复方金归栓质量标准的研究

目的建立复方金归栓的质量标准。方法采用TLC法对复方金归栓中的丹参、当归、川芎进行定性鉴别;采用HPLC法测定该制剂中丹参酮ⅡA的含量,色谱柱为Kromasil KR100-5-C18（4.6 mm×250 mm,5μm）,流动相：乙腈-水（80∶20）;检测波长：270 nm;进样量：10μl;柱温：30℃。结果 TLC法可鉴别出该制剂中的丹参、当归、川芎,薄层色谱斑点清晰,无干扰。丹参酮ⅡA在5.075～101.50μg·ml-1范围内,浓度与峰面积呈良好线性关系（r=0.9995）;平均加样回收率为99.17%,RSD为0.84%。结论此方法简便,准确,重复性好,能有效的控制复方金归栓的质量。     

HPLC法同时测定精制冠心片中芍药苷和丹参酮ⅡA含量

目的建立同时测量精制冠心片中主药有效成分芍药苷和丹参酮ⅡA含量的方法。方法采用ODS-Cl8色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm);流动相采用乙睛-0.2%磷酸溶液进行梯度洗脱;流速1.0mL/min;检测波长270 nm(检测丹参酮ⅡA),10 min,230 nm(检测芍药苷);柱温:室温。结果芍药苷在12.52-125.2μg·mL-1的范围内峰面积积分值与浓度呈良好的线性关系(r=0.9998),平均回收率为100.1%,RSD=2.4%(n=6);丹参酮ⅡA在2.67-26.7μg·mL-1的范围内峰面积积分值与浓度呈良好的线性关系(r=0.9999),平均回收率为100.2%,RSD=1.8%(n=6)。结论该法准确、简便,重现性好,可用于精制冠心片的质量控制。     

丹参酮注射液联合缬沙坦治疗高血压肾病

目的 观察丹参酮注射液联合缬沙坦治疗高血压肾病的疗效.方法 选择我院高血压肾病患者60例,随机分为对照组和丹参酮组,每组30例.对照组采用缬沙坦80 mg,口服,1次/日.丹参酮组采用缬沙坦80 mg,口服,1次/日;同时给予丹参酮注射液60 mg,静脉输注,1次/日.两组均治疗2周.观察治疗前后血肌酐、血清胱抑素C（Cys-C）、24 h尿蛋白定量、收缩压及舒张压的水平变化.结果 两组患者治疗前收缩压、舒张压、24 h尿蛋白尿、血肌酐、血清胱抑素C水平差异无统计学意义（P＞0.05）.治疗2周后,对照组和丹参酮组治疗后收缩压、舒张压、24 h 尿蛋白尿、血肌酐较治疗前降低（P＜0.05）;对照组血清胱抑素C治疗前后差异均无统计学意义（P＞0.05）,而丹参酮组治疗后血清胱抑素C较治疗前降低（P＜0.05）.治疗后丹参酮组收缩压、舒张压、24 h尿蛋白尿、血肌酐较对照组更为降低（P＜0.05）.结论丹参酮联合缬沙坦治疗高血压肾病可以协同保护肾功能,减轻蛋白尿,保护肾功能.     

乳癖康胶囊质量标准研究

目的建立乳癖康胶囊的质量标准。方法用薄层色谱法对乳癖康胶囊中地龙进行定性鉴别。用高效液相色谱法测定制剂中丹参酮ⅡA的含量,色谱柱为日立L-2000 C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为甲醇-水(75∶25),流速为1.0 mL/min,检测波长为270 nm。结果在薄层色谱中能检出地龙,阴性对照无干扰。丹参酮ⅡA在0.16～0.4μg 范围内具有良好的线性关系,回归系数 r＝0.9999,平均回收率为99.1%,RSD＝2.20%。结论本方法简便可行,专属性强,重复性好,可用于乳癖康胶囊的质量控制。     

丹参酮ⅡA对血管平滑肌细胞内质网应激相关基因表达的影响

目的:研究丹参酮ⅡA对同型半胱氨酸(HCY)诱导增殖血管平滑肌细胞(VSMC)内质网应激(ERS)相关基因免疫球蛋白重链结合蛋白(Bip)表达的影响,探讨丹参酮ⅡA抗动脉粥样硬化的机制.方法:建立HCY诱导的兔VSMC增殖模型,与不同浓度的丹参酮ⅡA共同培养,Annexin/PI双染法、原位缺口末端标记(TUNEL)法检测细胞凋亡率,观察凋亡细胞形态;实时荧光定量PCR检测Bip基因表达.结果:丹参酮ⅡA可显著促进兔VSMC凋亡,细胞凋亡率与HCY组相比差异显著(P＜0.01),且存在剂量依赖性;丹参酮ⅡA组Bip mRNA表达水平显著升高,与HCY组相比差异显著(P＜0.05,P＜0.01).结论:丹参酮ⅡA上调Bip基因表达,放大ERS信号,诱导兔VSMC凋亡,可能是其抗动脉粥样硬化的机制之一.     

