灌注固定和浸润固定制作肾纤维化模型积水肾标本效果比较

目的 比较灌注固定和浸润固定制作肾纤维化模型积水肾标本的效果.方法 单侧输尿管结扎法成功制作小鼠肾纤维化模型后,分别采用灌注固定及浸润固定制作肾标本,HE染色观察肾组织病理学改变.结果与结论 浸润固定法制作的肾脏标本组织器官的结构更加清晰,能较好地显示早期肾纤维化的病理改变,是值得推广的动物实验技术.     

犬急性心肌梗死早期冠状动脉旁路移植术对左室壁运动的影响

目的 探讨犬急性心肌梗死早期冠状动脉旁路移植术对室壁运动的影响及其在唤醒冬眠心肌中的意义.方法 结扎犬冠状动脉前降支制备心肌梗死模型(30只).按手术日期随机分组,分别在心肌梗死后1、2、4、6周行冠状动脉旁路移植术作为实验组,其中第2周4只,其余每组6只;对每个实验组分别设立心肌梗死对照组(不进行冠状动脉旁路移植术),每组2只.实验组在冠状动脉旁路移植术前及冠状动脉旁路移植术8周后开胸利用多巴酚丁胺超声负荷试验结合组织多普勒成像技术标记冬眠心肌,并测定室壁运动记分;对照组在相同时间点同样的方法标记冬眠心肌并测定室壁运动记分.每只犬处死后分别测定心肌梗死面积.结果 每个实验组各存活4只,对照组均存活.1、2周实验组较4、6周实验组及对照组梗死区心肌室壁运动记分的变化明显减小(0.03±0.06,0.05 ±0.09,0.23 ±0.08,0.27±0.06,0.32 ±0.05,P＜0.05),所有实验组较对照组心肌室壁运动记分的变化明显减小(1.195±0.09,1.25±0.18,1.30±0.18,1.36 ±0.11,1.65 ±0.17,P＜0.05),所有实验组较对照组唤醒更多的冬眠心肌(0.27 ±0.12,0.22±0.04,0.31±0.09,0.23±0.03,0.03 ±0.04,P＜0.05).1、2周实验组较4、6周实验组及对照组心肌梗死范围明显减小[(20.75±2.63)％,(21.25±2.5)％,(27.25±1.71)％,(27.75±2.22)％,(26.50±0.71)％,(29.00±1.41)％,(27.00±1.41)％,(28.50±0.71)％,P＜0.05)].结论 犬急性心肌梗死早期冠状动脉旁路移植可以明显改善心肌室壁运动,唤醒更多的冬眠心肌,尤其2周内行冠状动脉旁路移植术可以最大限度地减少梗死心肌对室壁运动的影响,并可以减少心肌梗死范围.     

不同浓度木瓜蛋白酶建立兔膝骨关节炎模型的比较研究

目的:比较不同浓度木瓜蛋白酶建立的兔膝骨关节炎模型,为研究骨关节炎病理及诊疗方法提供数据支持。方法:将60只新西兰大耳白兔随机分为4组,分别在1、3、5d右膝关节腔注射2%(低剂量组)、5%(中剂量组)、10%(高剂量组)(w/v)木瓜蛋白酶和0.03mol/L的L-半胱氨酸混合溶液0.1ml/kg(实验组),以及等量生理盐水(对照组)。整个实验过程观察兔状态并记录体重和膝关节宽度。首次注射后第2、4、6周将兔分批处死,取股骨髁、胫骨平台及滑膜做大体及组织病理学观察,并进行评分。结果:实验组均出现关节宽度增大、关节软骨变薄、基质分解破坏、滑膜增生等炎症及退行性改变,严重程度随浓度增高而增高,也随时间延长而发展;对照组无上述改变,二者比较差异有统计学意义。结论:兔膝骨关节腔注射2%、5%、10%木瓜蛋白酶和0.03mol/LL-半胱氨酸混合溶液0.1ml/kg可制备不同严重程度的骨关节炎模型,周期短,可重复且成功率高。     

