Very Late Stent Thrombosis after Discontinuation of Antiplatelet Agents during Anticoagulation Therapy in a Patient with Peri-stent Contrast Staining after Implantation of a Second-generation Drug-eluting Stent

A 54-year-old man was admitted to our hospital due to intermittent chest pain. He had a history of acute myocardial infarction, and peri-stent contrast staining had been observed at the stent implantation site. The patient previously underwent anticoagulation therapy for left ventricular thrombus and antiplatelet therapy to prevent stent thrombosis. More than one year after implantation of a drug-eluting stent, antiplatelet drugs were discontinued, and anticoagulant alone was prescribed according to the guidelines, which resulted in very late stent thrombosis. The risks of both bleeding and thrombosis must be fully considered when deciding whether or not to discontinue antiplatelet therapy during anticoagulation therapy.     

大鼠膝关节软骨不同染色方法的差异

背景：国内外学者对关节软骨对软骨进行了大量研究,需要用不同的染色方法对研究结果进行分析,但将多种染色方法同时应用于软骨研究及探讨染色机制的较少。 目的：探讨不同染色方法对大鼠膝关节软骨染色的优缺点。 方法：取正常大鼠膝关节软骨,行苏木精-伊红、番红O、阿尔辛蓝、甲苯胺蓝、番红-阿尔辛蓝、番红-固绿染色,观察软骨结构。 结果与结论：苏木精-伊红、番红O、甲苯胺蓝染色均可观察到潮线,分别为蓝色、红色和蓝色,番红O和甲苯胺蓝染色强度朝潮线方向增强,番红O染色对潮线的观察优于其他染色方法。苏木精-伊红染色关节软骨4层结构清晰,软骨细胞呈柱状排列,基质呈均匀呈嗜碱性染色。番红O染色显示4层结构层次清楚,基质深层染色最红。阿尔辛蓝染色显示,pH 1.0时软骨细胞周边部分被阿尔辛蓝强烈染色,pH 2.5时阿尔辛蓝染色较深。甲苯胺蓝染色显示组织结构层欠清,胞核染色清晰,胞浆几乎不着色,基质呈淡蓝紫色。番红-阿尔辛蓝染色显示软骨表面及基质呈不均一的红色,深层颜色较深,软骨细胞周围蓝染;番红-固绿染色显示软骨基质呈均匀的红色,软骨下骨呈绿色,软骨组织与骨组织分对比鲜明。提示上述各种方法均可观察到软骨的四层结构,但以番红O染色显示软骨各层和潮线结构最佳;苏木精-伊红染色观察软骨细胞形态变化较其他方法清楚。     

髓内针固定小鼠闭合性股骨骨折模型的建立

目的 建立髓内针固定小鼠闭合性股骨骨折模型.方法 解剖20例C57BL/6小鼠股骨,了解小鼠股骨形态结构特点.12～16周龄的C57BL/6小鼠50只,采用髓内针手术技术,在股骨髓腔内插入直径0.2mm导针后,通过制作的骨折造模架,造成闭合性股骨中段骨折,经导针插入26G(直径0.45mm)不锈钢针,通过X线及番红O-固绿染色观察骨折愈合过程.结果 术后通过X线证实横行骨折32例,短斜行骨折16例,粉碎性骨折2例,X线及组织学检查表明,其骨折愈合过程为典型的软骨内骨化,建模成功率为96%,可重复性高.结论 髓内针手术技术建立的小鼠闭合性股骨骨折模型,方法安全、快捷、简单;其骨折愈合为典型的软骨内骨化,可重复性高,能较好地用于骨折愈合和骨代谢的分子机制研究.     

糖尿病大鼠角膜上皮损伤修复过程中 occludin 的重塑特点

目的：探讨糖尿病（DM）大鼠和正常大鼠角膜上皮修复过程中紧密连接蛋白 occludin 重塑的特点。方法90只 SD 大鼠随机分为 DM组和正常对照组（NC）各45只（DM组均高脂喂养）,通过腹腔注射链脲佐菌素（STZ）诱导形成Ⅱ型 DM大鼠模型,于损伤后0 h（未损伤）,16、48、72、120 h （每组5只）处死大鼠取角膜。间接免疫荧光染色和 Western blot 法观察 occludin 蛋白在损伤修复过程中的变化。结果DM大鼠角膜上皮损伤愈合率较 NC 组大鼠明显延迟,DM组和 NC 组大鼠角膜上皮 occludin 蛋白在损伤后16、48 h 表达差异有统计学意义（P ＜0．05）,在损伤后0、72、120 h 表达差异无统计学意义。结论糖尿病可影响大鼠角膜上皮创伤修复过程中紧密连接蛋白 occludin 蛋白的表达。     

细胞免疫化学p16/Ki-67双染结合DNA倍体分析预测HSIL的研究

目的 探讨DNA倍体分析联合细胞免疫化学p16/Ki-67双染检测对宫颈高级别鳞状上皮内病变(HSIL)及宫颈鳞癌(SCC)的诊断价值.方法 随机收集细胞学检查73例,其中有少量DNA倍体异常细胞53例,DNA倍体阴性20例,通过细胞免疫化学双染检测p16/Ki-67结果.以病理结果为金标准,对比分析DNA倍体分析和DNA倍体分析联合p16/Ki-67双染对HSIL+的诊断价值.结果 20例DNA倍体阴性的标本中p16/Ki-67双染结果全部阴性.DNA倍体分析对HSIL+的阳性预测值为34.62％,DNA倍体分析联合p16/Ki-67双染对HSIL+的敏感性为84.62％,特异性为92.31％,阳性预测值为78.57％,阴性预测值为94.74％,明显高于DNA倍体分析对HSIL+的阳性预测值(P＜0.05).结论 p16/Ki-67双染可以明显提高HSIL检出的预测值,DNA倍体分析联合p16/Ki-67双染是预测HSIL+的有效方法,适合在医疗资源缺乏的地区实施.     

