肺肿瘤癌基因与抑癌基因表达的研究

目的探讨癌基因与抑癌基因的表达与肺癌发生、发展的关系。方法对61例肺肿瘤标本,用免疫组化方法同时检测癌基因Bcl-2、抑癌基因视网膜母细胞瘤(Rb)、p53、p16。结果Rb与p16表达、p53与Bcl-2表达呈负相关(P<0．05),Rb与p53表达、p16与Bcl-2表达呈正相关(P<0．05)。结论肺癌的发生与发展是癌基因激活、抑癌基因失活及细胞凋亡调控基因异常等多基因损害的积累过程和协同作用使各细胞增殖调控途径失控,最终导致肺癌发生并使肺癌发展。     

喉癌下咽癌TGFβ1、p16表达的意义

目的 :通过对喉癌、下咽癌组织中转化生长因子 β1(TGFβ1)及 p16蛋白的定位、半定量研究 ,探讨其在喉癌、下咽癌组织中的表达与意义。方法 :采用SABC免疫组化法研究TGFβ1与 p16蛋白的表达 ,并对表达结果进行统计分析。结果 :TGFβ1位于胞浆 /胞膜 ,p16蛋白位于胞浆 /胞核。TGFβ1强表达率为61% ,p16蛋白强表达率为 66%。高分化与中、低分化肿瘤的TGFβ1表达均有统计学差异 (P <0 .0 5) ;高分化与低分化肿瘤的 p16蛋白表达具统计学差异 (P <0 .0 5)。TGFβ1和 p16蛋白之间存在正相关系 (P <0 .0 5)。TGFβ1和 p16蛋白的表达与患者年龄、性别、肿瘤生长部位、病程、临床分期无明显相关。 结论 :TGFβ1与 p16蛋白在喉癌、下咽癌中存在缺失表达 ,在高分化肿瘤中有更高的表达 ,在细胞周期中具有共同的作用。     

HPV16阳性宫颈非典型增生和浸润性宫颈癌组织中E6变体的研究

通过检测E6变体在HPV16阳性的宫颈非典型增生(CIN)和宫颈浸润癌(ICC)患者中的分布,研究其致癌能力.方法:用PCR和双脱氧终止荧光法检测了42例E6基因点突变及其编码氨基酸改变,统计分布差异.结果:2例(5%)为原型,40例(95% )的E6DNA序列中含有1至3个点突变,导致13类E6氨基酸残基改变,组合成17种(94%)HPV16变体.出现频率较高的4种变体在CIN和ICC病例中共同存在,分布无显著性差异(P>0.05).DNA的点突变数在CIN和ICC病例中的分布也无显著性差异(P>0.05).结论:HPV16E6的变体多于原型,但是变体和原型的致癌能力没有明显差别.     

大肠癌p16抑癌基因甲基化及与Dukes分期的关系

目的 检测大肠癌患者p16基因启动子CpG区甲基化的改变,探讨其与大肠癌发生、发展和临床资料的关系。方法 采用甲基化特异PCR技术（MSP法）研究58例大肠癌标本p16基因甲基化改变,分析临床病理资料。结果 25例标本（43．1％）呈p16 CpG区甲基化阳性;Dukes C、D期病人p16 CpG区甲基化发生率（75％）明显高于Dukes A、B期病人（13．3％）。结论 p16启动子区甲基化导致p16抑癌基因失活参与了大肠癌的发生和发展;p16甲基化可以作为估计大肠癌病人预后的一个指标。     

喉癌中p16基因突变和甲基化的研究

目的 探讨ｐ１６基因在喉癌发生发展中的作用和在喉癌中的失活机制。方法 应用聚合酶链反应－单链构象多态性分析（ｐｏｌｙｍｅｒａｓｅ ｃｈａｉｎ ｒｅａｃｔｉｏｎ－ｓｉｎｇｌｅ ｓｔｒａｎｄ ｃｏｎｆｏｒｍａｔｉｏｎ ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍａｎａｌｙ－ｓｉｓ,ＰＣＲ－ＳＳＣＰ）银染方法和ＰＣＲ甲基化敏感内匹酶方法检测３２例喉癌和相应癌旁组织的ｐ１６基因第１,第２外显子突变和甲基化热点区域部分内切酶     