Effect of estrogen on regression of vascular calcification in rats

Objective To investigate the effect of estrogen on regression of vascular calcification in rats induced by vitamin D3 plus nicotine. Methods Ninety?six female SD rats were divided randomly into control group (n=24) and calcification group (n=72). Vascular calcification of 72 rats was induced by vitamin D3 and nicotine (VDN). On the day 1, the VDN group rats were injected with vitamin D3(300 000 U/kg, i.m), and were intragastric administrated with nicotine (25 mg/kg), after 9 hours, another dosage of nicotine was given again. After 4 weeks, the VDN group rats were subdivided randomly into 4 groups: VDN group(n=16), Sham operation group (n=16), ovariotomy group (n=16), estrogen group(after ovariotomy, 17β ?estrogen was subcutaneously injected, 50 μg•kg-1•d-1, n=16). Results After 4 weeks,the VDN group showed obvious vascular calcification, and calcium content of the vessel wall was significantly higher than that of control group (P<0.01). Extensive calcification was witnessed on the aortic tunica media of the VDN group. After 12 and 8 weeks, the calcium content of the vessel wall in each subdivided groups was significantly lower than that at 4 weeks point(P<0.01), and the lowest calcinm content was in estrogen group, meanwhile the reduction of previously accumulated arterial calcium precipitate in each group was different. Conclusions It is a reversible process that vascular calcification induced by vitamin D plus nicotine in rats. Estrogen can promote the regression of vascular calcification.     

超声电子膀胱软镜在泌尿系疾病诊疗中的动物模型研究

目的 探讨超声电子膀胱软镜应用于泌尿系疾病诊疗的可行性. 方法 采用1 ～2岁雌性巴马香猪4只为实验模型,以超声支气管镜为雏形,通过B超模式观察不同膀胱充盈量下膀胱各层结构声像图,通过彩色多普勒超声模式观察膀胱周围重要血管的声像图,初步总结超声电子膀胱软镜的操作技巧和难点.采用专用一次性抽吸式活检针进行内镜超声引导下分层定位穿刺活检,活检组织送病理以验证超声分层定位的准确性,探讨超声电子膀胱软镜下穿刺的有效性和安全性. 结果 超声膀胱镜可同步显示内镜图像和超声图像.香猪膀胱充盈90 ml时,超声内镜下膀胱壁黏膜及黏膜下层、肌层、浆膜层层次清晰可辨并有助于穿刺针的分层定位,多普勒超声模式下,膀胱周围血管血流信号明显,超声引导穿刺可避免发生血管及周嗣脏器误伤.16处穿刺点送检组织病理结果与超声分层定位吻合. 结论 超声电子膀胱软镜诊断治疗泌尿系疾病安全可行,配套器械有待进一步改进.     

Kissing式胰肠吻合的动物实验研究

目的 通过动物实验探索Kissing式胰肠吻合的可行性和安全性,明确胰管、黏膜愈合的病理过程.方法 通过测定胰肠吻合后吻合口耐受压,求证该吻合的严密性;通过吻合后不同时间的手术探查、胰肠管造影和病理学检查证实吻合后胰腺残端与空肠黏膜之间愈合情况和病理演变过程.结果 所有实验犬均顺利完成胰肠吻合术,耐受压测定均在90 cm H2O以上,各时间段处死的实验犬均见吻合口紧密,无出血、瘘口,造影见胰管与肠腔连续,充盈良好,未见造影剂外渗现象.病理切片提示4周后胰管与空肠黏膜间形成瘢痕愈合,连接紧密.结论 Kissing胰肠吻合简便,易推广,胰管、空肠黏膜间可形成严密瘢痕愈合,未见积液或脓腔等,具有临床应用价值.     

大鼠原位肝移植制作过程中常见失败原因分析及处理策略

目的：分析大鼠位肝移植制作过程中常见失败原因及总结相应的处理策略。
方法：历时10个月,采用改良Kamada二袖套法制作大鼠原位肝移植模型150例。将每完成50例作为1个实验阶段,分早、中、后期3个阶段对失败原因进行分析,总结经验。
结果：大鼠原位肝移植常见失败原因在早期阶段主要以气胸（5.8%）,术中出血（10.6%）,无肝期过长（50.4%）为主;中、后期主要以肝上下腔静脉吻合失败（21.0%）,无肝期过长（20.6%）,门静脉及肝下下腔静脉袖套吻合失败（17.6%）,胆管重建失败（5.6%）为主。
结论：导致大鼠原位肝移植模型制作失败的原因较多,无肝期是影响成功与否的关键,及时地对失败原因进行分析总结并寻找合理的解决办法,有助于初学者熟练地掌握该技术。     

