脑脉通有效部位中总皂苷的含量测定

目的:建立脑脉通有效部位中总皂苷的含量测定方法。方法:采用比色法,以人参二醇为对照品,在556nm波长处测定吸光度。结果:人参二醇的检测浓度在2.03～10.15μg·mL-1范围内与吸光度值呈良好线性关系(r=0.9996);平均回收率为100.69%,RSD=1.76%(n=6)。结论:本方法操作简便、准确、灵敏、重复性好,可用于脑脉通的质量控制。     

粉花桔梗新品系的培育

粉花桔梗新品系是从紫花桔梗大田栽培群体中选择变异的粉花单株,经自交纯化系统培育而成。粉花桔梗综合性状优良,丰产性能高,粗纤维含量低,桔梗皂苷D含量高于2010版《中国药典》规定标准,抗病、抗旱,花色一致,花苞大,花期长,适于药用、食用和观赏。     

An in vitro Study on the DNA Damaging Effects of Phytochemicals Partially Isolated from an Extract of Glinus lotoides

An extract of Glinus lotoides, a medicinal plant used in Africa and Asia for various therapeutic purposes, was recently shown to cause DNA damage in vitro. To further explore the potential genotoxicity of this plant, fractionation of the crude extract was performed using reverse phase solid‐phase extraction and a stepwise gradient elution of methanol in water. Four fractions were collected and subsequently analysed for their DNA damaging effects in mouse lymphoma cells using an alkaline version of the comet assay. To identify potential genotoxic and non‐genotoxic principles, each fraction was then subjected to liquid chromatography coupled to mass spectrometry, LC‐MS/MS. 1D and 2D nuclear magnetic resonance analyses were used to confirm the identity of some saponins. Although fractions containing a mixture of flavonoids and oleanane‐type saponins or oleanane‐type saponins alone produced no DNA damage, those containing hopane‐type saponins exhibited a pronounced DNA damaging effect without affecting the viability of the cells. To conclude, even if this study presents evidence that hopane‐type of saponins are endowed with a DNA damaging ability, further studies are needed before individual saponins can be cited as a culprit for the previously reported genotoxicity of the crude extract of G. lotoides. Copyright © 2012 John Wiley & Sons, Ltd.     

丹参总酚酸及三七总皂苷配伍对缺氧复氧损伤心肌细胞的保护作用研究

目的:探索丹参总酚酸及三七总皂苷配伍对心肌细胞缺氧复氧(hypoxia-reoxygenation,HR)损伤的保护作用机制.方法:采用缺氧复氧损伤H9c2细胞模型,MTT法测定丹参总酚酸、三七总皂苷配伍对细胞活力的影响,并测定细胞培养液中乳酸脱氢酶(LDH)漏出率,评价丹参总酚酸、三七总皂苷配伍对心肌细胞的保护作用;采用Hoechst33342荧光染色观察细胞凋亡,并用流式细胞术检测不同药物干预后心肌细胞凋亡率;采用Western blot法检测凋亡相关蛋白Bcl-2,Bax,Caspase-3的表达情况;定磷法检测细胞内Na+,K+-ATPase,Ca2+,Mg2+-ATPase的变化,化学发光法检测细胞内ATP含量的变化.结果:丹参总酚酸、三七总皂苷分别在0.05 ～0.5,5 ～50 mg·L-1配伍时对缺氧复氧损伤的心肌细胞具有浓度依赖性的协同保护作用;丹参总酚酸与三七总皂苷均能减轻缺氧复氧导致的心肌细胞的凋亡并且改善心肌细胞的能量代谢,配伍后作用更为明显.结论:丹参总酚酸、三七总皂苷配伍具有协同增效作用,可通过抑制细胞凋亡和改善能量代谢对抗缺氧复氧对心肌细胞的损伤.     

HPLC-ELSD测定不同产地预知子中四种皂苷的含量

目的:采用HPLC-ELSD测定预知子中常春藤皂苷元3-O-β-D-吡喃葡萄糖基-(1→3)-α-L-吡喃鼠李糖基-(1→2)-α-L-吡喃阿拉伯糖苷(皂苷X,saponins X),常春藤皂苷元3-O-β-D-吡喃木糖基-(1→2)-α-L-吡喃阿拉伯糖苷(皂苷B,saponins B),常春藤皂苷元3-O-α-L-吡喃鼠李糖基-(1→2)-α-L-吡喃阿拉伯糖苷(皂苷PD,saponins PD),常春藤皂苷元3-O-α-L-吡喃阿拉伯糖苷(皂苷A,saponins A)的含量.方法:采用安捷伦1100手动高效液相色谱仪,色谱柱为Cosmosil-C18 ODS色谱柱(4.6mm×250 mm,5μm),ELSD检测器,流动相乙腈-0.2％甲酸水(45∶ 55),体积流量1.0 mL· min-;蒸发光散射检测器检测参数:漂移管温度98℃,氮气流量2.8 L·min-1.结果:皂苷X,皂苷B,皂苷PD,皂苷A进样量在2～10 μg线性关系良好(R2分别为0.999 0,0.999 0,0.999 1,0.999 1).平均回收率(n=6)分别为96.8％,101.9％,99.3％,100.5％;RSD分别为0.9％,1.2％,0.7％,1.3％.结论:该方法简单,分离效果好,结果准确,可用于预知子药材中皂苷X,皂苷B,皂苷PD,皂苷A的含量测定.     

