HCCR-2反义核酸对肝癌HepG2细胞的作用

Objective To investigate the effects of antisense recombinant euraryotic expression vector of HCCR-2 on the proliferation and apoptosis of HepG2. Methods The antisense recombinant eukaryotic expression vector of HCCR-2 was constructed. The vector was stably transfected to the HepG2 cells, and positive clones were selected by G418 (antiseuse vector group), pIRES2-EGFP vector was transfected into the HepG2 cells in the same way (pIRES2-EGFP group). The conditions of the nontransfected HepG2 cells were used as control (HepG2 group). Changes in cell growth curve, cell cycle, cell apoptosis and morphology of HepG2 cells after the transfec-tion were detected by MTT method, flow cytometry and transmission electron microscopy, respectively. All the data were analyzed by one-way ANOVA and chi-square test. Results The expression level of HCCR-2 mRNA was down-regulated to 0.39±0.04 in antisense vector group, and the expression level of HCCR-2 mRNA in pIRES2-EGFP group and HepG2 group were 0.62±0.06 and 0.72±0.03, respectively, with significant difference among the 3 groups (F=43.701, P<0.05). The apoptotic rate of HepG2 cells in antisense vector group, pIRES2-EGFP grop and HepG2 group were 13.30%, 2.51% and 2.07%, respectively, with significant difference among the 3 group (χ2=6.793, 8.721, P<0.05). The growth of HepG2 cells in antisense vector group was retarded, and was blocked in G0/G1 stage. Conclusions The HCCR-2 antisense recombinant eukaryotic expression vector can inhibit the mRNA expression of HCCR-2 and promote the apoptosis of cells. HCCR-2 may be involved in cell regulation and the proliferation of hepatocellular carcinoma cells.     

卡介菌多糖核酸辅助治疗难治性肺结核29例

目前耐药结核病的治疗效果不十分理想 ,我所自 1998年开始将卡介菌多糖核酸用于耐药结核病的辅助治疗 ,取得一定的疗效。现将结果报告如下。1　资料与方法1 1　选例标准　①经多种抗结核药物正规治疗 1年以上 ,结核菌持续阳性者 ;②药敏试验 (改良罗氏法 )显示结核菌对异烟肼 (Ｈ)、利福平 (Ｒ)、吡嗪酰胺 (Ｚ)、乙胺丁醇 (Ｅ)、链霉素(Ｓ)等多种药物耐药 ;③胸片显示有病灶或空洞 ;④未用过丙硫异烟胺 (Ｔｈ)、利福喷丁 (Ｔ)、卡介菌多糖核酸 (ＢＣＧ ＰＳＮ)。1 2　随机方法　按随机表随机数字将 5 3例病人分为治疗组和对照组。1 3　一般…     

Ki—Ras反义寡核苷酸对人胃癌细胞及血管内皮细胞的作用

目的 用Ki-Ras的反义寡核苷酸（ASODN）作用于人胃癌细胞和血管内皮细胞，为其抑制胃癌生长及其内血管生成进行前期基础研究。方法 MTT法观察Ki-Ras ASODN对两种细胞增殖的影响，电镜下观察细胞的超微结构变化及有无凋亡发生。结果 Ki-Ras ASODN可明显抑制人胃癌细胞和血管内皮细胞的增殖。在一定剂量下还可诱发细胞凋亡。结论 Ki-Ras P21在人胃癌细胞和血管内皮细胞的增殖与凋亡调控中具有重要作用。     

影响核酸疫苗应用研究的若干问题

核酸疫苗又称基因疫苗或DNA疫苗，这种核酸既是载体又能在真核细胞中表达抗原，刺激机体产生特异而有效的免疫应答，尤其是能诱导产生具细     

新型反义降胆固醇药物Mipomersen进入第二项Ⅲ期临床

2008年8月6日，Genzyme和Isis制药公司宣布开始mipomersen治疗杂合性家族性高胆固醇血症（heFH）的第二项Ⅲ期临床。Mipomersen是第二代反义药物，可以降低体内载脂蛋白B—100的含量（载脂蛋白B—100是合成运送胆固醇的关键蛋白）。Ⅱ期临床试验表明mipomersen注射治疗可以明显降低体内胆固醇及其他致动脉粥样硬化的脂类的含量，且优于其他降脂药物。     

