靶向ERCC1 RNA干扰对人肺腺癌细胞顺铂耐药的逆转

目的: 探讨利用RNA干扰技术切除修复交叉互补基因1（excision repair crosscompletion gene 1，ERCC1）逆转耐顺铂 (cisplatin,CDDP)人肺腺癌细胞A549/CDDP的耐药性。方法：(1) 常规体外培养A549/CDDP细胞，以脂质体包裹的ERCC1siRNA转染细胞，转染浓度分别为100、200     

动物细胞培养过程中pH和溶氧的关联控制

本文通过对动物细胞培养过程中pH值和溶氧(DO)水平控制要求的分析,设计了用空气、氧气、氮气和二氮化碳四组气体关联控制pH值和DO水平的控制系统。该系统根据对瞬时pH值和DO值参数的检测,通过微处理机进行一系列的逻辑判断和具有PI调节规律的DDC增量词节计算,再经四气体关联互补计算和多重时序控制环节,综合调节四组气体电磁阀的相互开闭时间,实现对培养过程中pH值和DO水平的控制,满足动物细胞生长的需要。     

中国和泰国人群DNA修复基因XRCC1多态性研究

目的 获得DNA修复基因X线修复交叉互补基因1ARG399Gln基因型频率及基因频率在中国汉族及泰国人群中的分布特点。方法 采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性（PCR-RFLP）方法结合核苷酸序列分析检测150例中国汉族及140例泰国人群XRCClArg399Gln等位基因及基因型分布频率。结果 基因型Arg/Arg,Arg／Gln,Gln／Gln在中国汉族人群中的频率分别为50．00％,44．67％,5．30％;在泰国人群中的频率分别为62．86％,31．43％,5．71％,基因型频率分布符合Hardy—Weinberg平衡定律,中国汉族人群基因型频率分布和泰国、日本、韩国、瑞典人群相近（P〉0．05）,与美国白人、美国黑人、葡萄牙、印度人群差异有显著性（P〈0．05）。结论 XRCCl Arg399Gln基因型在中国汉族和泰国人群中分布差异无显著性,该基因多态性存在种族和地域差异。     

人源性食管鳞癌cDNA文库的构建及鉴定

目的:构建人源性食管鳞癌cDNA噬菌体表达文库。方法:从人食管鳞癌组织中提取总RNA并分离纯化mRNA,用RT-PCR合成cDNA单链,LD-PCR扩增双链cDNA,除去<500bp的小片段,与载体λTriplEx2噬菌体左右臂连接,经体外包装即构成全长cD-NA噬菌体表达文库。转化E.coliXL1-Blue感受态细胞,测定文库的滴度,确定文库的容量大小,用蓝白筛选测定文库的重组率,PCR鉴定cDNA插入片段的大小。结果:构建的人源性食管鳞癌cDNA噬菌体表达文库滴度为1.64×106pfu/mL,重组率为98.6%,cDNA插入片段的大小为0.7～2.5kb,平均长约1.5kb。结论:成功构建1个人源性食管鳞癌cDNA噬菌体表达文库,适合于大批量筛选cDNA克隆的食管鳞癌肿瘤抗原基因。     

理想的医护关系模式“沟通—协作—互补”

要提高手术室的护理质量和工作效率,必须建立和谐的医患关系,医护关系。在手术室工作的护理人员应不断更新自身的专业技能,精益求精,在工作中更好地配合手术操作,注重和医生、麻醉师进行沟通,彼此互相信任,互相配合工作,让手术配合更加顺畅。     

公立医院与民营医院的SWOT分析及互补合作模式探讨

本文针对公立医院与民营医院的现状,运用古典战略理论中的SWOT 分析法对我国公立医院与民营医院所面临的内外部作用环境进行分析, 在此基础上提出创建两者之间的互补合作模式的相关政策建议。     