太白楤木总皂苷提取物的质量标准研究

目的:建立太白楤木根皮中总皂苷含量的测定方法.方法:采用TLC薄层色谱法,以甲醇-氯仿-水(6.5∶3.5∶1)为展开剂展开后,用10％硫酸乙醇溶液显色,并在105℃下加热进行鉴别.接着以香草醛-冰醋酸法显色,以屏边三七苷为对照品,在检测波长553 nm处对太白楤木总皂苷采用紫外-可见分光光度法进行含量测定.结果:在TLC色谱中,供试品与对照品色谱相应的位置上,日光下显相同的紫色斑点;紫外灯(365 nm)下显相同的紫色荧光斑点.屏边三七苷在0.020 65 ～0.123 9 g·L-1线性关系良好(r =0.999 9),平均加样回收率为100.20％,RSD 0.88％ (n =6),太白楤木根皮中总皂苷中总皂苷含量为61.30％.结论:以太白楤木根皮总皂苷含量为主要评价指标,所建立的方法准确、简便、快速,重复性好,可作为太白楤木根皮中总皂苷含量控制方法.     

复方通络救脑促进神经细胞突触可塑性

目的: 检测中药复方通络救脑及其主要成分三七总皂苷和京尼平苷对神经突触可塑性有无促进作用。 方法: 实验分为对照组和给药组,采取细胞活力检测法,即CCK-8检测法检测药物对稳转的过表达的瑞典型突变淀粉前体蛋白(swAPP)突变的人神经母细胞瘤(SY5Y)细胞的增殖曲线的影响;通过Western blotting检测药物对于神经细胞突触相关蛋白树突棘肌动蛋白结合蛋白(drebrin)和突触后密度蛋白-95(PSD-95)的表达的变化;用神经生长因子(NGF)诱导PC12细胞长出神经突起后,检测药物对于细胞突起的作用。 结果: 复方通络救脑及其主要组成成分京尼平苷和三七总皂苷不影响过表达的瑞典型突变淀粉样前体蛋白的神经母细胞瘤(swAPP-SY5Y)的细胞增殖曲线,且复方通络救脑中京尼平苷能够显著增加swAPP-SY5Y细胞drebrin和PSD-95的表达(P<0.01),显著增加PC12细胞总突起数(P<0.01);而三七总皂苷没有相应的作用。 结论: 复方通络救脑能促进神经细胞的突触可塑性,初步断定起主要作用的成分是京尼平苷而不是三七总皂苷。     

不同显色剂对牛膝总皂苷含量测定的影响

目的: 考察不同显色方法对紫外-可见分光光度法测定牛膝总皂苷含量的影响。 方法: 采用紫外-可见分光光度法测定牛膝总皂苷含量,分别用5种方法进行显色,显色剂方法A为5% 香草醛-冰乙酸:高氯酸:冰乙酸(2:8:50),方法B为5% 香草醛-冰乙酸:高氯酸:乙酸乙酯(2:8:50),方法C为高氯酸,方法D为浓硫酸-甲醇(7:3),方法E为香草醛-浓硫酸(2:58)。以吸光度为指标,通过单因素试验考察显色时间和显色温度。 结果: 方法C和D在400~800 nm处无最大吸收;方法E最大吸收波长544 nm,但吸光度数值太小,不适合标准曲线测定;方法A和B均适合牛膝总皂苷含量的测定,最大吸收波长分别为(548±1),(554±1) nm,方法A峰型、加样回收率均优于方法B。显色时间15 min,显色温度60 ℃。 结论: 方法A为牛膝总皂苷的最佳显色方法。     

兴安升麻地上部分的提取分离工艺考察

目的:优选兴安升麻地上部分总皂苷的提取分离工艺。方法:以总皂苷含量为指标,采用分段萃取法用不同试剂萃取升麻地上部分中的有效成分,旋转蒸发回收溶剂,将正丁醇萃取物通过大孔吸附树脂柱进一步分离,并通过紫外分光光度计进行定量检测。结果:采用正丁醇萃取后得到的物质过大孔吸附树脂后,总皂苷纯度>50%。结论:通过萃取将升麻地上部分进一步分离,把有效成分按极性分段,便于后期对兴安升麻地上部分总皂苷进一步分离纯化,同时能得到较高纯度的总皂苷。     

参芪益智组分中药的质量标准研究

目的： 建立参芪益智组分中药的质量标准,为其质量标准的制定提供参考。方法： 根据不同成分采用不同的提取方法处理样品,改用不同的溶剂系统对其薄层鉴别方法进行研究。采用高效液相色谱法测定参芪益智组分中药中4种黄酮成分的含量。结果： 建立了参芪益智组分中药中阿魏酸、天麻素、淫羊藿总黄酮、人参总皂苷、黄芪总皂苷的薄层鉴别方法。参芪益智组分中药中4种黄酮成分线性方程、灵敏度、精密度、稳定性等均符合高效液相色谱法含量测定要求。结论： 所建立的方法简便、可行、灵敏、准确、专属性强,重复性好,可作为参芪益智组分中药的质量控制方法。