非何杰金淋巴瘤P16基因缺失及其与组织亚型和治疗的关系

探讨非何杰金淋巴瘤中Ｐ１６基因缺失情况及其与组织亚型和治疗的关系。方法采用聚合酶链反应－单链构象多态银染技术（ＰＣＲ－ＳＳＣＰ）检测２９例非何杰金淋巴瘤患者Ｐ１６基因的变化。结果２９例非何杰金淋巴瘤中１２例中存在Ｐ１６基因缺失,总缺失率４１．３％;１２例缺失中有６例在两个疗程化疗后缺失消失;高度恶性淋巴瘤缺失率高。     

脑胶质瘤p16基因转染对细胞生长及放射敏感性的影响

目的　探索p16基因在脑胶质瘤发生发展过程中的作用及p16基因与肿瘤细胞放射敏感性间的关系。方法　将外源野生型p16基因导入胶质瘤细胞株U251、C6,筛选阳性克隆。同时以空载体质粒pCDNA3为对照,免疫组化检测p16基因表达,用MTT法测定细胞生长曲线及肿瘤杀伤率。结果　转染p16基因的U251、C6细胞有外源p16基因的整合及表达,克隆形成率减少,生长速度明显减慢,对辐射的敏感性增强。结论　导入外源野生型p16基因可抑制胶质瘤细胞恶性增殖,提高胶质瘤细胞对辐射的敏感性。     

起始密码下游序列与16srRNA3′端序列的匹配性对基因表达效率的影响

目的 :研究起始密码下游序列与 16srRNA 3′端 +146 9——— +1482局部序列间的匹配关系对基因表达效率的影响。方法 :我们一方面对人IL_2、人IL_8、人IL_6 ,人GM_CSF、人G_CSF、人IL_1ra、人IL_9等全长cDNA序列及 5′末端局部序列与 16srRNA 3′端 +146 9——— +1482序列进行匹配性进行分析 ,寻找序列匹配性与表达效率间的关系 ;另一方面 ,对人IL_6、人GM_CSFcDNA 5′端序列进行沉默突变 ,增强其与 16srRNA 3′端 +146 9——— +1482序列间的匹配性 ,并克隆入pKpL4表达型质粒载体 ,通过大肠杆菌进行表达 ,实验验证序列匹配性与基因表达效率的关系。结果 :分析发现起始密码下游局部序列与 16srRNA 3′端 +146 9——— +1482核酸匹配性越好 ,则目的蛋白表达效率越高 ;目的基因编码区内与 16srRNA 3′ +146 9——— +1482间的最大匹配区域越靠近 5′末端 ,目的蛋白表达效率越高。通过对人IL_6、人GM_CSFcDNA 5′末端序列进行沉默突变 ,改善其与 16srRNA 3′端 +146 9——— +1482序列的匹配性后 ,目的蛋白的表达量均呈不同程度地提高。结论 :提高起始密码下游序列与 16srRNA 3′端 +146 9——— +1482局部序列间的匹配性 ,可增强目的基因的表达效率。     

原发性星形细胞瘤中P16蛋白的表达及意义

目的 :检测 P16基因蛋白在原发性星形细胞瘤中的存在状况 ,以探讨不同病理类型的星形细胞瘤中 P16蛋白的表达及意义。方法 :S-P法对 10 2例 10 %甲醛液固定 ,石蜡包埋的星形细胞瘤标本进行免疫细胞化学检测 ,阳性细胞计数在光镜高倍视野(× 40 0 )下进行。结果 :低度恶性星形细胞瘤 ( WHO ～ )中 P16表达均为阳性 ,高度恶性星形细胞 ( WHO ～ )中阳性表达率为48.1%( P<0 .0 1)。结论 :P16蛋白参与星形细胞瘤增殖过程并影响其细胞分化 ;P16蛋白表达缺失可能是星形细胞瘤从低度恶性向高度恶性过度的重要因素之一。     

p16抑癌基因在卵巢浆液性肿瘤中的表达及意义

目的：研究ｐ１６在卵巢浆液性肿瘤中的表达,并探讨其表达与肿瘤的性质、临床分期、组织分化及腹水的关系。方法：用Ｓ－Ｐ免疫组化法,检测了８１例卵巢浆液性肿瘤中抑癌基因ｐ１６的表达。结果：ｐ１６在恶性、交界性及良性肿瘤中的阳性表达率分别为２０．７％、６０．０％和６９．２％。交界性和良性肿瘤的表达率皆明显高于恶性肿瘤（Ｐ〈０．０５,Ｐ〈０．０１）。ｐ１６的表达与卵巢癌的组织分化和临床有关（Ｐ〈０．０１,Ｐ