连桂清心片的薄层色谱鉴别

目的：建立连桂清心片中甘草和黄连的薄层色谱鉴别方法,为连桂清心片质量标准提供依据。方法分别采用不同的方法处理样品,分别以甘草酸铵、盐酸小檗碱为对照品,以甘草、黄连为对照药材,在硅胶 G 薄层板上点样,以适宜的展开剂展开,取出,晾干,显色剂显色。结果在薄层色谱中能够检出连桂清心片中的甘草、黄连,连桂清心片供试品溶液色谱中,与对照品或对照药材色谱相对应位置,色谱斑点清晰,荧光斑点显示相同的颜色,分离良好且阴性对照无干扰,均能有效提供连桂清心片的鉴别特征。结论建立的两种薄层色谱鉴别方法简便,专属性强,重现性好,可用于连桂清心片的薄层定性鉴别。     

不同浓度的骨碎补总黄酮对大鼠骨髓间充质干细胞向成骨细胞分化的影响

目的:通过在体外条件下对大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)实施干预诱导,探寻骨碎补总黄酮对BMSCs的成骨诱导分化能力及不同浓度下可能存在的剂量效应关系。方法:应用全骨髓贴壁培养法对BMSCs进行分离、纯化,并通过流式细胞术对BMSCs进行鉴定,再通过设立含不同浓度骨碎补总黄酮条件培养基,分组对BMSCs进行干预,观察各组7d和14d碱性磷酸酶(ALP)的表达,同时通过ALP染色和矿化结节染色进行定性分析。结果:用全骨髓贴壁法成功分离获得了均一稳定的BMSCs,各浓度骨碎补总黄酮作用BMSCs7d和14d后,诱导不同程度的ALP表达,经10-5g/L骨碎补总黄酮诱导,ALP染色及矿化结节染色均阳性。结论:低浓度骨碎补总黄酮能促进BMSCs向成骨细胞分化,其ALP生成量随着骨碎补总黄酮浓度的降低大致呈增加趋势。     

Comprehensive Metabolic Profiling of Modified Gegen Qinlian Decoction by Ultra-High-Performance Liquid Chromatography-Diode Array Detection-Q-Exactive-Orbitrap-Electrospray Ionization-Mass Spectrometry/Mass Spectrometry and Application of High-Performance Thin-Layer Chromatography for its Fingerprint Analysis

Objective: Gegen Qinlian decoction(GQD) is a classical traditional Chinese medicine formulation which has been used for almost 2000years. At Guang’anmen Hospital,Beijing, a modified GQD version (mGQD) with seven instead offour herbal ingredients has been applied to treatType 2 diabetes. Quality controlis a crucial prerequisite for the therapeutic application of herbal medicines. For the identification of products derived from classical GQD, the ChinesePharmacopeia requiresthe analysis of only three marker compounds. Because mGQD is a more complex mixture containing seven herbs and hundreds ofconstituents,thepharmacopoeiamethodforGQDisinadequate.Materials and Methods: Amore comprehensive characterization of the formula''s constituents has been developed using ultra?high?performance liquid chromatography?diode array detection (UHPLC?DAD)?Q?Exactive?mass spectrometry (MS)in electrospray ionization positive and negative mode. Moreover, a new method for the fingerprint analysis of mGQD via high-performance thin-layerchromatography (HPTLC) has been established. Results: Altogether, 91 compounds have been assigned to their originating plants and 84 substances were identified either by comparison with authentic references or with data from the literature. The HPTLC method is based on the application of two differentmobile phases and is able to detect both lipophilic and hydrophilic constituents of mGQD. Conclusions:ThemodifiedGQDwasextensivelycharacterizedbyUHPLCcombined with DAD and Q?Exactive Orbitrap high?resolution MS detection, leading to the assignment and identification of compounds present inthe decoction.In addition, a newmethod forthefingerprint analysis ofthemGQDusingHPTLCwas established,which allowsfast and simple identificationof the herbal ingredients in the mixture.     

大黄有效成分开发与主治创新

自古以来,大黄主治都是以泻下为主,在中医临床一直是泻里攻下的首选药物。但是,近代以来,随着科学技术的进步和临床医学的发展,对大黄的研究越来越受到人们的重视。随着发现大黄的活性成分不断增多,大黄的临床主治也在不断扩大。     

RP-HPLC法同时测定小建中颗粒中环磷酸腺苷和甘草酸的含量

目的:建立高效液相色谱法同时测定小建中颗粒中环磷酸腺苷和甘草酸含量。方法:采用Agilent TC-C18(4.6 mm×150 mm,5μm)色谱柱,流动相为甲醇(A)-0.01 mol.L-1磷酸二氢钾溶液(B),梯度洗脱(0～12 min,90%B;12～30 min,30%B),流速:1.0 mL.min-1,检测波长为250 nm,柱温为30℃。结果:环磷酸腺苷和甘草酸在12.5～200μg.ml-1质量浓度范围内与峰面积呈良好的线性关系,环磷酸腺苷和甘草酸的线性方程分别为:Y=23190X-4.6083(R2=0.9998),Y=11364X+80.342(R2=0.9950),环磷酸腺苷和甘草酸的回收率分别为95.2%和97.5%;RSD分别为2.8%和1.8%。结论:本方法操作简便,经方法验证可用于中成药小建中颗粒中环磷酸腺苷和甘草酸的含量测定。     

川芎赤芍提取物不同配比的活血化瘀作用研究

目的观察不同比例的川芎和赤芍有效部位提取物的配伍对大鼠活血化瘀的作用,探讨其活血化瘀的最佳比例关系.方法用肾上腺素建立血瘀动物模型,观察川芎和赤芍的有效部位提取物不同比例组成的药对大鼠血小板聚集、血小板黏附、红细胞聚集等血液流变学指标的影响.结果造模后大鼠血管明显收缩,血小板聚集性显著增高,红细胞聚集性明显增强且变形性发生改变,大鼠血液黏度升高,川芎和赤芍的有效部位提取物不同比例组成的药对皆有一定程度降低大鼠血液黏度、改善红细胞变形能力、降低红细胞聚集指数和抑制血小板聚集性的作用,其中川芎和赤芍提取物0.45 g:0.45 g组和0.21 g:0.45 g组作用较强.结论川芎和赤芍提取物组成的药对可显著改善大鼠的血液流变性,川芎和赤芍提取物0.45 g:0.45 g组和0.21 g:0.45 g组作用较佳.     

