微管相关蛋白2在胰腺神经内分泌肿瘤组织中的表达及预后意义

  目的   探索微管相关蛋白2（microtubule-associated protein 2,MAP2）与微管相关蛋白1B（microtubule-associated protein 1B,MAP1B）在预测胰腺神经内分泌肿瘤（pancreatic neuroendocrine tumors,PNETs）患者预后中的意义。   方法   收集1999年12月至2016年12月来自于北京协和医院、中山大学附属第一医院、复旦大学上海癌症中心和Cedars-Sinai医学中心（洛杉矶）193例患者的193个原发肿瘤标本。免疫组织化学染色法分别检测193例、120例PNETs组织中MAP2、MAP1B的表达,随后分析蛋白表达与患者临床病理特征及预后的关系。   结果   MAP2和MAP1B在PNETs患者中的阳性率分别为45.6%（88/193）和64.2%（77/120）。MAP2表达阳性的患者的总生存好于阴性患者（P=0.012）。另外,MAP2阳性Ⅱ、Ⅲ期患者的总生存也优于阴性者（P=0.017）。然而,MAP1B的表达与肿瘤大小、转移、肿瘤组织学分级、临床分期、总生存、无病生存均无相关性（P > 0.05）。   结论   MAP2为潜在的预测PNETs患者预后的指标。      

增殖细胞核抗原和p53蛋白在胆囊癌中的表达

本文应用PCNA和p53抑癌基因蛋白的免疫络化方法，对11例胆囊上皮良性病变和33例胆囊癌进行了研究，结果发现胆囊良性病变和胆囊癌的平均PCNA指数分别为：良性病变为24．1％（n＝11．x±24．6），高分化癌为48．0％（n＝13，x±12．8），中分化癌为49．5％（n＝11，x±15．4）．低分化癌为76．4％（n＝9，x±18．1）；高分化胆囊癌平均PCNA指数明显高于良性病变（P＜0．05）；低分化癌的平均PCNA指数明显高于高分化癌（P＜0．05）；11例胆囊上皮良性病变均无p53蛋白阳性表达；33例胆囊癌p53阳性表达12例（36．4％），高分化癌p53阳性率为15．4％（2／13）．中分化癌45．5％（5／11）．低分化癌55．6％（5／9）：各组阳性率比较无显著性差异（P＞0．05）；PCNA指数≥50％的胆囊癌其p53蛋白阳性率明显高于PCNA指数＜50％的胆囊癌（P＜0．05）。结果提示：PCNA指数与胆囊癌的分化程度有关．PCNA及p53蛋白的免疫组化染色对胆囊上皮良、恶性病变的鉴别论断有帮助。本文还就胆囊癌p53蛋白表达与PCNA指数的关系进行了讨论。     

骨髓增生异常综合征bcl-2蛋白表达与细胞凋亡及增殖的关系

目的 :研究骨髓增生异常综合征 (MDS)中 bcl- 2蛋白表达与细胞凋亡及增殖的关系。方法 :以 2 0例 MDS患者、4例急性髓细胞白血病 (AML )患者、4例正常人的骨髓组织为研究对象 ,用免疫组织化学技术 SABC法分别检测 bcl- 2蛋白和增殖细胞核抗原 (PCNA )的表达 ,用 d U TP缺口末端标记 (TU NEL )技术检测细胞凋亡。结果 :MDS、AML、正常人 bcl- 2蛋白表达半定量积分值分别为 2 5 .35± 16 .6 8、6 6 .31± 10 .36、8.2 2± 2 .45 ;MDS、AML与正常对照组凋亡率依次递减 ;AML、MDS与正常对照组 PCNA阳性率依次递减 ;bcl- 2蛋白表达与凋亡负相关 (r=- 0 .6 76 1,P<0 .0 5 )。结论 :bcl- 2蛋白过度表达与细胞凋亡抑制、增殖失控关系密切 ,在 MDS向 AML转化过程中起重要作用     

