棒杆菌属细菌药敏试验方法学评价及对喹诺酮类药物主要耐药机制的研究

目的 筛选适合临床常规使用的检测棒杆菌属药敏试验的方法,分析棒杆菌属的耐药状态,为临床合理使用相关抗菌药物提供依据;探讨gyrA、parC基因的改变与棒杆菌属耐喹诺酮类抗菌药物的关系.方法 采用K-B纸片扩散法、琼脂稀释法、E-test、VITEK-AMS、微量稀释法等5种方法测试纹带棒杆菌及假结核棒杆菌对16种抗菌药物的药物敏感性;PCR扩增检测gyrA和parC基因喹诺酮类耐药决定区相关片段并测序,在GenBank中进行Blast及BlastX分析并观察氨基酸突变点,用NcoI酶进行PCR-RFLP.结果 5种方法在检测万古霉素药物敏感性无差异,K-B纸片扩散法有极重大误差及重大误差,经Bowker检验,差异有统计学意义(P＜0.05);细菌在AST-GP67卡片中未充分生长;37株纹带棒杆菌对环丙沙星和左氧氟沙星的耐药率均为94.6％,30株菌发生双突变(87位Ser突变为phe,91位Asp突变为Ala),5株菌单点突变(87位Ser突变为phe);PCR-RFLP经NcoI酶切后显示,敏感株和耐药株均产生3个条带.结论 棒杆菌属对多种抗菌药物的耐药率较高,对万古霉素全部敏感;VITEK-2 Compact仪器法、K-B纸片扩散法不适用于棒杆菌属药敏试验,E-test、琼脂稀释法可采纳,但红霉素除外;纹带棒杆菌对喹诺酮类抗菌药物的耐药机制主要是gyrA基因突变引起,尤以双突变占优势,纹带棒杆菌不携带parC基因,不编码拓扑异构酶Ⅳ.     

鲍氏不动杆菌耐药与抗菌药物使用强度的相关性分析

目的 评价抗菌药物的使用与抗菌药物对医院感染鲍氏不动杆菌耐药性之间的关系,以期为临床合理使用抗菌药物提供依据.方法 监测2006年1月1日-2010年12月31日阿米卡星等每年的抗菌强度和主要抗菌药物对鲍氏不动杆菌的耐药率.结果 在同期相关分析中,亚胺培南/西司他丁、氨曲南、氨苄西林/舒巴坦的抗菌药物使用强度与鲍氏不动杆菌耐药率的相关系数分别为0.9526、0.9565、0.9866,具有一般相关性(P＜0.05),头孢哌酮/舒巴坦的抗菌药物使用强度与鲍氏不动杆菌耐药率的相关系数为0.9717,具有显著相关性(P＜0.01).结论 合理使用抗菌药物以降低细菌耐药迫在眉睫,应根据半衰期及抗菌药物后效应制定出最佳给药方案,根据药敏试验结果合理选用抗菌药物.     

多药耐药及泛耐药鲍氏不动杆菌中枢感染5例诊治分析

目的 探讨脑室或鞘内注射敏感抗菌药物治疗多药耐药及泛耐药鲍氏不动杆菌中枢感染的疗效,为临床合理用药提供参考.方法 对5例鲍氏不动杆菌中枢感染病例严格按照脑脊液培养及药敏结果选择敏感抗菌药物,通过静脉联合脑室或鞘内给药;结合脑脊液细菌学结果及患者原发疾病选择抗菌药物及给药途径,同时监测患者感染相关指标及头颅CT、MRI等影像学检查;对感染并发脑积水通过脑室外或腰大池引流进行处理.结果 治疗后5例患者中3例脑脊液培养阴性,其中2例治愈,1例因家属放弃治疗带脑积水出院;2例仅多黏菌素敏感患者死亡.结论 早期脑室及鞘内注射敏感抗菌药物是治疗多药耐药鲍氏不动杆菌中枢感染的安全有效方法;脑积水发生率较高,脑室外引流优于腰大池引流,引流需早期进行并保持通畅.     

