心血管疾病基因治疗进展

载体是基因治疗的一个限速因素。本文主要介绍了近两年来基因运载体系，基因转移方式，新的基因治疗策略的进展以及它们在心血管中的应用。     

电离辐射对Lewis肺癌细胞的腺病毒转染率的影响

随着基因治疗研究的不断深入,尤其是伴随着基因治疗临床试治肿瘤、感染性疾病、遗传性疾病等的广泛开展,人们愈来愈认识到选择恰当的载体,使目的基因靶向、可控并有效地表达,是基因治疗成功的关键.     

酵母菌胞嘧啶脱氨酶/5-氟胞嘧啶自杀基因系统对人原代T细胞的作用

目的:酵母菌胞嘧啶脱氨酶基因(YCD)是新型自杀基因,利用重组逆转录病毒载体(RV),将YCD高效导入人原代T细胞,并在体内外探讨转基因T细胞的功能及"自杀"效应。方法:构建RV载体MSCV-YCD-puroR,瞬时质粒共转染法制备RV,流动感染法或Retronectin 离心法感染人原代T细胞,嘌呤霉素筛选获得T-YCD-puroR,检测转基因T细胞对肿瘤细胞的杀伤及细胞因子分泌功能,在体外和SCID小鼠体内,探讨前体药物5氟胞嘧啶(5-FC)对T-YCD-puroR细胞的杀伤效应等。结果:病毒滴度为(5.0±3.7)×106TU/mL。流动转染法对人原代T细胞的基因导入率46.0%±9.6%,2轮离心 Retronectin法的基因导入率为60.3%±7.6%(n=3)。经嘌呤霉素筛选48h获得T-YCD-puroR细胞,其基因阳性率96.7%±1.5%,并可大量扩增。与野生T细胞比较,T-YCD-puroR细胞杀伤K562肿瘤细胞的能力及细胞因子分泌功能无统计学意义。体外实验显示,与野生T细胞比较,T-YCD-puroR细胞对puromycin的IC50上升了304.9倍(0.071mg/Lvs22.3mg/L),对5-FC的IC50下降了133.3倍(656.0μmoL/Lvs4.9μmoL/L)。T-YCD-puroR细胞静脉接种于SCID小鼠,7d后每只小鼠腹腔注射5μmoL的5-FC,连续7d,首次给药24h后即可观察到SCID小鼠外周血中CD45 细胞显著下降(P<0.01)。结论:YCD自杀基因导入对人原代T细胞功能无显著影响,T-YCD-puroR细胞可以在体内外被5-FC有效杀伤。本研究为进一步研究打下了良好的基础。     

化学性血管再狭窄大鼠模型的建立

为了开展对平滑肌增生引起血管狭窄的实验研究。用化学方法损伤内皮细胞建立血管平滑肌增生模型。方法是利用不同浓度三氯化铁和改变作用时间,造成不同程度的血管内皮损伤,使平滑肌细胞从中膜迁移到内膜增生形成的动脉狭窄,其病理变化和气囊插管法相似,操作容易,可定量控制损伤程度,个体间差异较小,适于大规模药效试验和新药筛选。     

人肝癌特异性EB病毒载体—p^EBAF介导hGM—CSF基因的转移及表达

目的：探索人粒细胞－巨噬细胞集落刺激因子（hGM-CSF)基因在肝癌细胞中特异性表达的新途径。方法：构建p^EBAF/hGM-CSF基因克隆,用脂质体转染法将它分别导入分泌甲胎蛋白（AFP）的肝癌细胞株HepG2和不分泌APF的细胞株SMMC7721,构建两围基因的细胞克隆HepG2/hGM-CSF,SMMC7721/hGM-CSF,用MTT比色法测定细胞上清中hGM-CSF活性。结果：HepG2/hGM-CSF细胞上清hGM-CSF活性平均为46．5ng/ml/10^6/24h,SMMC7721细胞上清中无明显hGM-CSF活性。结：载体p^EBAF介导的hGM-CSF基因能在分泌AFP的肝细胞中获得特异性表达。     

论生物技术在医药领域的应用

生物技术是一门新兴的、综合的学科。生物技术在医药领域的应用涉及到新药开发、新诊断技术、预防措施及新的治疗技术。文章就以上方面做了扼要综述,展示了其广阔的应用前景。     

我国神经遗传病的过去、现在和展望

在临床医学各科的遗传性疾病中,神经系统遗传病的地位举足轻重。但上世纪50年代以来,由于受各种因素的干扰,我国神经系统遗传病的研究极其滞后。近20年来,通过国内学者的共同努力,神经遗传病的研究取得了长足进步,特别是肝豆状核变性、假肥大型肌营养不良、遗传性共济失调等单基因病,以及线粒体遗传病和朊蛋白感染的研究成果最为显著。面临世纪之交的人类基因组计划的巨大挑战,我们应抓住机遇,充分利用我国丰富的遗传资源和各种新技术,加快发展我国神经遗传病的研究。今后研究的方向应是：1．建立神经遗传病的基因库;2．加快神经系统多基因遗传病的研究;3．进一步加强神经遗传病的分子发病机制的研究,特别是蛋白质水平的研究;4．逐渐普及神经遗传病的基因诊断,提高诊断水平;5．系统地开展神经遗传病的预防工作;6．争取在干细胞治疗和基因治疗方面取得突破性进展。     

肺癌综合治疗的进展

根据肺癌的病理类型、TNM分期和病人的一般状况,合理有计划地综合应用手术、放疗、化疗和生物基因治疗,已经在一定程度上提高了肺癌的治愈率。本文对综合治疗的原则、模式和各期肺癌的具体治疗和结果作了概括介绍,特别对发展方向作了讨论。     

脑损伤基因治疗研究进展

各种原因 (外伤、缺血等 )所导致的脑损伤可诱发多种内源性脑保护基因和脑损伤基因的表达 ,这些基因的相继表达及相互调控 ,贯穿于损伤的病理生理过程中 ,并从根本上决定了脑损伤的发展与转归。脑损伤的基因治疗是在对脑损伤后基因的表达及其产物研究的基础上 ,通过选择恰当的基因转移途径 ,定向控制目的基因在损伤区域的表达 ,抑制神经细胞凋亡 ,促进损伤的修复 ,在分子水平达到治疗目的。1　脑损伤后的基因表达脑损伤基因治疗的前提是寻找有效的目的基因。随着对脑损伤机制的深入探讨 ,已发现众多与损伤有关的基因 ,其中一些基因的作用已…     

PTCA后再狭窄的基因治疗

20多年前经皮血管内冠状动脉成形术 (ＰＴＣＡ) ,作为一种治疗阻塞性冠状动脉病的非手术导管疗法 ,已用于临床。 2 0年来由于ＰＴＣＡ器械和技术的迅猛发展 ,应用ＰＴＣＡ治疗冠心病有了巨大的进步。但ＰＴＣＡ后 30 %～ 5 0 %的患者发生再狭窄 ,再狭窄所致的持续血管开放受阻 ,心绞痛、心肌梗塞、再次血管成形术、冠脉搭桥术的高发生率及医疗消费 ,成为ＰＴＣＡ应用的难题〔1〕。ＰＴＣＡ后再狭窄的原因尚不完全清楚 ,目前认为ＰＴＣＡ后再狭窄主要与血小板聚集、血管弹性回缩、血栓形成、新生内膜增生、血管壁平滑肌细胞增生、血管壁的重…