Effect of Soothing Gan (Liver) and Invigorating Pi (Spleen) Recipes on TLR4-p38 MAPK Pathway in Kupffer Cells of Non-alcoholic Steatohepatitis Rats

Objective: To investigate the mechanism of inflammatory-mediated toll-like receptor 4(TLR4)-p38 mitogen-activated protein kinase(p38 MAPK) pathway in Kupffer cells(KCs) of non-alcoholic steatohepatitis(NASH) rats and the intervention effect of soothing Gan(Liver) and invigorating Pi(Spleen) recipes on this pathway. Methods: After 1 week of acclimatization, 120 Sprague-Dawley male rats were randomly divided into 8 groups using a random number table(n=15 per group): normal group, model group, low-dose Chaihu Shugan Powder(柴胡疏肝散, CHSG) group(3.2 g/kg), high-dose CHSG group(9.6 g/kg), low-dose Shenling Baizhu Powder(参苓白术散, SLBZ) group(10 g/kg), high-dose SLBZ(30 g/kg) group, and low-and highdose integrated recipe(L-IR, H-IR) groups. All rats in the model and treatment groups were fed with a high-fat diet(HFD). The treatments were administrated by gastrogavage once daily and lasted for 26 weeks. The liver tissues were detected with hematoxylin-eosin(HE) and oil red O staining. Levels of liver lipids, serum lipids and transaminases were measured. KCs were isolated from the livers of rats to evaluate the mRNA expressions of TLR4 and p38 MAPK by real-time fluorescence quantitative polymerase chain reaction, and proteins expressions of TLR4, p-p38 MAPK and p38 MAPK by Western blot. Levels of inflammatory cytokines including tumor necrosis factor α(TNF-α), interleukin(IL)-1 and IL-6 in KCs were measured by enzyme-linked immunosorbent assay. Results: After 26 weeks of HFD feeding, HE and oil red O staining showed that the NASH model rats successfully reproduced typical pathogenesis and histopathological features. Compared with the normal group, the model group exhibited significant increases in body weight, liver weight, liver index, serum levels of total cholesterol(TC), triglyceride(TG), low-density lipoprotein cholesterol, and aspartate aminotransferase as well as TC and TG levels in liver tissues, and significant decrease in serum level of high-density lipoprotein cholesterol(P0.05 or P0.01), while those indices were significantly ameliorated in the H-IR group(P0.05 or P0.01). Higher levels of TNF-α, IL-1 and IL-6 in KCs were observed in the model group compared with the normal group(P0.01). Significant decreases in TNF-α, IL-1 and IL-6 were observed in the H-SLBZ, H-IR and L-IR groups compared with the model group(P0.05 or P0.01). The m RNA expressions of TLR4 and p38 MAPK and protein expressions of TLR4, p38 MAPK and p-p38 MAPK in KCs in the model group were significantly higher than the normal group(P0.01), while those expression levels in the L-IR and H-IR groups were significantly lower than the model group(P0.05 or P0.01). Conclusions: Inflammation in KCs might play an important role in the pathogenesis of NASH in rats. The data demonstrated the importance of TLR4-p38 MAPK signaling pathway in KCs for the anti-inflammatory effect of soothing Gan and invigorating Pi recipes.     

补肾方药对骨质疏松大鼠骨中LIM矿化蛋白1表达的影响

目的：探讨补肾方药预防糖皮质激素诱导大鼠骨质疏松发生的机理。方法：通过肌肉注射地塞米松造成骨质疏松模型,观察补肾中药对骨密度的影响,从骨骼中提取mRNA,采用RT-PCR方法对LIM矿化蛋白（LMP-1）进行半定量。结果：病理组大鼠的骨密度及骨骼中LMP-1的表达明显降低（P＜0.05),而补肾方药组的骨密度及LMP-1的表达明显高于地塞米松组（P＜0.05)。结论：地塞米松抑制LMP-1在骨骼的表达,而补肾方药可通过提高LMP-1在骨的表达而预防骨质疏松的发生。     