头孢哌酮/舒巴坦联合米诺环素治疗泛耐药鲍氏不动杆菌血流感染临床观察

目的 探讨头孢哌酮/舒巴坦联合米诺环素治疗泛耐药鲍氏不动杆菌(PDRAB)血流感染的临床疗效,为指导临床合理用药提供参考.方法 收集医院2008年12月-2011年12月使用头孢哌酮/舒巴坦联合米诺环素治疗PDRAB所致血流感染患者临床资料,对其药敏、临床疗效和预后进行回顾性分析.结果 25例血流感染患者使用头孢哌酮/舒巴坦联合米诺环素治疗后临床总有效率80.0％,细菌清除率64.0％,死亡4例,病死率16.0％;生存组患者肾功能逐渐好转,降钙素原下降,面死亡组肾功能、降钙素原升高.结论 PDRAB引起的血流感染,使用头孢哌酮/舒巴坦联合米诺环素具有较好疗效.     

耐药鲍氏不动杆菌获得性耐药基因与可移动遗传元件检测及指标聚类分析

目的 调查一组耐药鲍氏不动杆菌获得性耐药相关基因和可移动遗传元件的关系.方法 收集2010年1月-2010年12月医院ICU患者痰液标本中分离的耐药鲍氏不动杆菌共20株,采用聚合酶链反应(PCR)方法检测获得性耐药基因和可移动遗传元件遗传标记,插入序列与β-内酰胺酶基因(ISaba1与ADC、ISaba1与OXA-23),再对检测结果作指标聚类分析(UPGMA法).结果 20株耐药鲍氏不动杆菌各种基因检测,其中β-内酰胺酶基因TEM和ADC,氨基糖苷类修饰酶基因aac(3)-Ⅰ、ant(3")-Ⅰ,16S rRNA甲基化酶armA基因,抗菌制剂外排泵adeB、qacE△1基因,可移动遗传元件int Ⅰ 1、tnpU、tnp513、IS26、ISaba1及连锁检测ISaba1-ADC基因20株均为阳性;β-内酰胺酶基因OXA-23群,氨基糖苷类修饰酶基因aac(6')-Ⅰ b、aph(3')-Ⅰ及连锁检测ISaba1-OXA-23基因各有10株阳性,阳性率均为50.0％;亚胺培南、美罗培南耐药与敏感菌株各10株,耐药率和敏感率均为50.0％,对其他抗菌药物均耐药;指标聚类分析提示,获得性耐药基因TEM、qacE△1、armA、adeB、aac(3)-Ⅰ、ant(3")-Ⅰ、ADC与可移动遗传元件IS26、ISaba1、tnpU、tnp513、intⅠ 1高度相关,获得性耐药基因aac(6')-Ⅰb、ant(3")-Ⅰ、OXA-23与之也相关联,插入序列与β-内酰胺酶基因(ISaba1与ADC、ISaba1与OXA-23)连锁检测均呈阳性.结论 该组耐药鲍氏不动杆菌获得性耐药基因与可移动遗传元件一定的关联度,菌株携带的获得性耐药基因可能由可移动遗传元件介导,指标聚类分析显示的ISaba1与ADC-60,ISaba1与OXA-23相关联得到了测序验证.     

泛耐药鲍氏不动杆菌39种耐药相关基因的研究

目的 研究痰泛耐药鲍氏不动杆菌(PRBAB) 39种耐药相关基因.方法 应用法国生物梅里埃公司的API鉴定条/PSE5.0药敏条和美国BD公司的Phoenix NMIC/ID-109鉴定/药敏板进行细菌鉴定和药敏试验,应用PCR法检测1株分离于合格痰标本PRBAB临床分离株29种β-内酰胺酶相关基因(bla)、6种氨基糖苷类修饰酶基因(AMEs)、消毒剂/磺胺耐药基因(qacE△1-sul1)、3种整合子基因(intⅠ 1、2、3)等39种耐药相关基因,分析其分布情况.结果 该菌7种耐药相关基因阳性:bla基因(bla TEM、blaADC),AMEs基因[aac(6')-Ⅰb、aac(3)-Ⅰ、ant(3")-Ⅰ、qacE△1-sul1和Ⅰ类整合子基因(intⅠ1)];其他32种基因AMEs基因[aac(6')-Ⅱ、aac(3)-Ⅱ)、ant(2")-Ⅰ)等]均阴性.结论 泛耐药ABA耐药机制为多重机制,主要与7种耐药相关基因(bla TEM、blaADC、aac(6')-Ⅰb、aac(3)-Ⅰ、ant(3")-Ⅰ、qacE△1-sul1和Ⅰ类整合子)有关.     

