亚砷酸钠对雄性小鼠生殖细胞损伤的实验研究

用浓度为1、3、5mg/kg 的亚砷酸钠及40mg/kg 环磷酰胺分别给雄性小鼠腹腔注射5天,于染毒后1、3、5周观察其精子,结果表明,亚砷酸钠是诱发雄性小鼠生殖细胞畸变的诱变剂.     

亚砷酸钠处理前后人胚胎皮肤细胞基因表达变化的基因芯片研究

目的 应用基因芯片技术研究亚砷酸钠（NaAsO2）处理前后人胚胎皮肤细胞（HES）基因表达的变化。方法 提取NaAsO2处理前后HES细胞的总RNA，纯化为mRNA并反转录成cDNA。分别用Cy3和Cy5两种不同的荧光染料标记成探针，与载有4096个靶基因的表达谱芯片进行杂交，通过扫描、计算机软件分析寻找经NaAsO2作用后差异表达的基因。结果 共筛选出包括细胞凋亡、DNA合成修复、原癌基因和抑癌基因等差异表达基因125个，其中65个表达上调，60个表达下调。结论 NaAsO2能引起HES细胞内多种基因的表达变化。     

亚砷酸钠亚慢性染毒对小鼠肝脏肾脏的损伤作用

目的 了解亚砷酸钠亚慢性染毒对小鼠不同脏器的毒性作用及砷在不同脏器中的蓄积情况.方法 采用亚慢性毒性实验方法.昆明种小鼠60 只,按体重随机分成正常对照组(C)、低剂量组(L)、中剂量组(M) 和高剂量组(H) 4组,每组15只,分别自由饮用蒸馏水及0.125 mg/kg、0.5 mg/kg 和2.0 mg/kg 的亚砷酸钠水溶液,连续染毒90 d,实验结束后光镜下对各组小鼠肝脏和肾脏进行组织学观察,采用火焰原子吸收法检测小鼠肝、肾组织砷含量.结果 不同剂量的亚砷酸钠能破坏小鼠肝、肾脏器的正常结构,肝脏和肾脏组织砷含量随着砷染毒剂量的增加而增加(P<0.01).结论 小鼠经不同剂量的亚砷酸钠染毒90 d后,可出现肝脏、肾脏等脏器损伤,推测砷在脏器的蓄积是造成损害作用的物质基础.     

亚砷酸钠对L-02肝细胞氧化应激及PSMB5、SOD1表达的影响

目的 观察不同浓度亚砷酸钠(NaAsO2)对L - 02肝细胞氧化应激及20S蛋白酶体β5亚基（20S proteasome β5 subunit,PSMB5）、超氧化物歧化酶1（superoxide dismutase 1,SOD1）mRNA和蛋白表达的影响。方法 用不同剂量的NaAs02分别处理L - O2肝细胞24 h,用比色法检测氧化应激指标超氧化物歧化酶（superoxide dismutase ,SOD）、SOD1 、谷胱甘肽过氧化物(glutathione peroxidase,GSH - Px)活力、丙二醛（malondialdehyde,MDA）含量;实时荧光定量PCR 法及蛋白免疫印迹法分别检测PSMB5、SOD1的mRNA及蛋白表达情况。结果 （1）与对照组比较,随着砷染毒剂量的增加,细胞内的SOD活力逐渐降低,SOD1、GSH - Px活力、MDA含量均先上升后下降（P＜0.05）。（2）与对照组比较,各染砷组PSMB5 和SOD1 mRNA水平均逐渐上升（P＜0.05或P＜0.01）。（3）与对照组比较,各染砷组PSMB5蛋白表达均降低（P＜0.01）;而10、20 μmol／L NaAsO2组SOD1蛋白表达逐渐上升,40 μmol／LNaAsO2组SOD1蛋白表达降低（P＜0.05）。结论 NaAs02可能通过影响PSMB5的转录后表达使其蛋白表达降低,同时可降低SOD1蛋白表达及其酶活力导致氧化应激而损伤机体。     