补肾方剂拮抗地塞米松促骨髓基质细胞向成脂细胞分化的实验研究

目的观察补肾方剂对地塞米松促骨髓基质干细胞成脂作用的影响。方法从成年SD大鼠分离出骨髓基质干细胞体外培养,取第三代细胞用于实验。分别在培养液其中加入1×10^-7mol·L^-1的地塞米松（A组）、1×10^-7mol·L^-1的地塞米松和80mg·L^-1的补肾方剂（B组）,C组为对照组。分别应用MTT、碱性磷酸酶活性与三酰甘油含量法检测MSCs增殖与分别向成骨和成脂方向分化的能力。结果实验组（A组和B组）的MSCs增殖能力较对照组明显降低（P〈0.05）,但A组与B组之间差异无显著意义（P〉0.05）;B组MSCs硷性磷酸酶活性较A组增高（P〈0.05）,而三酰甘油含量低于A组（P〈0.05）。结论补肾方剂不能干预地塞米松对MSCs增殖的抑制作用,但具有抑制地塞米松促进MSCs向成脂方向分化的作用。     

纳米钙补肾中药对骨质疏松症大鼠肠黏膜中 1，25(OH)2D3受体的mRNA和蛋白表达影响

目的研究骨质疏松症大鼠肠黏膜中维生素1,25(OH)2D3受体的mRNA和蛋白表达,揭示骨质疏松症的发病机制;同时,阐述纳米钙补肾中药的调节作用机制。方法切除大鼠双侧卵巢的方法复制骨质疏松症模型,采用纳米钙组及具有益肾填精、补钙壮骨作用的纳米钙补肾中药(大、中、小)剂量对实验大鼠治疗12周,以骨疏康颗粒剂、雌二醇(E2)及钙尔奇D600作为阳性对照组,正常大鼠和模型空白组为空白对照组;用PCR法、Western印迹法检测骨质疏松症大鼠肠黏膜中维生素1,25(OH)2D3受体的mRNA和蛋白表达。结果RT-PCR及Western方法检测,正常大鼠肠黏膜中含有维生素1,25(OH)2D3受体的mRNA和蛋白表达;模型空白组大鼠肠黏膜组织中的mRNA和蛋白表达水平有明显的下降。纳米钙、纳米钙补肾中药各剂量组、钙尔奇D600组、骨疏康和雌二醇E2组用药后12周,与模型空白组比较,可不同程度上调肠黏膜组织中的mRNA和蛋白表达水平。但其中各治疗用药组的效果有所不同,一般表现为纳米钙补肾中药剂量组作用较好。结论①正常大鼠肠黏膜组织可以在基因、蛋白水平表达维生素1,25(OH)2D3受体,而且在肠钙吸收中可能起到重要作用。②大鼠骨质疏松症的发生,与肠黏膜组织中维生素1,25(OH)2D3受体的mRNA和蛋白表达的变化有关,从而影响肠钙的吸收。③纳米钙补肾中药通过调控大鼠肠黏膜维生素1,25(OH)2D3受体的mRNA和蛋白表达,促进肠钙的吸收,对于骨质疏松症有一定的防治作用。     

匡继林教授治疗多囊卵巢综合征的辨治思路

匡继林教授基于多囊卵巢综合征(polycystic ovarian syndrome,PCOS)的发病病因病机,治疗PCOS遵循辨病为先、明确诊断,根据月经周期4个时期的不同生理特点及患者体质进行“辨疾病-辨时期-辨体质”的临床三维辨治.提出以“调肾本、和肝脾、益气血、行冲任、养胞宫、促进卵泡发育与排卵,进而恢复正常月经”的PCOS治疗大法,辨病辨证相结合、因时制宜、因人制宜,临床疗效显著.     

毒邪理论在恶性肿瘤治疗中的应用

毒邪是恶性肿瘤的主要病因,恶性肿瘤所产生的内源性毒邪是肿瘤进展和转移的中心环节。因此,解毒抗癌是恶性肿瘤的主要治疗方法。具体分为清热解毒、健脾解毒和活血解毒三类,其中清热解毒法用于治疗毒热内结证,健脾解毒法用于治疗正虚毒盛证,活血解毒法用于治疗毒瘀内阻证。临床上应根据患者证型的不同,选择相应的治疗方法。     

