黑乳海参中两个新的四环三萜化合物

目的：研究黑乳海参体内的化学成分.方法：应用多种色谱技术对黑乳海参体内的化学成分进行分离纯化,根据化合物的理化性质和波谱数据鉴定其结构.结果：分离得到了2个三萜皂苷元类化合物,应用化学方法和各种光谱方法鉴定其结构为：3β,17α-二羟基-7,9-二烯-海参烷;3β,17α-二羟基-9,22-二烯-海参烷.结论：2个化合物均为新化合物.命名为黑乳参皂苷元A和B.是我国学者首次从海参中分离得到的三萜皂苷元类化合物.     

p53和VEGF蛋白表达与胆囊癌的关系

目的探讨抑癌基因p53和血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)与胆囊癌的关系。方法采用免疫组化方法分别检测50例胆囊癌、35例胆囊腺瘤和26例慢性胆囊炎组织中p53和VEGF蛋白表达。结果胆囊癌组织中p53和VEGF的阳性表达率分别为64.0%和72.0%,明显高于胆囊腺瘤的17.1%和22.9%及慢性胆囊炎的19.2%和23.1%,χ2=4.25,P=0.006,根据Nevin分期,胆囊癌S1、S2、S3期的p53阳性表达率为63.2%,明显高于S4、S5期的35.5%,χ2=7.29,P=0.009,而VEGF在胆囊癌S4、S5期的阳性表达率为87.1%,明显高于S1、S2、S3期的47.4%,χ2=4.29,P=0.007,胆囊癌中p53和VEGF的阳性表达明显相关,r=0.87,P=0.009。它们与胆囊癌病理分级均未发现明显相关性。结论p53和VEGF的过度表达可能对胆囊癌的发生、发展及预后判断有一定作用。     

人参单体Rh2诱导人肺腺癌A549/DDP细胞凋亡的体外研究

背景与目的肺癌已成为人类癌症主要死亡原因之一.从植物中开发抗肿瘤药物是国内外抗肿瘤新药开发的一个热点.本研究的目的是观察人参单体Rh2诱导人肺腺癌A549/DDP细胞系凋亡的作用,并探讨其可能的分子机制.方法体外培养的人肺腺癌A549/DDP细胞经不同浓度梯度的人参单体Rh2干预,分别应用MTT实验观察其对细胞增殖的影响,用流式细胞术检测细胞周期、凋亡指数及相关基因表达的改变,以及用双抗体夹心ELISA法测定细胞上清液sApo-1/Fas浓度变化.结果①人参单体Rh2可抑制A549/DDP细胞的生长,并呈剂量、时间依赖作用.②人参单体Rh2处理A549/DDP细胞24 h,实验组凋亡指数显著高于对照组(P＜0.001),G0/G1期细胞比例显著高于对照组(P＜0.01),S期细胞比例显著低于对照组(P＜0.01),G2/M期细胞比例与对照组比较无显著性差异(P＞0.05).③实验组p53、Fas阳性表达率显著高于对照组(P＜0.01,P＜0.001),Bcl-2阳性表达率显著低于对照组(P＜0.001).④实验组A549/DDP细胞培养上清液于不同时间sApo-1/Fas含量均显著低于对照组(P＜0.05).结论人参单体Rh2具有诱导人肺腺癌A549/DDP细胞凋亡的作用,其分子机制可能是上调p53和Fas及下调Bcl-2的表达、通过Fas/FasL系统途径诱导细胞凋亡.     

三种蒽环类抗肿瘤药物对K562/A02细胞体外抑制作用

目的:比较表阿霉素,柔红霉素和吡喃阿霉素对多药耐药细胞株K562/A02体外增殖的抑制作用.方法:利用MTT观察7.5～60μg/ml的表阿霉素或柔红霉素或吡喃阿霉素处理K562/A02细胞后细胞增殖的变化.结果:吡喃阿霉素剂量逐渐增大时,抑制率逐渐增强(P＜0.05).吡喃阿霉素组对K562/A02细胞的抑制率较相同剂量表阿霉素组或柔红霉素组抑制率显著增加(P＜0.01).结论:相同剂量的吡喃阿霉素较表阿霉素或柔红霉素有更强的抑制多药耐药细胞株K562/A02细胞的作用.     

维生素E琥珀酸酯诱导耐药白血病K562/ADM细胞凋亡的研究

目的:研究维生素E 琥珀酸酯(vitamin E succinate , VES)对多药耐药白血病K562/ADM细胞的诱导凋亡作用及分子机制。方法: 以体外培养的K562/ADM细胞为研究对象,采用噻唑蓝(methyl thiazolyl tetrazolium, MTT) 比色法检测细胞增殖活性, Wright Giemsa染色、DNA凝胶电泳和流式细胞术(flowcytometry, FCM)检测细胞凋亡;FCM测定细胞Fas、Bcl-2 和p53 蛋白表达水平。结果:VES可显著抑制K562/ADM细胞的生长及增殖,P= 0 .004。光镜下可见K562/ADM细胞呈典型凋亡的形态学改变。DNA凝胶电泳显示典型的凋亡DNA梯形条带。FCM细胞周期分析显示,G1 期阻滞,亚G1 期细胞比例增高,P=0 .005;Fas蛋白表达明显上调,P=0. 002;Bcl -2蛋白表达下调,P=0. 000;p53蛋白表达无明显变化。结论:VES可诱导K562/ADM细胞凋亡,作用机制可能与其上调Fas表达和下调Bcl 2表达有关。     