经典骨质疏松症模型大鼠的肾虚证研究

目的:观察采用双侧卵巢切除术制备的骨质疏松症模型大鼠的一般情况、生理状态,脏器湿重及血清学指标,以验证绝经后骨质疏松模型大鼠的肾虚证表现,为中医药临床防治骨质疏松症采用补肾治本的原则提供一定的理论基础。方法:24只雌性SD大鼠分为3组:模型组、假手术组和正常组。模型组麻醉后行双侧卵巢切除术,假手术组麻醉后行假手术处理,正常组进行麻醉处理。饲养3个月进行股骨的病理组织观察及骨密度检测,确认造模成功后进行大鼠的一般情况观察及生理状态的量化检测。麻醉下处死大鼠,用电子天平称垂体、肾、肾上腺和子宫的湿重,采用ELISA法进行ACTH、E2、T3、T4的血清学检测。结果:骨质疏松模型组大鼠出现体毛稀疏无光泽、畏寒倦卧、群聚角落、精神萎靡、眼睛黯淡、眼球运动慢、反应迟钝、活动迟缓、食欲下降、身体肥胖、嗜睡、大便略稀、小便清长等一系列肾虚证的表现;活动度、肛温及进食量均低于假手术组与正常组;血清ACTH、E2、T3、T4水平均低于假手术组与正常组;肾上腺、肾、子宫的湿重均低于假手术组与正常组。结论:采用经典的骨质疏松症造模方法即双侧卵巢切除术制备的骨质疏松症模型大鼠具有肾虚的器质性及功能性变化表现,骨质疏松症模型大鼠存在肾虚病机,具有肾虚的临床表现。     

联合肝脏分割和门静脉结扎二步肝切除术大鼠模型的建立

目的:建立联合肝脏分割和门静脉结扎(PVL)二步肝切除术(ALPPS)大鼠模型。方法:将健康60只SD雄性大鼠随机均分为PVL组、ALPPS组、假手术组。PVL组行肝左外叶、左中叶、右叶门静脉分支结扎及尾状叶切除,保留肝右中叶分支;ALPPS组在PVL组手术的基础上,将肝左中叶与右中叶在缺血带处离断;假手术组仅游离出门静脉各分支,不结扎。检测大鼠术后肝再生率(HRR)、肝功能情况,以及肝左中叶病理损伤程度与肝右中叶Ki-67的表达。结果:与假手术组比较,ALPPS组、PVL组术后各时间点肝右中叶HRR均明显升高(均P0.05),且第4、7天ALPPS组肝右中叶HRR明显高于PVL组(155.96%vs.118.15%;174.86%vs.133.55%,均P0.05)。PVL组术后早期肝功能指标好于ALPPS组(均P0.05),但后期无统计学差异(均P0.05)。组织病理学检查显示,ALPPS组术后第1天肝左中叶坏死明显多于PVL组;ALPPS组肝右中叶Ki-67表达第2、4天明显高于PVL组(85.36%vs.61.84%;43.40%vs.29.06%,均P0.05)。结论:ALPPS与PVL均能促进肝再生,并且ALPPS比PVL能更快的促进肝再生;成功建立大鼠ALPPS模型,为研究ALPPS肝再生机制及相关并发症奠定了基础。     

通气侧肺吸入伊洛前列素对肺动脉压和缺氧性肺血管收缩的影响

目的 探讨雾化吸入伊洛前列素对大鼠单肺通气(one-lung ventilation,OLV)期间肺动脉压和缺氧性肺血管收缩(hypoxic pulmonary vasoconstriction,HPV)的影响。方法 雄性SD大鼠30只,随机分为A、B、C三组,每组10只。原位离体肺灌注模型建立后,调整气管导管深度致左侧肺OLV,FiO_2为100%,打开连接于呼吸回路的雾化器,A组吸入生理盐水,B组吸入伊洛前列素0.05μg·kg-1·min-1,C组吸入伊洛前列素0.1μg·kg~(-1)·min~(-1),记录灌注10min(T_1)、雾化吸入10min(T_2)和OLV 1h(T_3)的平均肺动脉压(MPAP)及左心房引流液氧分压(PaO_2)。通过测量T_1、T_2和T_3时的左心房引流液PaO_2计算氧合指数(oxygenation index,OI)。实验结束分别取双侧肺组织进行电镜检查。结果 与T_1时比较,T_2、T_3时三组MPAP明显升高(P0.05);T_2、T_3时B、C组MPAP明显低于A组(P0.05),且C组MPAP明显低于B组(P0.05)。与T_1时比较,T_2、T_3时三组OI明显降低(P0.05);T_2、T_3时C组OI明显高于B组(P0.05)。相对于B、C组通气侧,A组通气侧与A、B、C组非通气侧Ⅱ型肺泡上皮细胞核膜外突内陷,部分板层小体排空。结论 在大鼠原位肺灌注模型中,单肺通气期间雾化吸入伊洛前列素能明显降低平均肺动脉压,减少肺内分流并增加氧合。