MDR1启动子/荧光素酶质粒的构建及其在朊蛋白高表达胃癌细胞中的活性检测

目的:构建含MDR1基因启动子的荧光素酶报告基因质粒,并检测其在朊蛋白高表达胃癌细胞系中的活性表达。方法:PCR克隆人MDRl基因启动子片段,通过亚克隆将启动子分别插入到pMD18-T载体和荧光素酶报告基因pGL3-Enhancer载体中,建立含MDR1启动子的荧光素酶报告基因质粒pGL-MDR1,并经测序及酶切确定扩增序列;脂质体基因转染法将pGL-MDR1转染入朊蛋白高表达胃癌细胞系SGC7901-PrP,并测定其荧光素酶活性。结果:PCR克隆出MDR1启动子经DNA测序证实序列正确,pGL-MDR1转染入朊蛋白高表达胃癌细胞系的荧光素酶活性,较转染入pcDNA3.1空载体细胞系相比升高3~5倍。结论:成功构建含MDRl启动子的荧光素酶报告基因质粒;上调朊蛋白表达可激活MDR1的转录活性。     

p70S6K1及4E-BP1蛋白在结直肠癌中的作用

磷脂酰肌醇激酶3-蛋白激酶 B-雷帕霉素靶蛋白（mTOR）信号通路在结直肠癌的发生、发展中发挥重要的作用。mTORC1下游靶点是核糖体 S6蛋白激酶1（p70S6K1）和真核翻译起始因子-4E结合蛋白1（4EBP1）,两者在蛋白质合成中起主要的调节作用。结直肠癌中 p70S6K1及4EBP1的异常表达成为关注的焦点。     

P-糖蛋白和肺耐药蛋白在浸润性乳腺癌中的表达及其临床意义

目的探讨P-糖蛋白(P-gp)和肺耐药蛋白(LRP)在浸润性乳腺癌中的表达情况及其临床意义。方法采用搓网法获取乳腺癌手术切除标本制成的完整单细胞悬液,再用流式细胞技术对40例乳腺癌组织及相应癌旁组织中P-gp、LRP的表达情况进行定量分析。结果乳腺癌组织P-gp、LRP表达与相应癌旁组织比较,差异均有统计学意义(P-gp:t=-7.777,LRP:t=-9.861,P均0.050)。在不同年龄、肿瘤大小、病理类型、临床分期、分化程度和雌、孕激素受体状态的患者间,两种耐药相关蛋白的表达差异均无统计学意义(P0.050)。有淋巴结转移组P-gp表达与无淋巴结转移组比较,差异无统计学意义(t=0.102,P=0.919)。有淋巴结转移组LRP的表达为(41.2±18.5)%,无淋巴结转移组为(30.1±15.4)%,有淋巴结转移组LRP表达显著高于无淋巴结转移组(t=2.074,P=0.045)。乳腺癌组织P-gp与LRP的表达间存在正相关性(r=0.698,P0.001)。结论本研究结果可为寻找浸润性乳腺癌的有效辅助化疗药物提供参考。     

IGF信号通路关键蛋白IGF1、IGF1R和AKT在原发性肺腺癌中的表达及意义

目的检测IGF信号通路关键蛋白IGF1，IGF1R和AKT在原发性肺腺癌中的表达，探讨其与临床病理学特征和生存时间的关系。方法采用免疫组化方法和免疫印迹技术检测IGF1，IGF1R和AKT在31例原发性肺腺癌及12例良性肺病变组织中的表达。结果IGF1、IGF1R和AKT在肺腺癌中的表达率分别为41．9％（13／31）、67．7％（21／31）和51．6％（16／31），显著高于良性肺组织（P值分别为0．0252、0．0016和0．0071）。IGF1和IGF1R及IGF1和AKT在肺腺癌中表达呈显著相关（P值分别为0．0344和0．0179）。晚期肺癌（Ⅲ＋Ⅳ）IGF1和IGF1R表达显著高于早期（Ⅰ＋Ⅱ）（P值分别为0．0109和0．0303）。IGF1、IGF1R和AKT在伴有淋巴结转移肺癌中的表达显著高于无淋巴结转移肺癌（P值分别为0．0468、0．0490和0．0443）。低分化肺癌中IGF1和IGF1R表达显著高于中或高分化肺癌（P值分别为0．0484和0．0291）。IGF1和IGF1R阳性患者的生存时间显著短于阴性者（IGF1：10比14个月，P=0．0103；IGF1R：13比26个月，P=0．0056）。IGF1和IGF1R是肺腺癌预后的影响因素，AKT无预后意义。结论IGF信号通路关键蛋白IGF1、IGF1R和AKT表达在肺腺癌的发生和发展中可能起重要作用，进一步的研究有望展示其在肺癌预后和治疗方面的意义。     

