儿童横纹肌肉瘤的上皮和神经内分泌标志物

目的:探讨上皮和神经内分泌标志物细胞角蛋白(cytokeratin,CK)、突触素(synaptophysin,Syn)和嗜铬粒蛋白A(chromogranin A,CgA)在儿童横纹肌肉瘤(rhabdomyosarcoma,RMS)中的表达及临床病理意义。方法:回顾性分析56例RMS的临床特征、组织学形态,应用免疫组织化学的方法检测CK,Syn,CgA在各型RMS组织中的表达,结合随访结果进行分析。结果:52例患儿中,男38例,女18例,年龄24 d^9岁(平均3岁11个月)。发生部位:以泌尿生殖道最为常见(16/56,28.6%)。镜下:56例中,诊断胚胎性RMS(epithelioid rhabdomyosarcoma,ERMS)32例、腺泡状RMS(alveolar rhabdomyosarcoma,ARMS)19例、梭形细胞RMS(spindle cell rhabdomyosarcoma,SCRMS)5例。免疫表型:41.1%(23/56)表达广谱CK,43.1%(22/51)表达Syn,22.4%(11/49)表达CgA;其中,Syn和CgA的表达方式呈局灶性,并且有22%的病例同时表达二者;9%的病例同时表达CK和Syn或CgA。结论:各种类型的RMS中均可不同程度地表达上皮和神经内分泌标志物,提示可使用这一组标志物诊断和鉴别诊断RMS与神经内分泌肿瘤及其他小圆形细胞肿瘤。     

慢病毒介导骨形态发生蛋白7基因转染诱导大鼠骨髓间充质干细胞向神经元样细胞的分化

文题释义： 骨形态发生蛋白7：骨形态发生蛋白不仅决定着胚胎早期神经与非神经的命运,还与Wnt、Shh等其他信号通路协同作用,在神经干细胞的增殖、分化以及神经系统各亚型细胞的形成中发挥着重要作用。骨形态发生蛋白7是骨形态发生蛋白家族的重要成员之一,通过静脉或脑室注射骨形态发生蛋白7蛋白,可改善脑缺血大鼠的神经功能,而且骨形态发生蛋白7能够促进神经树突生长,说明骨形态发生蛋白7可能在神经系统发生与修复中具有重要的调节作用,起到神经保护作用。 骨髓间充质干细胞：其具有来源广泛、取材容易、免疫排斥反应弱、避免伦理争议等优点,应用于治疗脊髓损伤具有重要的临床意义,为一种理想的组织工程干细胞。但利用骨髓间充质干细胞治疗脊髓损伤存在诸多问题,例如向神经细胞分化效率低、移植进入体内后分化形成的神经细胞能否与内源性神经细胞形成突触联系等。 背景：骨髓间充质干细胞具备向神经元样细胞分化的潜能,已经被列为治疗脊髓损伤的首选干细胞,但其分化效率低,寻找一种具有高效诱导能力的因子尤为重要。基于文献查阅及课题组研究基础,推测骨形态发生蛋白7(bone morphogenetic protein 7,BMP-7)基因可能在促进骨髓间充质干细胞向神经元样细胞分化上发挥着重要作用。 目的：探讨骨形态发生蛋白7慢病毒载体转染诱导大鼠骨髓间充质干细胞向神经元样细胞分化的作用。 方法：采用全骨髓贴壁法培养SD大鼠骨髓间充质干细胞,以感染复数为50,25,10,1进行LV-GFP转染,转染后3 d在荧光倒置显微镜下观察各组GFP表达情况,确定最佳感染复数。取第3代骨髓间充质干细胞,分为空白对照组(常规培养)、LV-GFP组、LV-BMP-7-GFP组,以最佳感染复数转染24,48,72,96,120 h后,采用MTT法检测细胞存活率;转染3 d后,采用免疫细胞化学实验检测神经细胞标记物神经丝蛋白200、突触素1表达。 结果与结论：①LV-GFP转染后3 d,感染复数为1组未见GFP阳性细胞,感染复数为10,25,50组可见GFP阳性细胞,其中感染复数为10组平均荧光强度高于其余组(P < 0.05),为最适感染复数;②空白对照组、LV-GFP组神经丝蛋白200、突触素1表达呈阴性;LV-BMP-7-GFP组神经丝蛋白200、突触素1表达呈阳性,胞体和轴突被染成亮棕黄色;③结果表明,LV-BMP-7转染可促进骨髓间充质干细胞向神经元样细胞分化。 ORCID: 0000-0001-5909-5524(张文) 中国组织工程研究杂志出版内容重点：干细胞;骨髓干细胞;造血干细胞;脂肪干细胞;肿瘤干细胞;胚胎干细胞;脐带脐血干细胞;干细胞诱导;干细胞分化;组织工程     

