碱性成纤维细胞生长因子在富集结直肠癌肿瘤干细胞中的作用

目的 研究不同浓度碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）作用于结直肠癌细胞不同时间,富集肿 瘤干细胞的效果。方法? 结直肠癌DLD-1细胞分别在含5 ng/mL、10 ng/mL、20 ng/mL bFGF的无血清培 养基中悬浮培养,分为G1、G2、G3组,设置培养时间梯度为10 d、20 d、30 d,获得球细胞。采用流式 细胞术（FCM）检测细胞球中的CD44+、CD133+及CD44+CD133+双阳性的细胞表达比例,Real-time PCR 检测球细胞中的干细胞基因（KLF4、Nanog）;上皮间质转化基因（E-cadherin、Snail）;Wnt/β-catenine通路 基因（Wnt-3a）的 mRNA表达情况,成球实验检测细胞球的自我更新能力。结果 FCM检测结果：CD44+ 阳性表达的细胞表达以G2组20 d最高,CD133+及CD44+CD133+双阳性的细胞表达均以G2组20 d及G3 组10 d最高,差异有统计学意义（F=98.895、147.641、13.321,P<0.05）。 Real-time PCR检测结果：各组中 KLF4、Nanog、Snail以及Wnt-3a mRNA的表达均以G2组20 d表达最高（F=2.424、7.694、2.951、3.771, 均P<0.05）, E-cadherin基因G2组20 d mRNA表达最低（G2组30 d、G1组10 d除外）（F=10.620,P<0.05）。 成球实验结果：各组比较G1组20 d和G2组20 d成球数量明显多于其他组,差异具有统计学意义（F=14.279, P<0.01）;但 G1组20 d和G2组20 d比较,无统计学差异（t=0.605,P=0.578）。 结论 碱性成纤维细胞生长 因子无血清悬浮培养能够有效富集肿瘤干细胞,其中G2组培养20 d较其余组能更有效地富集结直肠癌肿 瘤干细胞。     

问题解决教学法在外科学教学中的应用初探

在中等卫生职业学校外科学教学中利用问题解决教学法培养学生的创造性思维能力,提高了教师的创新教学能力,实现了教学中的互动效应.     

Effects of advanced glycation end products on renal fibrosis and oxidative stress in cultured NRK-49F cells

Background Advanced glycation end products （AGEs） play a critical role in the development of diabetic nephropathy. Reactive oxygen species （ROS） may play a critical role in AGEs induced growth factor expression. In this study, the effects of AGEs on transforming growth factor β1 （TGF-β1）, connective tissue growth factor （CTGF） and fibronectin （Fn） mRNA expression and oxidative stress in cultured NRK-49F cells were examined. Methods NRK-49F cells were incubated with medium containing different doses of AGEs （50, 100 or 200 μg/ml） for 24 hours, or with AGEs 100 μg/ml for different times （0, 12, 24 or 48 hours）. Cells in the serum-free medium or medium containing 25 mmol/L glucose were controls. Cells were treated with 25 mmol/L glucose and 100 μg/ml AGEs for 24 hours to determine the effects between AGEs and glucose. We clarified the role of antioxidant by pretreating cells with N-acetylcysteine （10 mmol/L）, ginkgo biloba extract （50 or 100 mg/L） for 24 hours and with 100 μg/ml AGEs for further 24 hours. Alamarblue dye assay was used to analyze cell growth; intracellular ROS generation was measured by flow cytometry; intracellular glutathione by fluorescence spectrophotometry; expressions of TGF-β1, CTGF and Fn mRNA by semiquantitative RT-PCR. Results AGEs significantly increased the expressions of TGF-β1, CTGF, Fn mRNA and intracellular ROS generation, and decreased the glutathion level in NRK-49F cells in dose- and time-dependent manners. High glucose and AGEs together significantly increased the expression of TGF-β1, CTGF and Fn mRNA, compared with AGEs and high glucose separately. Preincubation with N-acetylcysteine or ginkgo biloba extract increased GSH level, suppressed AGEs-induced oxidative stress and TGF-β1, CTGF and Fn mRNA overexpression. Conclusions AGEs can significantly increase expression of TGF-β1, CTGF, Fn mRNA in NRK-49F cells through enhancement of oxidative stress. The accumulation of AGEs may play a pivotal role in the pathogenesis of tubulointerstitial fibrosis in diabetic nephropathy. Suppression of AGEs induced TGF-β1, CTGF and Fn mRNA overexpression in renal fibroblasts through inhibition of oxidative stress may be a mechanism underlying effect of ginkgo biloba extract in diabetic nephropathy. In addition, antioxidant therapy may help prevent AGEs accumulation and its induced damage.     

培养医学研究生的跨学科创新思维

分析培养医学研究生跨学科创新思维的必要性,提出培养医学研究生跨学科创新思维的具体方案,包括构建跨学科课程体系、交流平台及综合性实验项目,加强导师跨学科创新知识建设,双导师或多导师制,开展跨学科课题等。     

微生物教学中学生创新能力的培养

微生物学在中专医学课程中占很重要的位置 ,做为医学业教师 ,必须将本知识的学与实际运用很好的结合起来 ,必须重视创新性的渗透教育 ,重视发现与激发学生的创新灵感 ,尤其在微生物深究研究性课题的实施过程中 ,尽可能为学生提供探索实验的条件 ,不断培养他们的创新能力。1　创     

古为今用全面提高--文言文教学之浅见

在中专语文教学中,如果把文言文和现代文的教学作比较,绝大多数学生都说更喜欢学习现代文。难道是那些传诵千古的文章魅力不及现代作品吗?其实,并非如此。古今语言的差异固然会造成学生阅读方面的障碍,然而教师怎样指导学生去阅读,把握其精髓,对培养学生文言文的兴趣和能力更起着决定性的作用。大纲规定:文言文的教学目的,在于培养学生“能够阅读浅易文言文的能力”。那么怎样去培养提高这个“阅读能力”呢?对文言文兴趣不高的学生普遍认为文言文纯粹是字句的翻译,这就和教师的文言文教法有关。如果教学中着力于:释字词,断句读,搞翻译,“通…     

本科生开放性实验体会

在本科生实验教学中,推行开放性设计实验,即在教师的指导下,学生进行资料收集和实验设计,并独立完成整个实验课题的过程。在这种新型的实验教学模式下,学生的独立思考能力得到提高,实验综合能力得到锻炼,团队合作意识得到加强,对本科生的科研素质培养有很重要的意义。     

社区卫生服务中心加强中层干部队伍建设的做法和体会

社区卫生服务中心的中层干部是介于中心党政领导班子与职工之间的管理人员,可以说是社区卫生服务中心管理中的"中枢系统".他们既是管理者,又是执行者,是社区卫生服务中心一切工作的中坚力量,更是中心领导与职工有效沟通的"桥梁".     

医学专业学位硕士研究生培养中存在的问题与对策

本文以分析医学研究生培养现状为起点,剖析了现代医学专业学位硕士研究生培养中存在的问题,指出医学专业学位硕士研究生培养中存在的环境不利、临床实践时间不能保障、多种培养方式参差不齐、与住院医师培训相矛盾、缺乏质量监控体系等问题,并提出了相应的对策。