分子动力学模拟法研究丹参酮IIA与胆固醇酯转运蛋白的相互作用模式

目的 通过研究丹参酮ⅡA与胆固醇酯转运蛋白(CETP)的相互作用,探索其对CETP的影响模式.方法 基于晶体结构构建丹参酮ⅡA与CETP多种形式的复合结构,并以此为起始结构进行分子动力学模拟,模拟软件为Gromacs 4.0,力场Gromos 96 53a6,温度300 K,模拟时间20 ns,记录轨迹,分析CETP整体形状和局部结构变化,考察丹参酮ⅡA与CETP的相互作用能量.结果 磷酯酰胆碱出口区和空腔都装满后CETP结构比较刚性,单装空腔CETP结构容易变化.对应于CETP框架结构的形态变化,在与不同配体复合形式下CETP两侧的出口区和磷酯酰胆碱出口区以及空腔差异较大,丹参酮ⅡA与CETP相互作用较强的情况出现在2个磷酯酰胆碱出口位置和空腔左侧位置.结论 CETP是一个结构比较容易变化的载体蛋白,受装载配体结构和数量的影响容易发生相应变化,丹参酮ⅡA可能具有通过与磷酯酰胆碱或胆固醇酯共同作用影响CETP的形态,从而抑制其转运的能力.     

丹参酮ⅡA磺酸钠对冠心病患者血小板功能的影响

目的 探讨丹参酮ⅡA磺酸钠治疗冠心病的作用机制. 方法89例冠心病患者随机分为治疗组45例和对照组44例.对照组采用阿司匹林、硝酸酯类、他汀类降脂药等常规治疗,治疗组在常规治疗基础上加用丹参酮ⅡA磺酸钠注射液,两组均连续用药7天.于治疗开始前1天及结束次日检测两组血液流变学、纤维蛋白原(Fg)、血小板聚集率(PAG)与血小板膜糖蛋白CD62p、CD63、CD42b及PAC-1水平. 结果两组患者治疗后高切全血黏度、低切全血黏度、血浆比黏度、Fg、PAG较治疗前均明显降低,并且治疗组较对照组降低更明显(P＜0.05或P＜0.01);两组患者治疗后CD62p、CD63、CD42b及PAC-1表达较治疗前均有明显改善(P＜0.01),治疗组CD62p、CD63及PAC-1的表达与对照组比较下降更明显(P＜0.05或P＜0.01).结论丹参酮ⅡA磺酸钠改善冠心病患者血液流变学,降低血浆Fg水平,抑制血小板聚集,抗血小板活化可能是其治疗冠心病的途径之一.     

丹参酮分散片制备工艺研究

目的:探讨丹参酮分散片的制备工艺。方法:采用正交设计法,以崩解时限、体外溶出度及混悬性为指标,对丹参酮分散片处方进行筛选。结果:分散片在30s内完全崩解,均匀性试验能通过710μm筛网,达到《英国药典》（1993年版）关于分散片的要求,体外溶出度明显优于普通片。结论:制备的丹参酮分散片工艺成熟,质量稳定。     

Growth inhibition and apoptosis induction in human hepatoma cells by tanshinone II<Subscript>A</Subscript>

Summary In order to study the effect of tanshinone II_A on growth and apoptosis in human hepatoma cell line BEL-7402in vitro, the human hepatoma cell line BEL-7402 was treated with tanshione I_A at various concentrations for 72 h. Growth suppression was evaluated by MTT assay; apoptosis-related alterations in morphology and biochemistry were ascertained under cytochemical staining (Hoechst 33258), transmission electron microscopy (TEM), and DNA agarose gel electrophoresis. Apoptotic rate was quantified by flow cytometry (FCM). The results showed that Tanshinone II_A could inhibit the growth of hepatoma cells in a dose-dependent manner, with IC₅₀ value being 6.28 μg/ml. After treatment with 1–10 μg/ml tanshione II_A for 72 h, BEL-7402 cells apoptosis with nuclear chromatin condensation and fragmentation as well as cell shrinkage and the formation of apoptotic bodies were observed. DNA ladder could be demonstrated on DNA electrophoresis. FCM analysis showed hypodiploid peaks on histogram, and the apoptotic rates at 5 μg/ml concentration for 12 h, 24 h, 36 h, 48 h and 72 h were (2.32±0.16)%, (3.01±0.35)%, (3.87±0.43)%, (6.73±0.58)% and (20.85±1.74)% respectively, which were all significantly higher than those in the control group (1.07±0.13)%. It is concluded that Tanshione II_A could induce human hepatoma cell line BEL-7402 apoptosis, which may be related to the mechanism of growth inhibition. TANG Zhongzhi, male, born in 1966, Doctor in Charge This project was supported by a grant from Natural Sciences Foundation of Hubei Province (No. 2000J064).     

超临界二氧化碳萃取丹参中的丹参酮

目的:研究超临界二氧化碳从丹参中提取丹参酮的工艺,并对影响收率的几个主要因素进行考察。方法:萃取压力20MPa,萃取温度45℃,分离温度35℃。对超临界萃取法和索氏提取法以及乙醇浸提法进行比较。结果:超临界萃取法得到的萃取物纯度要比索氏提取法和乙醇浸提法高大约4.5倍,丹参酮含量可达到89.5%,而萃取时间仅为1h,远远低于其它两种方法所需的时间。结论:超临界二氧化碳萃取丹参酮纯度高而且时间短。