运用变性高效液相色谱对肺炎克雷伯菌产ESBL进行基因分型

目的 通过运用变性高效液相色谱（DHPLC）技术对前期研究已确认产超广谱β-内酰胺酶（ESBL）的肺炎克雷伯菌临床分离株TEM型质粒进行基因分型,试图建立一种方便快捷的用于ESBL分子诊断及其流行病学监测的新方法.方法 利用PCR技术从肺炎克雷伯菌临床分离株中扩增出TEM型质粒的编码序列,扩增产物运用DHPLC技术进行分析,分析提示,异常的样本通过测序确定其基因突变的类型,最后通过比对确定其基因型.结果 共分析了101例肺炎克雷伯菌临床分离株,全部样本均扩增出TEM型质粒的编码序列,经过DHPLC分析,52例（51.4%）样本表现为单一的洗脱峰,其形态与TEM-1标准菌株的峰型相一致,测序确定它们的碱基序列亦相一致,不存在变异,为TEM-1型;49例（48.6%）样本表现为异常的洗脱峰,它们均为双峰,形态一致,但异源双链峰的高度有差异,测序结果表明它们均存在四种相同的基因突变,在NCBI网站比对后确定为TEM-116;测序结果还提示,部分样本中TEM-1和TEM-116混合存在,其比例的不同表现为DHPLC时异源双链峰高度的差异;文献检索表明,本次确定的TEM-116为一新的基因亚型,为国内首次报道.结论 DHPLC具有简便快捷、高通量和自动化的特点,重复性好,不仅可对已知突变作出即时诊断,还可发现新的基因亚型,不失为一种较好的ESBL分子诊断方法及其流行病学监测手段.     

老年住院患者泌尿道感染病原菌分布与药敏结果分析

目的了解老年住院患者泌尿系感染病原菌的分布与药物敏感情况,为临床用药提供可靠的科学依据.方法对126例住院老年患者的尿液标本培养,并按照NCCLS标准用KB法测定临床常用的10种药物的敏感性.结果 126例标本中,有69例分离出细菌75株,阳性分离率为54.8%;其中4例标本同时检出2种微生物、1例标本同时分离出3种微生物;混合感染率占感染总数的7.3%;在分离出的细菌中,革兰氏阴性杆菌属占68.0%,其中以大肠埃希菌的分离率最高,占68.6%,其他依次为克雷伯氏菌属和假单胞菌属,肠细菌属分离率最低.革兰氏阳性菌属分离率占32.0%,以葡萄球菌属为主,其次酵母样菌属.除酵母样菌属外,其它细菌对10种临床常用的抗生素敏感率较高的是亚胺硫霉素,其次是氨基糖苷类;革兰氏阳性菌(葡萄球菌属)对万古霉素的敏感率为100%,其他依次是庆大霉素,但亚胺硫霉素的敏感率只有66.7%.结论老年住院患者泌尿系感染的病原菌以革兰氏阴性杆菌为主,对亚胺硫霉素有较高的敏感性,其次是氨基糖苷类药物.葡萄球菌则对万古霉素敏感.     

噬菌体治疗实验性小鼠耐亚胺培南铜绿假单胞菌感染的研究

目的探讨噬菌体治疗耐药性铜绿假单胞菌感染的疗效.方法以BALB/c小鼠为实验动物,建立耐药性铜绿假单胞菌全身感染模型,应用体外试验所筛选的宽噬噬菌体进行治疗.结果噬菌体在感染复数（multiple of infection,MOI）≥0.01时能有效杀灭铜绿假单胞菌,显著提高小鼠生存率.延迟治疗3 h仍有40%的生存率.结论通过对小鼠生存率、噬菌体在体内分布及机体对噬菌体的免疫反应等指标的观察分析,噬菌体制剂简捷高效,对机体正常组织无毒副作用,从而为临床治疗全身或局部铜绿假单胞菌感染提供了新途径.     

银杏叶提取物对血管性痴呆大鼠海马突触素表达的影响

目的：研究银杏叶提取物(EGb761)对血管性痴呆模型大鼠海马突触素表达的影响。方法:以双侧颈总动脉反复夹闭再通同时腹腔注射硝普钠建立血管性痴呆模型大鼠，采用Morris 水迷宫和免疫组化方法分别观察大鼠空间学习记忆能力及海马突触素(SYN)表达情况。结果:模型组大鼠在1月、2月和4月不同时点测得的Morris水迷宫逃避潜伏期(EL)均较假手术组明显延长(P<0.01)，药物组EL均显著短于模型组，但仍长于假手术组(P<0.05或P<0.01)；模型组海马SYN表达弱于假手术组，而药物组海马SYN表达高于模型组(P<0.01)。结论:EGb761增加海马结构SYN表达可能是其改善VD大鼠学习记忆障碍的重要机制。     