大鼠模拟经前期综合征肝气逆证不同脑区5-HT1A受体基因表达mRNA水平变化

本文以大鼠模拟经前期综合征（PMS）肝失疏泄所导致的始发证候肝气逆证为切入点,运用现代分子生物学技术,对肝失疏泄产生肝气逆证时的主要改变指标五羟色胺（5-HT1A）受体基因表达在中枢不同脑区（下丘脑、边缘叶）mRNA水平上的变化进行了探讨。结果显示,在肝失疏泄产生肝气逆证时中枢神经系统中5-HT1A受体的基因表达在mRNA水平均受到一定的抑制,即在肝失疏泄产生肝气逆证时5-HT1A受体的活性明显下降,且下丘脑中5-HT1A受体的活性要比边缘叶中5—HT1A受体的活性下降得显著。     

血清CA125、CA153、CA242三种肿瘤标志物联合检测对肺癌诊断的价值

目的探讨CA125、CA153、CA242联合检测在肺癌筛查与临床诊断中的应用价值.方法采用CanAg诊断试剂盒,对56例肺癌患者及108例健康人血清进行CA125、CA153、CA242测定.结果肺癌患者组CA125、CA153、CA242值分别为54.97±95.70,36.02±40.38,14.38±21.99;阳性率分别为41.07%、44.64%、23.21%.健康人组CA125、CA153、CA242值分别为11.23±1.58,12.73±11.92,15.11±13.60,阳性率均为0%,肺癌患者组CA125、CA153值明显高于健康人组(P＜0.01),肺癌患者组中CA125、CA153阳性率明显高于CA242(P＜0.05),CA125、CA153联合检测阳性率明显大于单独检测(P＜0.05)、Ⅰ-Ⅱ期肺癌患者与Ⅲ、Ⅳ期肺癌患者CA125、CA153值相比有显著性差异(P＜0.05).结论 CA125、CA153联合检测对肺癌筛查与临床诊断有良好辅助价值,CA242测定对肺癌筛查与临床诊断价值不大.     

以Lipid A为靶点拮抗内毒素中药的筛选

目的利用生物传感器跟踪技术从抗炎中药中筛选出具有拮抗内毒素的中药,为进一步对中药拮抗内毒素活性成分的分离纯化提供实验依据。方法将革兰阴性细菌的脂质A(Lipid A)包被于生物传感器的非衍生板建立靶点,跟踪测定赤芍、大黄、黄芩等78种中药的水提物和醇提物与Lipid A的结合活性,再将筛选出的中药去鞣质后与定量的内毒素(LPS,20、50ng·ml-1)37℃孵育30min后,测定孵育后的样品与Lipid A的结合情况,以评价样品内的活性物质含量。结果在所筛选的78种中药中有12种中药的水提物与Lipid A具有较高的亲和活性,在这12种中药中有6种中药的醇提物与Lipid A也具有较高的亲和活性;通过对所筛选出的12种中药的水提物去除鞣质后与LPS的消耗实验,发现所筛选出的12种中药均含有除鞣质以外的与lipid A具有特异性结合的物质,并且12种中药中能与Lipid A发生特异性结合作用的活性物质含量存在较大的差异。结论生物传感器跟踪技术是一种快速、准确、有效的筛选平台,筛选出的12种中药均含有非鞣质类能与lipid A发生特异性结合作用的物质,为进一步对12种中药抗内毒素有效部位或单体的分离提供了重要的实验依据。     

Glucan在Con A所致免疫性肝损伤中的作用

目的观察Glucan对刀豆蛋白A(ConA)所致小鼠免疫性肝损伤的干预效果及其作用机制。方法ConA尾静脉注射制备小鼠免疫性肝损伤模型,在ConA注射前1h腹腔注射Glucan,观察正常对照组、ConA损伤组、Glucan/ConA组肝损伤的情况,检测血清谷丙转氨酶(ALT)、α肿瘤坏死因子(TNF-α)及组织中一氧化氮(NO)含量的变化,并用DNAladder检测肝细胞凋亡的变化。结果ConA尾静脉注射后,出现明显的肝损伤,血清ALT、TNF-α及组织中NO水平明显升高,DNAladder检测可见明显的梯状条带;预先应用Glucan后,可减轻这些改变。结论Glu-can对ConA所致小鼠免疫性肝损伤有保护作用。     

细胞色素氧化酶CYP3A4基因突变与表型研究进展

细胞色素P4503A4在许多内源性及外源性化合物的氧化及还原代谢中起关键作用，对CYP3A4基因表达的研究具有重要意义。本文对CYP3A4基因突变及其表型特征加以总结。