苍艾挥发油对大鼠抑郁样行为的影响及机制研究

目的?研究苍艾挥发油（Volatile oil of Cang Ai,VOCA）对不可预知慢性温和应激所致的大鼠抑郁样行为的影响及其可能的作用机制。方法?将40只SD大鼠,随机分为4组,正常对照组、模型对照组、阳性药组（氯米帕明,20?mg/kg）和苍艾挥发油组（14.6?μL/kg）各10只;后3组大鼠均采用6种不同刺激方式复制慢性不可预知温和应激模型(CUMS)。在CUMS造模第15~42天进行药物干预,除阳性药灌胃给药外,其他各组均雾化吸入相应剂量的药物或溶媒。于造模后第21、28、35、42天进行体质量、食量和毛态检测,造模结束后的第1天进行旷场实验和蔗糖偏好实验,以评价苍艾挥发油对应激所导致的抑郁样行为的作用。用免疫荧光染色检测大鼠海马齿状回BDNF阳性细胞数、蛋白免疫印迹法检测大鼠海马中突触囊泡蛋白(Synaptophysin)和突触后致密物质-95(PSD-95)的蛋白表达水平。结果?与模型组比较,VOCA可明显增加模型大鼠的水平运动总路程、穿行格子数和移动速度,同时缩短静止时间（P<0.01）,提高蔗糖偏好度（P<0.05）。VOCA在给药第7、14、21和28天可显著增加造模动物体质量增幅和进食量（P<0.05~0.01）,毛态评分则明显低于模型组（P<0.01）。同时,VOCA能够明显增加海马齿状回中BDNF阳性细胞数和海马组织中Synaptophysin表达量（P<0.01）。结论?苍艾挥发油对抗大鼠慢性不可预见应激抑郁的机制可能与增加BDNF含量进而增加突触囊泡膜蛋白表达从而改善突触传递效能有关。      

创伤后癫痫大鼠模型海马突触素的变化

目的：探讨突触素在创伤后癫痫海马结构的改变及意义。方法：应用铁离子杏仁体注射制作创伤后癫痫模型，用免疫组织化学和计算机图像分析技术定量分析海马各区突触素在不同时间的改变。结果：模型组损伤侧及对侧齿状回分子层内带突触素免疫反应产物密度逐渐增加，15d达高峰，一直延续到30d。结论：齿状回突触素含量的变化可能是创伤后癫痫发生的分子病理学基础。     

Lack of preventive effects of dietary fibers or chlorophyllin against acrylamide toxicity in rats.

Dietary fibers and chlorophyllin have shown to exert anti-carcinogenic effects against co-administered carcinogens. To test the possibility of chemoprevention by such dietary supplements on subacutely induced acrylamide (ACR) toxicity, Sprague-Dawley male rats were administered 2.5% sodium alginate, 5% glucomannan, 5% digestion resistant maltodextrin, 2.5% chitin or 1% chlorophyllin in the diet, and starting one week later, co-administered 0.02% ACR in the drinking water for 4 weeks. For comparison, untreated control animals given basal diet and tap water were also included. Neurotoxicity was examined with reference to gait abnormalities and by quantitative assessment of histopathological changes in the sciatic and trigeminal nerves, as well as aberrant dot-like immunoreactivity for synaptophysin in the cerebellar molecular layer. Testicular toxicity was assessed by quantitation of seminiferous tubules with exfoliation of germ cells into the lumen and cell debris in the ducts of the epididymides. Development of testicular toxicity as well as neurotoxicity was evident with ACR-treatment, but was not suppressed by dietary addition of fibers or chlorophyllin, suggesting no apparent beneficial influence of these dietary supplements on experimentally induced subacute ACR toxicity.     

神经内分泌标志物在无功能胰岛细胞瘤中的表达及意义

目的：研究神经内分泌标记嗜铬粒蛋白(CG)、突触素(Syn)和神经特异性烯醇化酶(NSE)在无功能胰岛细胞瘤中的表达及意义。方法：用链菌素亲生物蛋白-过氧化物酶法(S-P法)对我院收治的1988-2001年间共14例无功能膜岛细胞瘤石蜡标本进行了嗜铬粒蛋白(CG)、突触素(Syn)和神经特异性烯醇化酶(NSE)免疫组织化学研究。结果：14例无功能膜岛细胞瘤中NSE、CG和Syn的阳性表达分别有12、8和12例，阳性率分别为85．7％、51．7％和85．7％。除1例外，其余病例中3种激素至少有一种阳性表达。结论：CG、Syn、NSE在无功能胰岛细胞瘤中呈强阳性表达，是胰腺无功能膜岛细胞瘤的良好标记，联合检测有助于提高检测的敏感性。     