中国圆蝇亚科妙蝇属四新种（双翅目：蝇科）

在整理采自中国西部成蝇标本中,发现蝇科圆蝇亚科Mydaeinae妙蝇属Myospila Rondani,1856的4新种:春妙蝇Myospilavernatasp.nov.,黑前股妙蝇Myospila ateripraefemurasp.nov.,似净妙蝇Myospil alautoidessp.nov.,峨眉妙蝇Myospilaemeishanensissp.nov。前3种模式标本存中国科学院上海生命科学研究院植物生理生态研究所;后1种模式标本存军事医学科学院微生物流行病研究所医学昆虫标本馆。     

应用IRS-PCR对金黄色葡萄球菌分型的研究

目的探讨低频限制性位点聚合酶链反应(infrequent-restriction-site PCR，IRS-PCR)在金黄色葡萄球菌(简称金葡菌)基因分型中的应用价值。方法建立本实验室IRS-PCR方法。同时用IRS-PCR和脉冲场凝胶电泳(PFGE)对金葡菌进行基因分型。根据49株社区感染分离菌的分型结果计算辨别力指数(ID)值估计分辨力。对其中30株社区感染菌重复实验一次估计重复性。比较两种基因分型方法的分型率、分辨力、重复性、结果的一致率及操作特点。结果建立IRS-PCR对金葡菌基因分型的方法。70株金葡菌均可被2种方法分型，分型率100％。IRS-PCR分为38个型，21株院内感染菌分为6个型，49株社区感染菌分为32个型，计算ID值为0．981。PFGE分为40个型，21株院内感染菌分为6个型，49株社区感染菌分为34个型，计算ID值为0．983。两种分型方法的重复性均为100％。对院内感染菌，两种方法分型的一致率为100％；对社区感染菌，两种方法分型的一致率为92％(45／49)。与PFGE相比，IRS-PCR更简单、省时、易于操作、不需特殊昂贵仪器。结论IRS-PCR能对金葡菌简易快速可靠分型，适合检验科对临床标本的快速有效分型，是一种有价值的分子流行病学研究工具。     

PCR技术中红细胞裂解法的改进

ＰＣＲ技术于１９８５年问世以来〔１〕，已广泛应用于病原学诊断，其中对弓形虫感染的诊断价值也已得到了肯定〔７〕。因此本实验室亦采用ＰＣＲ法对弓形虫血清学检测阳性的患者进行进一步病原学检测。（结果另见报道）。按照文献提供的方法〔１，２〕，首先对待测标本进...     

补体溶菌试验在霍乱杀弧菌抗体检测中的应用

目的了解不同人群的霍乱杀弧菌抗体水平和对霍乱的免疫状态,并探讨补体溶菌试验检测技术的应用价值。方法采用补体溶菌试验方法检测不同人群杀弧菌抗体水平,并运用统计学方法,对补体溶菌试验与常规分离培养法的检测结果进行分析。结果确诊病人的抗体水平显著高于当地健康人群（P〈0.001）;补体溶菌试验方法与常规分离培养法检测结果差异无统计学意义（P〉0.05）。结论补体溶菌试验法在基层霍乱检测工作中具有一定的应用价值,为霍乱的免疫学和流行病学研究提供了依据。     

孕期四氯二苯对二噁英处理对子鼠颌下腺表皮生长因子和表皮生长因子受体的影响

目的 研究孕期四氯二苯对二噁英(TCDD)处理对子鼠颌下腺表皮生长因子(EGF)和表皮生长因子受体(EGFR)的影响。方法 孕15d大鼠给予TCDD(5μg／kg)灌胃1次，采用免疫组织化学方法，对不同发育阶段的子鼠颌下腺进行了观察。结果 在PND32，PND49d，TCDD组颌下腺EGF和EGFR的免疫反应阳性产物比对照组丰富，有显著性差异。结论 孕期TCDD暴露促进了青春期和青春前期子鼠颌下腺EGF的生成和EGFR的表达。     

互隔交链孢霉提取物对淋巴细胞核仁形成区及细胞增殖周期的影响

本实验应用人类核仁形成区(NORs)选择性银染方法和细胞光度术,观察了互隔交链孢霉两菌株提取物261-B_2-3和C_(12)b_3-2对人淋巴细胞NORs活性的影响以及后者对细胞增殖周期移行的影响。结果显示,应用不同浓度的261-B_2-3和C_(12)b_3-2提取物处理细胞后,细胞携带Ag-NORs的染色体数明显减少,与对照组比较差异极显著(P<0.01)。表明两株提取物能明显抑制淋巴细胞NORs的活性。细胞暴露于不同浓度的C_(12)b_3-2提取物后,G_1%明显增多,S%和G_2+M%显著减少,与对照相比差异极显著(P<0.01)。说明C_(12)b_3-2提取物可能作用于G_1后期或S早期,延缓和阻滞了细胞周期的移行。