增生细胞核抗原在视网膜色素上皮细胞表达及其反义寡核苷酸的抑制作用

目的 研究视网膜色素上皮(retinal pigment epithelium,RPE)细胞中增生细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)表达及其反义寡核苷酸(antisense oligodeoxynucleotides,AS ODN)对其表达和细胞增生的抑制作用，为增生性玻璃体视网膜病变(proliferative vitreoretinopathy,PVR)治疗探索基因治疗新途径。 方法 (1)体外培养兔眼RPE细胞，在不同时间采用链霉亲合素-生物素化过氧化物酶复合物(streptoavidin-biotin enzyme complex,SABC)免疫组织化学法检测PCNA的表达;(2)脂质体介导下不同浓度的PCNA AS-ODN和正义寡核苷酸(sense oligodeoxynucleotides,S-ODN)分别作用于体外培养的RPE细胞，采用免疫组织化学方法检测PCNA的表达;(3)四唑盐比色法(methyl thiazolyl tetrazolium,MTT)检测在不同浓度的PCNA AS-ODN和S-ODN作用下RPE细胞生长活性及其生长抑制率。 结果 (1)体外培养兔眼RPE细胞表达PCNA，表达高峰为培养后48 h ;(2)在0.28、1.12 μmol/L AS-ODN 作用下，PCNA的表达明显受抑制;(3)0.28、1.12 μmol/L的PCNA AS-ODN 能明显抑制RPE细胞增生活性，并呈剂量依赖性，其生长抑制率分别达53%、81%。 结论 一定浓度PCNA AS-ODN能序列特异性地抑制RPE细胞PCNA表达和增生活性，有望进一步用于PVR的治疗实验研究。 (中华眼底病杂志, 2002, 18: 231-233)     

抗CD_3单链抗体的构建及核酸序列分析

目的探讨用抗CD3抗体重链可变区与轻链可变区基因,经重叠延伸拼接连接形成单链抗体。方法用DNA序列分析及动态模拟构象分析,并与相关软件分析,推导Scfv基因编码的氨基酸序列。结果该基因全长732bp,三维构象稳定,兼容性分数S>0。将单链抗体基因克隆于载体中,在强启动子作用下,目的蛋白的表达量约占菌体蛋白总量的20%。结论重链可变区与轻链可变区经短肽连接而成的单链抗体,具有分子量小,免疫原性低的特性,具有较广的应用前景。     

抗肿瘤免疫核糖核酸联合卡铂治疗恶性胸腔积液

[目的]观察应用微创置管配合抗肿瘤免疫核糖核酸（Anti-cance，IRNA）及卡铂（CBP）治疗恶性胸腔积液的疗效及毒副反应。[方法]64例恶性胸腔积液患者．随机分为两组。全部患者均经PICC管（外用穿刺中心V导管）行胸腔闭式引流，治疗组30例胸腔注入Anti-cancer iRNA 20mg＋卡铂200mg，对照组34例胸腔注入卡铂200mg。[结果]治疗组CR43．3％（13／30）有效率为93．3％，对照组CR14．7％，有效率为61．8％，差异有显著性（P〈0．01），KPS评分改善率治疗组和对照组分别为83．3％和42．2％，差异有显著性（P〈0．01）．治疗单毒副反应仅为一过性发热，对照组骨髓抑制，恶心呕吐反应明显，与治疗组比较差异有显著性（19〈0．01）。[结论]抗肿瘤免疫核糖核酸联合卡铂治疗恶性胸腔积液有效率高，副作用少，能改善生活质量，有较高临床应用价值。