多重实时PCR快速同时检测沙门菌和志贺菌

目的 建立改良分子信标，多重实时PCR同时检测沙门菌和志贺菌的快速方法，应用于食源性致病菌的快速诊断。方法 根据GenBank公布的沙门菌侵袭性基因invA和ssaR基因，分别设计一对引物和改良分子信标探针，用同色荧光标记，用于同体系检测沙门菌。志贺菌根据ipaH基因的保守序列，设计引物和改良分子信标探针，加入沙门菌检测体系中，建立三重实时PCR一改良分子信标检测体系，应用于同时对沙门菌、志贺菌食物中毒的快速诊断和门诊肠道致病菌的检测。结果 改良分子信标一多重实时PCR反应体系DNA灵敏度为69～93fg/μl。菌液灵敏度为32～64CFU／ml或1～2CFu／PCR反应体系，无交叉反应。该反应体系同时检测134株沙门菌和67株志贺菌，均出现特异的荧光信号，两种细菌检测互不干扰。对细菌性食物中毒样本等共1100份同时进行沙门菌和志贺菌检测，569份沙门菌实时PCR阳性，其中551份沙门菌培养阳性；42份志贺菌实时PCR阳性，其中41份志贺菌培养阳性。从样品处理到检测结果仅需时间2h至1d。结论 改良分子信标-多重实时PCR检测体系快速、灵敏度高，特异性强，可用于沙门菌和志贺菌食物中毒的快速诊断，伤寒、痢疾等肠道传染病的初筛及预防医学门诊的健康人群体检，为食源性疾病的分子流行病学调查提供新的检测手段。     

骨盆三维重建及测量在直肠癌手术中的应用

目的帮助医生进行诊断、术前预测和实际手术操作,提出一种三维重建、测量的方法。方法利用直肠癌患者的CT扫描结果建立骨盆三维模型,回顾性分析97例中低位直肠癌患者的影像资料,最后进行统计学分析。结果经过对测量数据进行多因素分析,找出几组影响中低位直肠癌保肛手术关键性的解剖限制性因素。结论应用骨盆三维模型可以获得传统骨盆测量学没有提出的解剖径线和空间测量数据,能更加客观地评价骨盆的解剖因素对保肛手术乃至盆腔手术的限制性作用。     

同种异基因大鼠子宫移植细胞因子表达的研究

目的研究大鼠子宫移植中γ干扰素(IFNγ)、转化生长因子β1(TGFβ1)和白细胞介素-10(IL-10)的表达及其与排斥反应的关系。方法建立大鼠(SD→W istar)子宫异位移植模型,分为正常子宫对照组、同基因子宫移植组和异基因子宫移植组。各组大鼠分别于术后第2~6天切取移植物进行病理学检查、实时荧光定量PCR检测细胞因子mRNA表达。结果移植后第3天,异基因组组织病理表现出排斥反应并进行性加重;同基因组移植子宫无排斥现象;与对照组相比,同基因组中3种细胞因子mRNA表达均无明显差异(P>0.05);与对照组和同基因组相比,异基因组中除TGFβ1移植后第3天表达无明显差异(P>0.05),其余细胞因子均明显升高(P<0.01)。3种细胞因子表达于移植后第4或第5天达到高峰(P<0.01);IFNγ升高幅度为IL-10的4倍,TGFβ1的16倍。结论细胞因子IFNγ、TGFβ1、IL-10在SD→W istar大鼠子宫移植的急性排斥反应中有一定作用,其中以IFNγ的作用最为明显。     

超声引导下自凝刀射频治疗子宫肌瘤58例分析

目的:探讨自凝刀射频治疗子宫肌瘤的临床价值。方法:2004年2月~2005年6月选择自愿接受自凝刀射频治疗子宫肌瘤的患者58例,肌瘤68个,瘤体直径1.5~5.5 cm,在B超监视和引导下将自凝刀经阴道宫颈置入肌瘤进行射频治疗。结果:治疗后随访3个月58例、6个月50例(59个肌瘤),治疗有效率、治愈率分别为100%(58/58)、51.72%(30/58)。结论:自凝刀射频治疗子宫肌瘤是1种能保留子宫的微创技术,可重复治疗,疗效确切,操作简单,易推广应用。     