某院重症医学科2010—2013年鲍曼不动杆菌耐药性监测

目的分析重症医学科2010—2013年鲍曼不动杆菌(AB)的检出率及耐药特征,为临床抗感染治疗提供依据。方法对某院重症医学科2010—2013年AB检出情况、耐药性进行回顾性分析。结果2010—2013年共分离病原菌1 413株,其中AB共556株,占39.35%,每年AB检出率分别是39.45%、41.35%、29.44%、40.53%。AB主要来源于下呼吸道(占75.72%)。药敏试验结果显示耐药率较低的抗菌药物是头孢哌酮/舒巴坦（5.85%）和阿米卡星（17.45%）;2010—2013年多重耐药、泛耐药AB检出率分别从9.63%、3.70%,上升至42.50%、31.88%,差异均有统计学意义（均P＜0.001）。结论AB是重症医学科最常见致病菌,对抗菌药物耐药严重,多重耐药、泛耐药AB检出率逐年增加;加强对AB的耐药性监测,有利于治疗和预防AB感染。     

诃子提取物的抗菌活性研究

目的：考察中药诃子提取物的体外抗菌活性。方法分别用水乙酸乙酯及95％乙醇对诃子粉末进行提取,获得3种提取组分。以二倍稀释法测定3种提取组分对鲍曼不动杆菌大肠埃希菌肺炎克雷伯杆菌和金黄色葡萄球菌的最低抑菌浓度和最低杀菌浓度。采用同样方法考察提取物对临床分离的泛耐药鲍曼不动杆菌的抗菌作用。结果诃子的3种提取组分中水提取组分的抗菌活性最强;3种提取组分对4种致病菌均具有抑制和杀灭作用,对泛耐药鲍曼不动杆菌的作用最强。结论中药诃子提取物具有广泛的抗菌活性,有望用于细菌感染性疾病特别是耐药菌所致感染的治疗。     

探讨ICU鲍曼不动杆菌分布情况及耐药性

目的:探讨ICU鲍曼不动杆菌分布情况及耐药性.方法:选择2014年1月至2015年12月间该院ICU病房住院患者送检各类临床标本564份作为研究对象,对其展开病原菌分离鉴定,并对分离出的鲍曼不动杆菌展开药敏试验,统计分析试验结果.结果:本次研究中,在564份临床标本中,共计分离鲍曼不动杆菌102株,多重耐药菌株占93.14%,鲍曼不动杆菌药敏试验结果显示,对临床常用抗生素均具有较广的耐药性,对头孢唑林、氨苄西林耐药率高达100%.结论:临床ICU鲍曼不动杆菌感染多为多重耐药菌所致,耐药性较强,临床应对其给予足够的重视,及时开展药敏试验,依据试验结果合理选择抗菌药物,改善抗菌治疗效果,降低耐药率.     

天麻种子抗抑郁作用研究

目的对天麻种子的抗抑郁作用进行研究,为其开发利用提供依据。方法将小鼠随机分为空白对照组、模型组、盐酸氟西汀组及天麻种子高、中、低剂量组,连续灌胃给药28 d。通过小鼠强迫游泳和悬尾抑郁模型,观察小鼠4 min内游泳不动时间和悬尾不动时间;在悬尾实验结束24 h后,每只小鼠首先进行5 min悬尾实验再进行5 min强迫游泳实验。30 min后摘眼球取血,测定小鼠血清中促肾上腺皮质激素释放激素(CRH)、肾上腺皮质激素(ACTH)、皮质酮(CORT)含量。结果与模型组比较,各给药组小鼠强迫游泳不动时间和悬尾不动时间均显著减少(P0.05,P0.01);与模型组比较,天麻种子组均可降低小鼠血清中CRH、ACTH和CORT含量,天麻种子高、中剂量组效果显著(P0.05,P0.01),并且天麻种子高剂量组小鼠血清激素水平接近盐酸氟西汀组。结论天麻种子具有抗抑郁作用,其作用机制可能与调节HPA轴激素水平有关。