鼠负重游泳时间 ,运动后小鼠血乳酸消除及血清尿素氮含量的影响。结果　经口给予小鼠不同剂量 0 .0 4 ,0 .0 9,0 .2 6 g/ (kg.d)的海洋星虫提取物 30 d后 ,对照组负重游泳时间为 (4 4 3± 132 ) s,低、中、高剂量组负重游泳时间分别为 (5 31± 178) ,(5 98± 16 1) ,(6 93± 135 ) s,小鼠负重游泳时间随着给药剂量的增加逐渐延长 ;运动后 30 min,对照组血乳酸水平为 (8.0 8± 0 .4 7) m mol/ L ,低、中、高剂量组血乳酸水平分别为(7.71± 0 .4 7) ,(6 .35± 0 .5 8) ,(5 .38± 0 .70 ) m mol/ L ,提示海洋星虫提取物能够显著加快血乳酸消除 ;运动后 30 min,对照组血清尿素氮含量为 (8.4 7± 0 .82 ) mm ol/ L ,低、中、高剂量组血清尿素氮含量分别为 (7.5 2± 1.2 5 ) ,(7.11± 0 .6 4 ) ,(6 .5 5± 0 .6 2 ) mm ol/ L ,提示海洋星虫提取物能够显著降低血清尿素氮水平。结论　海洋星虫提取物具有明显的抗疲劳作用。     

光裸方格星虫纤溶酶对急性血瘀模型大鼠血液流变性异常及血管内皮损伤的改善作用研究

目的:研究光裸方格星虫纤溶酶(SNFE)对急性血瘀模型大鼠血液流变性异常及血管内皮损伤的改善作用。方法:将SD大鼠随机分为对照组、模型组、阿司匹林组(100 mg/kg)和SNFE低、高剂量组(2 500、5 000 U/kg),每组10只,每天灌胃1次,连续给药7 d,第6天给药后1 h,除对照组外,其余各组大鼠均皮下注射盐酸肾上腺素0.8 mg/kg,再以冰水浴复制急性血瘀模型。次日给药后2 h腹主动脉采血,使用全自动血流变仪测定全血黏度(高、中、低切变率)、血浆黏度、红细胞比容、红细胞聚集指数、红细胞变形指数等血液流变学指标,酶联免疫吸附法测定血浆中一氧化氮(NO)、内皮素1(ET-1)含量及其比值,苏木精-伊红(HE)染色观察主动脉血管内皮的损伤程度。结果:与对照组比较,模型组大鼠的高、中、低切变率的全血黏度以及血浆黏度、红细胞聚集指数、ET-1含量均显著升高,红细胞变形指数、NO含量和NO/ET-1比值均显著降低,差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。与模型组比较,SNFE高剂量组大鼠的高、中、低切变率的全血黏度以及血浆黏度、红细胞比容、红细胞聚集指数、ET-1含量均显著降低,红细胞变形指数、NO含量和NO/ET-1比值均显著增加,差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01);SNFE低剂量组大鼠仅红细胞变形指数和NO/ET-1比值均显著增加,ET-1含量显著降低,差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。血管内皮染色图显示,与对照组比较,模型组大鼠主动脉各层结构松散无序,内膜缺损不完整,空泡增加,内皮损伤明显;各给药组大鼠内皮也均有不同程度损伤,但损伤程度均较模型组轻。结论:SNFE对急性血瘀模型大鼠的血液流变性异常和血管内皮损伤均有改善作用。