浅谈牛奶体细胞数在奶牛饲养管理中的应用

体细胞是奶牛乳房健康状况及衡量牛奶质量的一项重要指标,本文介绍了牛奶体细胞数在奶牛饲养管理中的应用。     

STUDY ON THE MECHANISM AND EFFECTS OF GLY-TYR-NH2 AND GLY-TYR-LYS ON RAT LUTEAL CELLS IN VITRO

The action of Gly-Tyr-NH2,(GY-NH2) and Gly-Tyr-LYS(GYK) on ^125I-LH binding,cAMP accumulation and progesterone production was investigated.Incubation of rat luteal cells for 2.5h with GH-NH2 and GYK at dosage of 0.2mmol/L caused a significant inhibition of basal and gonadotropin-stimulated steroidogenesis.GYNH2 and GYK were also foumnd to reduce cAMP formation in response to hCG.The activity of adenylate cyclase of luteal cells was inhibitd by 0.2mmol/LGY-NH2 and GYK.GY-NH2 and GYK at a concentration of 0.2mmol/L were not found to have an inhibitory effect on 8Br-cAMP-stimulated progesterone production.GY-NH2 and GYK did not affect ^125I-LH binding to LH receptors on the luteal cellsurface.These results suggest that GY-NH2 and GYK inhibit steroidogenesis at the step of gonadotropin-stimulated c AMP for mation in luteal cells.Adenylate cyclase in luteal cells was also inhibited.     

胃癌p53蛋白表达与组织学类型和预后的关系

人体p53抑制基因在某些恶性肿瘤细胞内失活，尤其在胃癌细胞，由此而引起半衰期较长的p53蛋白形成．这种蛋白可用免痤组化法测出：p53抑制基因的突变与p53蛋白聚积有密切关系，在胃癌，p53抑制基因的突变发生率变化于4％～64%之间，这种明显的差异多因测定p53基因方法的不同以及研究范围仅限于某个特定的组织学类型所致。     

人心肌肌钙蛋白I第2和第4个密码子同义突变对其在大肠埃希菌中表达的影响

目的 对人心肌肌钙蛋白I（cTnI）基因实行定点突变并进行原核表达，观察此突变对cTnI表达量的影响。方法 利用RT-PCR方法从人心肌细胞的总RNA中克隆出编码人心肌肌钙蛋白I的cDNA片段，设计引物将其第2和第4个密码子突变后插入原核表达载体形成重组体，并导人宿主菌BL21（DE3）中，经IPTG诱导表达，Ni-NTA树脂纯化后行Western blot鉴定，观察突变对cTnI表达的影响。结果 突变后的cTnI基因与对照组相比在大肠埃希菌中得到高效表达，经纯化可获得电泳单点纯的cTnI蛋白。结论 成功克隆了cTnI基因，所设计的同义突变可促进cTnI在大肠埃希菌中的高效表达。     

β-catenin基因第3外显子突变及蛋白异常表达与胰腺实性-假乳头状瘤发生的关系

目的研究Wnt信号中β-catenin基因第3外显子突变及蛋白异常表达在胰腺实性-假乳头状瘤（SPTs）发生中的作用。方法①对15例SPTs石蜡包埋组织进行DNA提取，PCR扩增，PCR产物纯化、测序，对β-catenin基因第3外显子进行突变分析。②采用免疫组化PV6000法检测SPTs组织中β-catenin蛋白的表达。结果①β-catenin基因第3外显子在15例SPTs组织中有12例发生了一个碱基的错义突变，突变率为80．0％，表现在密码子32位（5例）、33位（3例）和37位（4例）。②15例SPTs组织中有13例β-catenin蛋白呈细胞核表达，异常表达率为86．7％。结论Wnt信号中β-catenin基因突变及蛋白核内聚集在SPTs发生中起重要作用。     

乙型肝炎病毒免疫逃避株表面抗原决定簇编码区的序列分析

应用聚合酶链反应（ＰＣＲ）产物直接测序，在国内首次发现１例持续高滴度乙型肝炎表面抗原（ＨＢｓＡｇ）和抗一ＨＢｓ共存者携带的乙型肝炎病毒ＤＮＡ第５３２位碱基Ａ被Ｇ取代，推导其“ａ”决定簇中第１２６位苏氨酸被丙氨酸取代，提示该株“ａ”决定簇第一个结构环疏水性增加，由此可能导致其抗原性改变，而诱发免疫逃避株形成。     

脆性X综合征中不稳定的DNA序列和异常甲基化研究

采用ＰＣＲ结合序列胶分析的方法，对８２条正常中国人Ｘ染色体ＦＲＡＸＡ位点（ＣＧＧ）ｎ重复序列拷贝数的多态性进行了测定，其范围为２１～３１，高峰为２７。并通过Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交分析了来自６个Ｆｒａ（Ｘ）家系的１５名成员（ＣＧＧ）ｎ的拷贝数与该重复序列上游ＣｐＧ岛的甲基化状态。Ｆｒａ（Ｘ）患者（ＣＧＧ）ｎ大量扩增并伴随ＣｐＧ岛异常甲基化。Ｆｒａ（Ｘ）携带者女性（ＣＧＧ）ｎ扩增较少，有嵌合现象。其子代或产生更大扩增，或保持原来状态，呈动态突变遗传特征。     

骨髓基质细胞作为人骨形态发生蛋白-2基因受体细胞的可行性研究

目的：通过检测hBMP-2基因在受体细胞中瞬时表达水平，探讨骨髓基质细胞作为hBMP-2基因受体细胞的可行性。方法：应用脂质体介导的方法将携带hBMP-2基因的重组载体PcDNA3-hBMP-2导人体外培养的骨髓基质细胞中，分别应用原位技术和酶联免疫吸附方法检测目的基因在受体细胞内mRNA和蛋白质的存在与表达状况。结果：在mRNA水平，可检测到hBMP-2基因在阳性细胞进行了转录；在蛋白质水平，从细胞的培养基中可检测到hBMP-2蛋白质。结论：骨髓基质细胞可以作为hBMP-2基因的受体细胞，基因表达可分泌hBMP-2蛋白质。