裘昌林教授从肝论治紧张型头痛经验探析

[目的]在中医治未病理论的指导下,探讨补肾活血中药联合耳穴压豆对肾虚血瘀型胚胎移植不孕症患者子宫动脉血流动力学和子宫内膜的干预作用。[方法]选择2018年1月至2019年1月的胚胎移植不孕症患者,经辨证分型后选取肾虚血瘀型病例90例,随机分成A组(补肾活血中药联合耳穴压豆治疗组)、B组(补肾活血中药组)及C组(耳穴压豆组)共3组,每组30例。3组患者均使用长方案超促排卵,治疗从月经周期第3天开始,至胚胎移植后第5周结束。同时,A组另予补肾活血中药、耳穴压豆治疗,B组另予单纯补肾活血中药治疗,C组予耳穴压豆治疗。观察并比较各组子宫内膜厚度、子宫动脉血流搏动指数(pulsatility index,PI)、双侧收缩期峰值流速/舒张末期流速(systolic/diastolic ratio value,S/D)、生化妊娠率、临床妊娠率等指标。[结果]与C组比较,A组和B组生化妊娠率、临床妊娠率方面均优于C组,差异均有统计学意义(P0.05)。与C组比较,A组和B组内膜厚度显著增加,子宫动脉血流PI、双侧S/D显著降低,差异均有统计学意义(P0.05);与B组比较,A组子宫动脉血流PI显著降低,而生化妊娠率、临床妊娠率方面均优于B组,差异均有统计学意义(P0.05)。[结论]补肾活血中药联合耳穴压豆治疗可以改善肾虚血瘀型胚胎移植患者的子宫内膜厚度、子宫动脉血流阻力,提高临床妊娠率,且较单纯使用中药或耳穴压豆效果更佳。     

《医宗金鉴·妇科心法要诀·崩漏门》组方用药特点分析

目的探讨《医宗金鉴·妇科心法要诀·崩漏门》组方用药规律与特点。方法运用统计学方法,统计《医宗金鉴·妇科心法要诀·崩漏门》中所用方剂及药物的四气、五味、归经以及方剂的功能、主治、归类等所出现的频次、频率;运用文献学方法分析其组方用药规律与特色。结果《医宗金鉴·妇科心法要诀·崩漏门》共用方15首,其中补益方使用频次最高,占73.33%。15首方剂共用药物49味,其四气五味应用频次前三为温寒平,甘苦辛,分别为61.24%、20.16%及14.73%和32.18%、29.21%及29.21%。归经上,归肝经药物应用最多,占22.14%,脾肺经次之为18.32%、12.21%;功效分类上,补益药应用频次最高,其次为风类药、祛湿药,占50.00%、16.66%、15.15%。结论《医宗金鉴·妇科心法要诀·崩漏门》认为虚、热、瘀是崩漏发生的主要病机,其治崩漏,不在固涩,而在治本,即补脾、调肝、清热、化瘀。其组方用药特点体现在崇古不泥,灵活务实;重视温补,慎用涩止;崇尚调肝,注重清热化瘀。     