用于替代皮肤刺激试验的组织工程表皮模型的构建研究

目的探讨人表皮细胞与聚碳酸脂膜构建组织工程表皮模型的方法,建立可用于皮肤刺激试验的组织工程表皮模型。方法应用组织工程方法,以聚碳酸脂膜为支架,以人皮肤角质形成细胞为细胞来源,构建组织工程表皮模型。气液面培养13 d,通过HE染色、角蛋白10(keratin 10,K10)和K13抗体、K14抗体、层粘连蛋白抗体、角化细胞交联外膜蛋白抗体、中间丝相关蛋白抗体免疫荧光染色、透射电镜观察组织工程表皮模型组织结构。采用快速渗透试验方法,SDS分别作用于培养基中添加脂质物(实验组)和未添加脂质物(对照组)的组织工程表皮模型18 h,测定组织活性减小50%所需化学物质的浓度(half maximal inhibitory concentration of a substance,IC50)值。结果 HE染色、免疫荧光染色及透射电镜观察显示,构建的组织工程表皮模型分化良好,具有与正常表皮相似的结构:基底膜、棘层、颗粒层和角化层。实验组和对照组组织工程表皮模型的IC50值分别为0.183%(6.00 mmol/L)和0.072%(2.36 mmol/L)。结论在聚碳酸酯膜上构建的组织工程表皮模型具有与正常表皮相似的组织结构,并且具有一定的屏障功能。     

The effect of age on colocalization of acetylcholinesterase and nicotinamide adenine dinucleotide phosphate diaphorase staining in enteric neurons in an experimental model

Purpose

Cholinergic and nitrergic neurons form 2 main subpopulations of the myenteric neurons, and they have been the targets of detailed morphological investigations in bowel motility disorders. However, little is known regarding the colocalization of neurotransmitters within the same enteric neurons. The aim of this study was to determine the histochemical colocalization of cholinergic and nitrergic neurons in the porcine distal large bowel myenteric plexus from fetal to adulthood.

Methods

Distal large bowel specimens were taken from 6 randomly selected age groups (3 animals in each group) from midway of gestation to adulthood. The myenteric plexus was exposed using whole-mount technique. After nicotinamide adenine dinucleotide phosphate diaphorase (NADPH-d) staining, cells per ganglion were counted. Then the specimens were stained with acetylcholinesterase (AChE), and the cells that were stained with individual enzymes and with both enzymes were counted.

Results

Colocalization of AChE and NADPH-d was seen in all age groups, and it was highest during the mid part of gestation (30%) and decreased steadily thereafter into adulthood (8%). The individual number of NADPH-d- and AChE-positive neurons per ganglion remained constant till 4 weeks of age and significantly increased thereafter into adulthood.

Conclusion

The use of double-labeling histochemical technique shows for the first time the colocalization of cholinergic and nitrergic activity in a large population of enteric neurons in the late fetal and newborn period. Age-related loss of cholinergic and nitrergic colocalization in the myenteric plexus is most likely a maturational process.     

少、弱精子症中精子形态缺陷类型及发生率的检查分析报告

目的 探讨在少、弱精子症中精子形态缺陷类型及其发生率.方法 对精液常规和改良巴氏染色检查的结果进行统计学分析.结果 （1）男性不育症中畸形精子症的发生率约为75%;精子头部缺陷的发生率约为70%,各种头部缺陷中空泡头畸形的发生率占首位,约为20%.（2）少精子症患者的正常形态精子百分率的中位数约为2.97%（P=0）,弱精子症患者的中位数为6.67%（P=0.003）.结论 （1）精子头部缺陷是精子畸形的主要类型;（2）少、弱精子症的畸形精子比例升高;（3）精子形态缺陷分析对选择辅助助孕方式具有应用价值.     

一种核酸适配体高敏检测方法的建立及应用评价

本文建立一种基于免疫印迹的核酸适配体高敏定量分析的检测方法,并探讨其在适配体药物靶向性研究中的应用价值。首先用聚丙烯酰胺凝胶电泳进行核酸适配体的分离,然后利用电转的方法将凝胶上的核酸适配体转移至PVDF膜上,先后孵育Rabbit Anti-Biotin和HRP-Streptavidin抗体,最后利用化学发光仪进行成像。结果显示核酸适配体可以通过该方法进行定量检测分析,且该方法检测灵敏度高,能够识别荧光染料法检测不到的浓度范围。此外,该方法只识别被生物素修饰的核酸适配体,特异性强。结果提示,核酸免疫印记法可以作为核酸适配体药物靶向性研究的一个定量检测手段。