人外周血CD68^＋单核细胞体外的分选及诱导分化为破骨细胞

OBJECTIVE: To establish a method for obtaining highly purified primary human osteoclast precursors for the biochemical and molecular biological research. METHODS: CD68(+) mono/macrophages were separated from peripheral blood mononuclear cells (PBMCs) of healthy donors by means of immunomagnetic cell sorting for subsequent analysis with flow cytometry. The isolated cells were incubated on coverslips or bone slices in the presence of dexamethasone(10(-8) mol/L), macrophage colony-stimulating factor (25 microg/L ) and soluble receptor activator of nuclear factor (NF)-kappaB ligand (s-RANKL, 16 microg/L). Calcitonin receptor (CR) immunocytochemistry and tartrate-resistant acid phosphatase (TRAP) histochemistry were employed. The bone slices were also studied by scanning electron microscopy (SEM). RESULTS: Fluorescence-activated cytometric analysis showed that 93.06%+/-0.61% n=4 of the selected cells were CD68(+) cells. After 7 days of culture of the CD68(+) cells, VR+, TRAP+ multinucleated giant cells appeared, and resorption lacunae could be observed by SEM. CONCLUSION: Highly purified CD68(+) cells can be obtained from human PBMCs as the osteoclast precursors, and mature osteoclasts can be induced from CD68(+) mono/macrophages by RANKL.     

同基因外周血造血干细胞移植治疗慢性再生障碍性贫血一例

患者,男,18岁,因乏力2年,加重2个月于2003年11 月1日收住我院。2年前无明显诱因出现乏力,间断发热及齿龈出血,血常规检查示全血细胞减少,多部位骨髓穿刺细胞学检查及骨髓活检确诊为慢性再生障碍性贫血(CAA),服用康力龙安雄、环孢菌素A及中草药等治疗,病情无好转, WBC(1．5-2．3)×10~9／L．Hb 50～60 g／L,BPC(7～30)× 10~9／L。治疗期间曾输注血小板10U(未用滤器和照射)。近 2个月乏力明显加重。入院时查血常规:Hb 60 g／L,RBC     

胃癌根治术病人围术期异体输血后外周血单核细胞CD40L表达的变化

目的 研究胃癌根治术病人围手术期异体输血外周血单核细胞(PBMCs)白细胞分化抗原40配体(CD40L)表达的变化。方法 胃癌根治术病人30例,随机分为3组,每组10例。A组围术期不输血,B组围术期输入去白细胞的全血,C组围术期输入异体全血。另选10例健康人作为对照。分别在手术前、术后2、5、10 d采外周静脉血5 ml,用Ficoll分离液梯度离心法分离出PBMCs和血浆,将PBMCs置于自身血浆环境中,并在植物血凝素(PHA,20 mg/L)的刺激下进行培养,48 h后收获细胞,用流式细胞术检测CD40L表达。结果 健康人外周血未受PHA刺激时检测不到CD40L的表达,经PHA刺激后CD40L 细胞占CD4 T细胞的百分数为1.7％±0.4％,与三组胃癌病人术前比较差异无显著性(P>0.05)。与术前比较,B组术后2 d PBMCs CD40L表达升高(P<0.05),C组术后各时点升高(P<0.05);与A组比较,B组术后2 d升高(P<0.05),C组术后各时点升高(P<0.05);与B组比较,C组术后各时点升高(P<0.05)。结论 围手术期异体输血可造成免疫抑制,输异体血后CD40L表达增加,且输全血比输去白细胞的全血更明显。围手术期成分输血优于输注全血。     

