用脱脂奶粉代替小牛胸腺DNA进行核酸分子杂交

本文应用脱脂奶粉代替小牛胸腺DNA等大分子物质配制预杂交液和杂交液进行核酸分子杂交,同时用经典的含小牛胸腺DNA等大分子物质的预杂交液和杂交液作为对照。结果表明,用脱脂奶粉可以代替小牛胸腺DNA等大分子物质进行核酸分子杂交,此法经济,配制简便,实际可用。     

核酸杂交反应中影响因素分析

以光敏生物素标记的R3 cDNA克隆为模型,采用正交设计的方法,对影响核酸杂交反应的主要因素:杂交反应温度,反应时间,探针浓度及甲酰胺浓度作了综合性分析。当探针浓度为800μg/L,甲酰胺浓度为10mol/L,50℃杂交反应6h,可获得最高灵敏度(10pg)。     

色素障碍性皮肤病

20063183卡介菌多糖核酸对白癜风疗效及外周血T淋巴细胞亚群的影响分析/李东宁(锦州医学院一附院),裴洪菊,周和清…∥中国中西医结合皮肤性病学杂志.2006,5(2).77~79107例T淋巴细胞亚群检测异常的白癜风患者随机分为三组:卡介菌多糖核酸(BCG-PSN)治疗组(A组)36例,常规中药治疗组(B组)36例,联合治疗组(C组)35例,治疗前后采用链菌素生物素-碱性磷酸酶链接法(SAP法)检测T淋巴细胞亚群,并与50例健康体检者对照,结果A组总有效率38·8%,B组总有效率33·3%,C组总有效率61·1%。各组治疗前与健康对照组比较CD3、CD4降低(P<0·01),CD8升高(…     

大视野

卫生部近日发布《甲型H1N1流感诊疗方案（2009年第三版）》，其中首次将肥胖者列为甲流重症高危人群。专家提醒，肥胖者出现流感样症状后，应当给予高度重视，尽早进行甲流病毒核酸检测及其他必要检查。方案对如何加强重症病例的甄别和救治作出了重点描述，如持续高热3天以上；剧烈咳嗽，咳脓痰、血痰等。     

专统保健品销量不断下滑的三大伤

中国保健品行业从1984年其市场规模为20亿元，1994年突破300亿元，随后的“鳖精事件”让行业受到重创。经过1995年的下跌、1996、1997年的盘整，保健品业1999年恢复到1994年的水平，而2000年达到了空前的500亿元。然而，2001年的“补钙过热”、“核酸风波”让保健品行业再次陷入“信任危机”，2002年整个行业销售额下滑到仅200亿元，2003年由于非典的缘故勉强达到300亿，     

长链核酸扩增技术评价病毒灭活效果的研究

目的:探讨用长链核酸扩增技术评价病毒灭活效果的可行性.方法:针对伪狂犬病毒(pseudorabies virus,PRV)糖蛋白gD基因前后的保守区设计预计产物长短不一的5对引物,用半巢式PCR技术扩增经低pH法(4.0±0.1)、巴氏消毒法[(60±1.0)℃]和s/D法(有机溶剂/洗涤荆)处理后的PRV核酸,同时以细胞感染法做平行对照.结果:低pH对PRV核酸有破坏作用,处理时间越长,核酸损伤程度越明显,处理60 min时,6.62 lgTCID50的PRV完全被灭活.5条不同长度PCR扩增产物中,只有3.9 kb的长片段检出与细胞培养结果一致.7.25 lgTCID50的PRV经(60±1.0)℃处理20 min后即被完全灭活,7.13 lgTCID50的PRV经s/D法处理1 h后被完全灭活,但各长度核酸片段扩增均为阳性,与细胞感染试验结果不符.结论:低pH对PRV核酸的损伤程度随处理时间的延长而增加;用长链PCR(3.9 kb)技术来评价经低pH法灭活病毒的效果是可行的,而该法不适合评价巴氏消毒法和S/D法灭活病毒的效果.     

Caspase-3反义寡核苷酸抗凋亡作用的研究

目的 研究caspase-3反义寡核苷酸对6-OHDA诱导大鼠中脑多巴胺神经元凋亡的保护作用.方法 向四组SD大鼠的中脑黑质部位注入反义、错义、正义寡核苷酸及NS,然后再注入6-OHDA,取中脑做连续切片,原位杂交及免疫组化检测黑质caspase-3的表达及TH的表达,原位末端标记法(Tunel)检测黑质细胞的凋亡.结果 反义组Tunel阳性细胞数为82±8.6,方差分析显示反义组阳性细胞数显著性低于其他各组(P＜0.05);反义组手术侧TH阳性细胞数为168.6±11.4,与对侧阳性细胞比值为63%±11.3%,显著性高于其余各组(P＜0.05).结论 有效阻断caspase-3的表达可减轻6-OHDA诱导的多巴胺神经元凋亡,caspase-3可作为保护性治疗帕金森病的靶点.     

基因功能研究策略

美国塞莱拉遗传信息公司通过人类基因组计划，于2001年在美国《科学》杂志和英国《自然》杂志上联合宣布，他们绘制出了准确、清晰、完整的人类基因组图谱。基因组计划完成后，新的难题摆在了科学家的面前，那就是基因功能的研究以及怎样提高基因功能研究的效率等问题。对于一种基因，阐明基因的结构与生物学功能、基因的结构与生物学和临床医学之间的相互关系以及新基因表达调节的机制，是目前基因的分子生物学研究领域中最具挑战性的工作。当前主要采用以下技术。