莪术、三棱和白介素-6对人乳腺癌细胞凋亡的诱导作用

目的探讨莪术、三棱以及白细胞介素-6(IL-6)对人乳腺癌细胞(MCF-7)凋亡的诱导作用。方法实验共设IL-6、莪术提取液与三棱提取液单独作用组、莪术与三棱协同作用组以及莪术、三棱分别与IL-6合并用药组,用EPICS-ELITE型流式细胞仪观察莪术、三棱和IL-6各自及协同作用对体外传代培养MCF-7细胞凋亡的影响。结果莪术、三棱I、L-6对MCF-7细胞的凋亡有诱导作用,莪术与三棱共同作用效果明显高于各自单独作用,与IL-6合并用药显著增强诱导凋亡作用。结论诱导肿瘤细胞的凋亡可能是莪术、三棱抑癌作用机制之一。     

大黄、活性炭复方制剂对7/8肾切除大鼠慢性肾功能不全模型的治疗效果

［ 目的］ 研究大黄、活性炭复方制剂对７／８ 肾切除大鼠慢性肾功能不全模型的治疗效果及其作用机理．［ 方法］ 建立７／８ 肾切除大鼠慢性肾功能不全模型,观察治疗组与慢性肾功能不全对照组１６ 周内血清肌酐、尿素氮、血清钙、磷、２４ｈ 尿蛋白定量、血清肌肝清除率以及光学显微镜和电子显微镜变化．［ 结果］治疗组血清肌酐及尿素氮较对照组升高缓慢,血清肌肝清除率显著升高,血清钙升高,血清磷降低,２４ｈ 尿蛋白定量明显减少;明显减轻肾小球肥大和系膜基质增多程度,减少肾小球硬化与半月体形成数．［ 结论］ 大黄、活性炭复方制剂对７／８ 肾切除大鼠慢性肾功能不全模型有显著治疗效果,能延缓慢性肾功能不全的进展     

骨碎补影响模型兔膝骨关节炎关节滑膜炎性改变实验研究

目的：采用反转录聚合酶链反应（RT-PCR）的检测方法观察细胞因子白介素-1（IL—1mRNA）的含量,同时配合光镜下显微观察炎性细胞的改变,探讨膝骨关节炎的发病机制,研究单味中药骨碎补对膝骨关节炎的干预效应及作用机理,并加以讨论、分析。材料与方法：将24只成年新西兰大耳白兔,随机分为4组,空白组6只、模型组6只、治疗组（骨碎补组）6只、对照组（维固力组）6只。、兔左后肢伸直位管型石膏固定6周后得到兔膝骨性关节炎的模型。通过灌胃给药单味中药骨碎的补水煎浓缩液以及西药维固力的浓缩液4周。采用耳缘静脉空气栓塞方法处死各组动物,通过外科手术取下其患肢股骨髁（大小约1cm×1cm）,并分离关节软骨,保留其滑膜,用Trizol液浸泡,4qC冷藏保存,用于RT—PCR的检测;另一部分关节滑膜应用HE染色方法,光镜观察关节滑膜炎性细胞。该实验结果采用SPSS13．0软件包进行相关分析。P〈0．05有统计学意义。结果：单味中药骨碎补能够影响兔膝骨关节炎模型关节滑膜中的炎性细胞因子的表达,给药组软骨中IL-1的表达明显低于模型组,差异有统计学意义（P〈0．05）;并且单味中药骨碎补还对关节滑膜中的炎性细胞有影响,治疗组（骨碎补组）以及对照组（维固力组）炎性细胞明显减少。结论：单味中药骨碎补可通过降低关节滑膜中IL-1的表达,从而保护关节滑膜免受损伤以及破坏,并且能够有效降低关节滑膜中炎性细胞的数量,说明骨碎补对膝骨关节炎有比较显著的防治效果。     

九香心痛舒胶囊对麻醉犬急性心肌缺血模型相关生化指标的影响研究

目的探讨九香心痛舒胶囊对麻醉犬急性心肌缺血模型相关生化指标作用的影响研究。方法采用结扎犬心脏冠状动脉前降支，造成急性心肌缺血模型，测定血清乳酸脱氯酶（LDH）、血清磷酸肌酸激酶（CK）和碱性磷酸酶（ALP）活性的变化。结果给麻醉犬造成急性心肌缺血模型后，LDH、CK分别与结扎前比较明显升高，而ALP未见明显的改变。施加药物后，九香心痛舒胶囊给药后不同时间段LDH与给药前比较有显著性差异（P〈0．05），提示有明显的改善作用；而不同时间段CK与给药前比较有显著性差异（P〈0．05），对ALP未见明显规律性的变化。结论九香心痛舒胶囊不同剂量组在不同时问段对LDH有明显的改善作用，但未见明显的量效关系，提示九香心痛舒胶囊具有明显的改善犬急性心肌缺血及心肌梗死的作用。