血红素氧合酶-1在冠心病患者中的表达

【目的】观察血红素氧合酶-1(HO-1)在冠心病患中的表达。【方法】将冠心病患分为急性心肌梗死组(AMI组)，非心肌梗死组(梗死前组)及陈旧性心肌梗死组(梗死后组)。利用免疫组化方法对冠心病患外周血单个核细胞中HO-1的表达进行定位分析，并通过计算机图像分析系统分析HO-1表达的程度及强度。通过Western blot对HO-1表达水平进行定量分析。比较各组冠心病患HO-1的表达情况。【结果】HO-1表达于胞浆。冠心病患HO-1表达明显高于正常人(P(0．01)，AMI组HO-1表达明显高于其他组冠心病患(P(0．01)，梗死后组HO-1表达也高于梗死前组(P(0．05)。【结论】冠心病患HO-1表达水平升高，其表达水平与冠心病严重程度有关。     

中药补肾方在体外对乙肝患者外周血淋巴细胞亚群及TNF-α的调节作用

目的　观察中药补肾方在体外对慢乙肝患者外周血淋巴细胞亚群的影响及其对TNF -α的诱导作用。方法　选择 32例慢乙肝患者 ,静脉取肝素抗凝血 ,分离出单个核细胞 ,用RPMI- 16 4 0培养液培养后 ,加入中药补肾方 ,分别检测淋巴细胞亚群和TNF -α。结果　补肾方能促进CD4 + 细胞的增殖 (P <0 .0 1) ,从而提高CD4 + /CD8+ 比值 (P <0 .0 5 ) ,对TNF -α的产生有促进作用 (P <0 .0 1)。结论　补肾方在一定程度上能直接促进CD4 +细胞增殖 ,提高CD4 + /CD8+ 比值 ,诱导TNF -α的产生 ,从而调整乙肝患者细胞免疫功能 ,维持乙肝患者免疫平稳 ,提高患者的免疫功能和抗病毒的能力。     

急性脑血管病外周血淋巴细胞、T细胞亚群变化的研究

目的 探讨急性脑血管病患者外周血淋巴细胞、T细胞亚群的变化机制及临床意义。方法 应用HCP5200全自动血球分析仪及FACScalibur流式细胞仪对70例急性脑血管患者及38例健康体检者外周血淋巴细胞、T细胞亚群进行检测。结果 急性脑血管患者外周血淋巴细胞绝对值、百分比均比对照组降低，有应激反应者淋巴细胞百分比降低更明显。并非所有急性脑血管病患者均有T细胞免疫功能失衡，只有在应激状态下，CD4^ 和CD4^ ／CD8^ 降低，CD8^ 升高。结论 急性脑血管病患者发病后机体存在细胞免疫功能紊乱，其严重程度与应激反应有关。     

成体干细胞移植与肾脏疾病

近年来，随着再生医学的兴起，干细胞移植成为医学领域的研究热点之一。骨髓细胞与肾脏祖细胞的共同起源，提示它们可能具有相似的分化能力：研究发现，骨髓细胞及其外周血干细胞可以分化成各型肾脏细胞，包括系膜细胞、内皮细胞、上皮细胞等。因此，干细胞移植为对各种肾脏疾病的预防及治疗提供了新的思路、本文就骨髓移植及外周血干细胞移植在肾脏疾病中的预防及治疗性研究作一综述。     

细菌性脑膜炎患儿血清C反应蛋白水平及临床意义

目的 检测急性细菌性脑膜炎患儿外周血C反应蛋白(CRP)水平,并探讨其在疾病发展过程中的价值.方法 采集32例急性细菌性脑膜炎患儿、10例病毒性脑膜炎患儿及12例健康儿童外周血标本,检测血清CRP浓度.对细菌性脑膜炎患者采用了抗生素治疗,待病情控制后再次检测CRP水平,观察CRP对病情的预测价值.结果 急性细菌性脑膜炎患儿血清CRP水平明显高于病毒性脑膜炎患儿和健康儿童 (P＜0.001).细菌性脑膜炎患者接受抗生素治疗后,CRP水平显著下降(P＜0.001),接近健康对照者.结论 急性细菌性脑膜炎患儿血清CRP明显升高,提示脑脊膜急性细菌感染引起急性炎症反应,可以用来判断疾病的发展、预后.