亚砷酸钠对体外培养淋巴细胞存活率及金属硫蛋白含量的影响

目的:了解亚砷酸钠对体外培养淋巴细胞活性及金属硫蛋白(MT)表达的影响。方法:无菌抽取健康人血液,分离出淋巴细胞,分别用2、5、10、15、30、60μmol/L亚砷酸钠(2、5、10、15、30、60μmol/L染毒组)作用于淋巴细胞,采用四噻唑兰还原法测定不同染毒时间(24、48、72h)各染毒剂量组淋巴细胞存活率,采用银饱和-血红蛋白原子吸收分析法测定各组MT含量。结果:低浓度亚砷酸钠(2、5μmol/L)组细胞存活率较对照组明显升高(P<0.05);其它各组细胞存活率随染毒剂量增加而降低,与对照组及2、5μmol/L染毒组比较差异有统计学意义(P<0.05);不同剂量亚砷酸钠染毒一定时间后细胞MT含量增加,且存在时间-剂量交互效应(P<0.05),MT含量在染毒48h左右达到高峰,其中2、5μmol/L组MT含量高于对照组及其它各剂量组。结论:低剂量砷可促进淋巴细胞的体外存活,并可诱导其MT合成增加。     

亚砷酸钠影响免疫功能相关基因表达水平的研究

目的：利用基因芯片技术研究亚砷酸钠对免疫功能相关基因表达的影响,探讨砷的分子遗传学机制。方法：将肝细胞cDNA克隆库的基因点在芯片上（每个克隆的基因尚未知）,然后与暴露于不同砷浓度肝细胞中得到的cDNA第一链杂交,对表达有差异的基因进行基因测序,再明确基因,最后筛选出与免疫功能相关的基因。结果：砷可通过抑制细胞角蛋白8基因（CK8）和人类白细胞抗原A基因（HLA－A）的表达来影响机体免疫功能。结论：从基因水平研究砷对免疫功能的作用机制是可行的,显示其对免疫系统的毒性作用。     

亚硒酸钠和亚砷酸钠对小鼠骨髓细胞微核率的影响

本文研究了亚硒酸钠对亚砷酸钠诱导小鼠骨髓细胞微核率的影响。结果表明亚砷酸钠显著增高小鼠骨髓嗜多染红细胞的微核率,与对照组比较有显著性差异(P<0.01).亚硒酸钠降低亚砷酸钠诱导的微核率。     

亚砷酸钠对HaCaT细胞的氧化应激作用

目的研究不同浓度亚砷酸钠(NaAsO2)对人皮肤永生化角质形成细胞株(HaCaT)的氧化应激作用。方法用AlamarBlue还原法检测NaAsO2对细胞活力的影响,用PI染色法检测细胞的凋亡和坏死率,利用2′7′二乙酰二氯荧光素(DCFHDA)检测细胞内ROS水平,同时用荧光法测定细胞内还原型谷胱甘肽(GSH)和氧化型谷胱甘肽(GSSG)的含量。结果0001μmolL至1μmolL组的AlamarBlue还原率显著高于对照组,而10μmolL以上组的AlamarBlue还原率下降,20μmolL组的凋亡和坏死率显著高于对照组,各实验组的DCF荧光强度与对照组相比明显提高,1μmolL以上组细胞内GSH水平增高,5μmolL组GSSG水平增高。结论各浓度砷引起HaCaT细胞内ROS增多,低浓度时促进细胞增殖,高浓度则抑制细胞活力,砷诱导HaCaT细胞内的GSH增多,发挥解毒作用。     

急慢性砷染毒的肝细胞L-02的基因芯片分析

目的用基因芯片分析急慢性砷染毒时人正常肝细胞(L-02细胞)基因表达谱的变化。方法6omol／L的亚砷酸钠染毒L-02细胞2，15，24h，4μmol／L的亚酸钠染毒L-02细胞2周，分别与未染毒的L-02细胞抽提RNA作表达谱基因芯片杂交。结果急性和慢性砷诱导细胞基因表达谱截然不同。染砷后首先激活的是解毒功能相关的基因和一些蛋白质合成相关的基因。长期染砷后与肿瘤发生及氧化还原有关的基因表达量升高。结论细胞短期染砷毒后，应激和解毒功能有关的蛋白表达上调，长期染砷后与肿瘤有关的基因表达上调，急慢性砷刺激下细胞以不同的方式抵抗砷毒。