肾上腺髓质分泌物CgA、NSE和SYN在髓质病变中分布特点研究

目的:研究肾上腺髓质分泌物嗜铬蛋白A、神经特异性烯醇化酶和突触素在肾上腺髓质病变中的分布特点;证明肾上腺的内分泌功能是一有机整体,在肾上腺髓质发生病变时,髓质可能参与皮质功能的调节,从而导致皮质功能的异常;阐明出现临床诊断与病理诊断不一致性的可能原因;为进一步深入研究皮、髓质之间的相互作用奠定基础。方法:运用免疫组化方法对肾上腺髓质增生、嗜铬细胞瘤和嗜铬细胞癌病例进行嗜铬蛋白A、神经特异性烯醇化酶和突触素染色,正常肾上腺作为对照,观察其在皮质中分布特点。结果:肾上腺嗜铬细胞瘤和嗜铬细胞癌的皮质中均可见嗜铬蛋白A染色阳性细胞,髓质增生和正常肾上腺病例皮质肾上腺髓质分泌物嗜铬蛋白A染色阴性;肾上腺髓质增生和嗜铬细胞癌皮质神经特异性烯醇化酶染色呈阳性,嗜铬细胞瘤和正常肾上腺皮质神经特异性烯醇化酶染色呈阴性;肾上腺髓质增生、嗜铬细胞瘤和嗜铬细胞癌的皮质中神经特异性烯醇化酶染色呈阳性,正常肾上腺皮质神经特异性烯醇化酶染色呈阴性。结论:肾上腺髓质分泌物嗜铬蛋白A、神经特异性烯醇化酶和突触素分布特点可以帮助鉴别肾上腺髓质增生、嗜铬细胞瘤和嗜铬细胞癌。肾上腺皮、髓质之间联系紧密,受共同机理所调控,除经典的下丘脑-垂体-肾上腺轴和肾素-血管紧张素-醛固酮系统外,肾上腺皮、髓质之间存在相互调节的解剖学和内分泌学基础。     

金芪降糖片对糖尿病引发的认知功能障碍的影响及机制

目的:探讨金芪降糖片对糖尿病引发的认知功能障碍的影响,并初步探讨其作用机制。方法:选用C57BL/6J小鼠,采用ip链脲佐菌素(STZ,120 mg·kg-1)复合高脂饮食的方法诱导复制2型糖尿病模型。利用Morris水迷宫试验筛选出存在糖尿病认知功能障碍的小鼠,并随机将其分为4组,每组14只,分别为模型组,阳性药组(盐酸二甲双胍0.45 g·kg-1),金芪降糖片高(2倍临床等效剂量1.31 g·kg-1)及低(临床等效剂量0.655 g·kg-1)剂量组。正常组和模型组均给予等量蒸馏水,连续ig给药10周。在给药前及给药10周后,各测一次小鼠的空腹血糖(FBG)和体重。10周后,Morris水迷宫实验检测小鼠学习忆能力;尼式染色观察海马CA1区形态学变化;酶联免疫吸附测定(ELISA)检测小鼠血清脑源性神经营养因子(BDNF)水平;实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)法检测小鼠海马组织突触素(SYN)mRNA表达水平。结果:与正常组比较,模型组糖尿病小鼠FBG明显升高,记忆能力下降,海马神经损伤明显,血清BDNF水平明显降低,海马SYN mRNA表达水平明显降低,体重明显降低(P0.05,P0.01);与模型组比较,金芪降糖片高剂量组可降低糖尿病小鼠FBG,改善学习记忆能力,改善海马神经损伤状况,显著升高血清BDNF水平,显著增加海马SYN mRNA表达水平,各治疗组小鼠体重较稳定,差异均具有统计学意义(P0.05,P0.01)。结论:金芪降糖片可以改善糖尿病小鼠的学习记忆能力,可能是通过上调BDNF含量对海马神经细胞保护及营养修复,并促进海马SYN mRNA表达上调调节海马神经突触可塑性实现的。     

Synaptophysin immunoreactivity and small clear vesicles in neuroendocrine cells and related tumours

Synaptophysin (protein p38) immunoreactivity has been detected immunohistochemically in neuroendocrine cells of the human adrenal medulla, carotid body, skin, pituitary, thyroid, lung, pancreas and gastrointestinal mucosa as well as in 87 out of 93 neuroendocrine tumours investigated, including pheochromocytomas, chromaffin and non-chromaffin paragangliomas, ganglioneuromas, pituitary adenomas, thyroid medullary carcinomas, parathyroid adenomas, lung carcinoids and neuroendocrine carcinomas, pancreatic and gut endocrine tumours and cutaneous merkelomas. Parallel ultrastructural investigation of synaptophysin-reactive cells and tumours revealed the presence, in addition to dense-cored, secretory granules, of a population of pleomorphic, small, clear vesicles resembling synaptic vesicles of nerve terminals as well as the synaptophysin immunoreactive vesicles already described in rat adrenal medullary and pituitary cells. Synaptophysin immunoreactivity showed several differences in its distribution among tumour and non-tumour endocrine cells when compared to chromogranin A immunoreactivity, a well known marker of the core of endocrine granules. Synaptophysin represents a reliable general marker of neuroendocrine cells and tumours, which may be useful in diagnostic histopathology.