B型呼吸道合胞病毒荧光定量RT-PCR检测

目的建立B型人呼吸道合胞病毒（respiratory syncytial virus，RSV）的快速荧光定量RT-PCR检测方法。用于B型RSV实验室早期诊断与病毒核酸的定量分析。方法利用B型RSVN基因保守区设计引物和TaqMan-MGB（minor groove binder，DNA小沟结合物）探针，优化反应体系和反应条件；并对方法进行特异性、灵敏度和重复性评价；同时以10倍梯度稀释的质粒为标准品建立荧光定量RT-PCR的标准曲线，构建定量分析模型。并用该方法对100份临床呼吸道样本进行检测。结果该方法与其他呼吸道病毒均无交叉反应，检测灵敏度达1TCID50／ml 50％组织培养物感染剂量病毒滴度，临床样本中B型RSV的检测阳性率达18％。结论B型RSV荧光定量RT-PCR检测方法快速、敏感、特异，适用于B型RSV的早期诊断和核酸定量分析。     

白背叶根抗鸭乙型肝炎病毒的实验研究

目的:观察白背叶根体内抗鸭乙型肝炎病毒(duck hepatitis B virus,D-HBV)的作用。方法:采用PCR技术筛选D-HBV阳性3日龄广州麻鸭40只。将麻鸭随机分为空白对照组,白背叶根高、中、低剂量组和拉米夫定组,分别给予相应药物进行干预。用药前、用药第7、14、21天及停药第7天,取各组麻鸭静脉血,采用实时定量荧光PCR技术检测血清D-HBV DNA含量;治疗前后取肝脏组织进行病理组织学观察。结果:拉米夫定组于用药后,血清病毒水平迅速降低,但停药后存在反跳现象。白背叶根高、中剂量组分别于治疗第14、21天其血清病毒含量明显下降,低剂量组治疗期间未见明显的抑制病毒作用。停药后,白背叶根高、中剂量组与空白对照组比较仍表现出一定的病毒抑制作用。白背叶根高剂量组对肝脏炎症的改善作用较拉米夫定组明显。结论:白背叶根有抑制体内D-HBV复制的作用,其作用大小与剂量及用药时间相关;其治疗作用较拉米夫定弱,但作用维持时间长,且用药较为安全。     

Multinucleation of koilocytes is actually multilobation

In order to clarify the complete cytomorphology of cytopathic changes as a consequence of human papillomavirus (HPV) infection, we performed three-dimensional (3D) reconstruction from confocal fluorescent images. After confirming 22 HPV types using a DNA chip, we performed 3D confocal image restoration in human uterine cervical swab samples and corresponding tumor tissues. On restoration of 3D confocal images, the multinucleated feature of koilocytes was revealed to be multilobation of a single nucleus, as opposed to true multinucleation.     

通过PC机串口采集动态实时心电信号

介绍了网上心电实时监护系统，应用ATmega8型8位微处理器芯片实现了10位精度的心电AD转换．通过RS232行接口向PC机传送数据，并介绍这2部分的软、硬件设计思想。     

多层螺旋 CT 三维血管造影在肾动脉相关性疾病中的临床应用

[目的]评价多层螺旋CT（MSCT）三维血管成像技术及其在肾动脉相关性疾病中的临床应用价值。[方法]回顾性分析39例肾动脉相关性疾病病人的MSCT造影增强检查，使用GELightspeed Ultra16排CT进行螺旋薄层扫描，扫描条件：层厚1．25mm，螺距1．75：l，转速0．5s，120KV，350～400MA，扫描总时间10～15S。造影剂总量80～100mL，注药速度3．5-4mL／s。在独立工作站上进行三维肾动脉重建，使用不同的旋转轴观察肾动脉的空间解剖细节及其与肿瘤性病变的关系。[结果]全部病例三维肾动脉血管图像能充分显示肾动脉的空间关系与解剖细节，为肾动脉性疾病与畸形病人做出明确诊断，而且能准确、直观地观察肾动脉与肾肿瘤的空间解剖关系，为手术提供较好的术前评价。其中空间结构显示VR最佳，狭窄测量及血管腔内观察2D-MIP最佳。[结论]MSCT三维肾动脉成像能够准确、直观的显示肾动脉的立体解剖特点，为肾动脉相关性疾病的在诊断与治疗提供重要依据。     

自行消失的卵巢非赘生性囊肿超声表现分析

目的 分析能够自行消失的卵巢非赘生性囊肿的超声表现。方法 对超声提示为卵巢囊肿的病例进行超声复查随访，分类分析能够自行消失的囊肿的声像图表现。结果 能够自行消失的卵巢非赘生性囊肿囊内回声可为无回声、丝网状回声、类实性回声、有一条状分隔回声、有一子囊回声、云雾状回声、斑片状高回声以及有乳头状回声等；囊肿平均直径约3．7cm，平均持续时间约25天。结论 卵巢非赘生性囊肿超声表现多样，坚持定期随访不少于3个月，能提高确诊率。