敲降HE4 和PAX8 基因对TC方案治疗上皮性卵巢癌细胞恶性生物学行为的影响

[摘要] 目的：探讨敲降人附睾蛋白4（HE4）和配对盒基因8 抗原（PAX8）基因后对紫杉醇药+铂类药（TC方案）治疗的上皮性卵巢癌OVCAR3 细胞增殖、迁移、侵袭及凋亡的影响。方法：分别设计和合成敲降HE4 和PAX8 的单靶siRNA（HE4-siRNA 或PAX8-siRNA）及双靶siRNA（HE4+PAX8-siRNA）和阴性siRNA 序列,并与质粒载体pGCsi-H1 相连形成重组质粒,分别转染人上皮性卵巢癌OVCAR3 细胞形成HE4-siRNA 组、PAX8-siRNA 组、HE4+PAX8-siRNA 组和siRNA-NC组,同时设立空白对照组（无任何处理）。用TC方案（紫杉醇3.13 μg/ml +卡铂2.82 μg/ml,）分别处理上述5 组细胞后,用MTT法、划痕愈合实验、Transwell 侵袭实验、流式细胞术检测各组细胞的增殖、迁移、侵袭及凋亡能力的变化。结果：敲降HE4 和PAX8 基因后,与siRNA-NC组和空白对照组比较,HE4-siRNA组、PAX8-siRNA 组、HE4+PAX8-siRNA 组卵巢癌OVCAR3 细胞的增殖、迁移和侵袭能力显著降低（均P<0.01）,细胞凋亡率显著升高（P<0.01）,尤以同时敲降HE4 和PAX8 基因的效果更佳。结论: 敲降HE4 和PAX8 基因均可增强TC方案抑制上皮性卵巢癌细胞增殖、迁移及侵袭能力并促进其凋亡,尤以HE4 和PAX8 基因同时敲除的效果更好。     

Basic Investigations EXPRESSION OF GAP JUNCTION PROTEIN Cx43 IN CULTURED HUMAN NORMAL AND MALIGNANT LUNG CELLS

ＢａｓｉｃＩｎｖｅｓｔｉｇａｔｉｏｎｓＥＸＰＲＥＳＳＩＯＮＯＦＧＡＰＪＵＮＣＴＩＯＮＰＲＯＴＥＩＮＣｘ４３ＩＮＣＵＬＴＵＲＥＤＨＵＭＡＮＮＯＲＭＡＬＡＮＤＭＡＬＩＧＮＡＮＴＬＵＮＧＣＥＬＬＳＺｈａｎｇＺｈｉｑｉａｎ；张志谦；ＬｉｎＺｈｏｎｇｘｉａｎｇ...     

周围型肺癌CT征象与p53蛋白及增殖细胞核抗原表达间关系的研究

目的研究周围型肺癌ＣＴ征象与ｐ５３蛋白及增殖细胞核抗原（ＰＣＮＡ）表达间的关系。方法运用ＳＰ免疫组化法,检测３２例经病理证实的周围型肺癌组织中ｐ５３蛋白及ＰＣＮＡ的表达,并回顾性分析其与术前ＣＴ征象间的关系。结果ｐ５３蛋白、ＰＣＮＡ表达与瘤体大小、深分叶征、空洞、胸膜凹陷征、纵隔淋巴结转移有关,与毛刺征无关。结论周围型肺癌ＣＴ征象中,瘤体直径＞３ｃｍ,或出现深分叶征、空洞、胸膜凹陷征、纵隔淋巴结转移者,具有相对更高的恶性程度,肿瘤细胞的增殖更为活跃。