肺结核患者外周血αβT细胞CDR3谱系研究

目的探讨活动性肺结核患者外周血T细胞TCRα,β链CDR3谱系漂移,为肺结核患者特异性T细胞免疫应答机制和免疫治疗研究提供基础。方法采用基因扫描谱型分析技术,分析6例正常献血员及6例活动性肺结核患者PBMC中T细胞TCR CDR3谱型分布特征及患者TCRVα和Vβ基因家族的优势取用情况,对克隆性增生T细胞CDR3区进行序列分析。结果6例正常献血员外周血中TCR 32 Vα,24Vβ家族CDR3谱型均呈高斯分布(gaussian distribution),6例活动性肺结核患者出现不同Vα和Vβ家族优势取用,对部分单/寡克隆增生T细胞α,β链CDR3区基因进行测序,证实存在不同的CDR3序列。结论肺结核患者活动期外周血T细胞TCRα,β链CDR3谱系出现明显漂移,提示CDR3的选择性表达与结核患者细胞免疫应答机制有关,优势取用Vα,Vβ家族T细胞TCR CDR3序列的确定,为肺结核患者特异性T细胞免疫治疗研究提供基础。     

LIG4mRNA与XRCC4mRNA在宫颈癌中的表达及临床意义

目的探讨宫颈癌组织中DNA连接酶4(LIG4)及X射线修复交叉互补基因4(XRCC4)的mRNA表达水平及临床意义。方法应用实时荧光定量RT-PCR技术检测61例宫颈癌和20例正常宫颈组织中LIG4和XRCC4的mRNA表达水平,分析两种基因的表达与宫颈癌分期、分化程度及盆腔淋巴结转移之间的关系。结果 LIG4 mRNA和XRCC4mRNA在宫颈癌组织及正常宫颈组织中的表达分别为(2.88±1.97)、(5.02±1.87)和(2.16±0.99)、(3.72±1.36),差异有统计学意义,P值分别为0.00和0.00;宫颈癌患者盆腔淋巴结有转移组和无转移组中的表达分别为(0.61±0.17)、(0.41±0.28)和(0.80±0.31)、(0.58±0.26),差异有统计学意义,P值分别为0.00和0.01;宫颈癌低分化组和中高分化组中的表达分别为(1.81±0.99)和(2.03±1.25)、(1.50±0.76)和(1.45±0.57),差异无统计学意义(P>0.05)。LIG4 mRNA在Ⅱ期和Ⅲ期宫颈癌组织中的表达分别为(0.71±0.34)和(0.96±0.36),差异有统计学意义,P=0.01。LIG4 mRNA与XRCC4mRNA在宫颈癌组织中表达呈正相关(r=0.38,P=0.00)。结论 LIG4 mRNA和XRCC4 mRNA在宫颈癌组织中的异常表达与宫颈癌的发展及盆腔淋巴结转移密切相关。     

非小细胞肺癌 EGFR基因突变与ERCC1、TYMS mRNA表达相关性的研究

目的：探讨非小细胞肺癌表皮生长因子受体（EGFR）基因突变与核苷酸切除修复交叉互补基因1（ERCC1）、胸苷酸合成酶（TYMS） mRNA表达的相关性。方法收集该科2013年2～12月符合入组条件的NSCLC患者97例,肿瘤组织标本由术中切取或穿刺获得。使用xTAG-液相芯片法检测EGFR（E18、E19、E20、E21）基因突变,使用分支DNA-液相芯片法检测ER-CC1、TYMS mRNA表达水平,并分析EGFR基因突变与 ERCC1、TYMS mRNA表达水平的相关性。结果97例检测样本中, EGFR基因突变29例,突变率为30％（29／97）,女性、无吸烟史、腺癌患者EGFR基因突变检出率较高（P＜0．05）。EGFR突变与ERCC1 mRNA表达有相关性（χ2＝4．088,P＜ 0．05）,与 TYMS mRNA 表达无相关性（χ2＝ 0．265,P＞ 0．05）。结论 NSCLC EGFR基因突变与ERCC1 mRNA表达存在相关性,与TYMS mRNA表达无相关性。