温补肾阳中药对虚证模型小鼠肾上腺皮质激素合成的调节作用

  目的：研究温补肾阳中药及其配伍对虚证模型小鼠肾上腺皮质激素合成的影响。  方法：120只雄性ICR小鼠随机分成10组,即对照组、模型组、淫羊藿(5.3 mg·kg-1·d-1)组、仙茅(4.3 mg·kg-1·d-1)组、巴戟天(4.3 mg·kg-1·d-1)组、杜仲(5.3 mg·kg-1·d-1)组、补骨脂(5.3 mg·kg-1·d-1)组、菟丝子(6.0 mg·kg-1·d-1)组、肉苁蓉(5.3 mg·kg-1·d-1)组以及配伍(各单味中药等比例混合,4.7 mg·kg-1·d-1)组,每组12只。除对照组外,其他各组小鼠灌胃给予0.66 mg·kg-1·d-1氢化可的松溶液,连续14 d,以复制药源性虚证模型。造模同时,各中药干预组及配伍组小鼠灌胃给予相应药液,连续14 d。末次给药后,称量小鼠体质量;采集血清和双侧肾上腺组织。ELISA检测血清皮质酮含量;PCR检测肾上腺相关基因的表达,包括类固醇激素合成酶(Cyp11a1、Cyp21a1、Cyp11b1、Hsd3b1)、胆固醇转运分子(Star、StarD3、Npc1、Npc2)、胆固醇摄取分子(Ldlr、Scarb1)、胆固醇合成限速酶(Hmgcr)、胆固醇储存分子(Lipe、Acat1)、胆固醇流出分子(Abca1、Abcg1)、胆固醇稳态分子(Srebf2、Nr1h3);Western blot检测肾上腺CYP11A1、CYP21A2、HSD11B1、StAR、NPC1、NPC2、LDLR、SRBI、HSL、ACAT1的蛋白表达。  结果：①与模型组相比,各中药干预组及配伍组小鼠的体质量和血清皮质酮含量无明显变化(P>0.05)。②与对照组相比,模型组小鼠肾上腺Cyp21a1 mRNA表达和CYP11A1蛋白表达显著降低(P＜0.01);与模型组相比,淫羊藿组和仙茅组Cyp21a1 mRNA表达明显上调(P<0.05),各中药组及配伍组CYP11A1蛋白表达呈上调趋势。③与对照组相比,模型组小鼠肾上腺Star和Npc1的mRNA表达及StAR和NPC1蛋白表达显著降低(P<0.05,P＜0.01),NPC2蛋白表达显著升高(P＜0.01);与模型组相比,淫羊藿组、仙茅组、杜仲组、菟丝子组及配伍组StAR蛋白表达明显升高(P<0.05,P＜0.01),各中药组NPC1蛋白表达量增多,以补骨脂作用最为显著(P<0.05),除杜仲组外其他中药干预组及配伍组NPC2蛋白表达明显下调(P＜0.01)。④与对照组相比,模型组小鼠肾上腺Ldlr、Scarb1的mRNA表达以及LDLR、SRBI的蛋白表达均显著降低(P<0.05,P＜0.01);与模型组相比,仙茅组、补骨脂组、菟丝子组、肉苁蓉组及配伍组Ldlr mRNA表达明显下调(P＜0.01),杜仲组、菟丝子组及配伍组SRBI蛋白表达显著升高(P<0.05,P＜0.01)。⑤模型组小鼠肾上腺Hmgcr mRNA表达及HSL蛋白表达较对照组显著降低(P＜0.01);与模型组相比,仙茅组、巴戟天组、杜仲组、补骨脂组、肉苁蓉组Hmgcr mRNA表达明显降低(P<0.05,P＜0.01),淫羊藿组、补骨脂组、菟丝子组、肉苁蓉组及配伍组HSL蛋白表达明显降低(P<0.05,P<0.01)。⑥模型组小鼠肾上腺Abcg1 mRNA表达较对照组显著升高(P＜0.01);与模型组比较,除肉苁蓉组外,其他各中药干预组及配伍组的Abcg1 mRNA表达均显著降低(P<0.05,P＜0.01)。⑦模型组小鼠肾上腺Srebf2 mRNA表达较对照组显著降低(P＜0.01);与模型组相比,补骨脂组、肉苁蓉组及配伍组Srebf2 mRNA表达显著降低(P<0.05,P＜0.01),且补骨脂组、菟丝子组、肉苁蓉组及配伍组Nr1h3 mRNA表达显著降低(P<0.05)。  结论：温补肾阳中药可调节氢化可的松诱导的虚证模型小鼠肾上腺皮质激素的合成能力,其中以淫羊藿、仙茅、杜仲、菟丝子的作用较为显著。     

任青玲运用滋阴补阳序贯法治疗多囊卵巢综合征伴胰岛素抵抗

肾为天癸之源、气血之根,女子以血为主,经、孕、产、乳皆以血为用。月经来潮及其周期性演变需在心肾交济、肝脾协调的整体配合下周而复始地完成。心肾燮理阴阳,肝脾协调气血,气血阴阳调摄有度,月经周期圆运动才能节律适常。故本病的治疗以心肾为核心,辨证论治兼调四脏,使得阴平阳秘,达到调经促孕的目的。任青玲教授在补养心肾调周法的基础上提出滋阴补阳序贯法,结合卵巢局部发生胰岛素抵抗的表现是卵巢局部“痰浊”的特点,对于多囊卵巢综合征伴胰岛素抵抗的治疗强调经前期以补阳为主,常用右归饮;经后期以滋阴为要,常用滋肾生肝饮;经间期温化痰湿以治标,常用苍附导痰汤。治疗上以补肾为主,兼以化痰、疏肝、活血等方法,配合周期不同阶段用药,使治疗更具有针对性。