醋炙白芍的炮制工艺研究

目的:筛选醋灸白芍的最佳炮制工艺.方法:以紫外分光光度法测定醋灸白芍水煎液中芍药总苷的含量为指标,采用正交试验设计对醋灸白芍的炮制工艺进行优选.结果:以加醋量20%,温度130℃,加热10 min为最佳炮制工艺.结论:醋炙白芍炮制参数有实际应用意义.     

高效液相色谱法测定耳聋左慈丸中芍药苷的含量

目的　建立用高效液相色谱法测定耳聋左慈丸中芍药苷含量的方法。方法　采用C18柱 ,流动相为乙腈 水 (30∶70 ) ,流速为 1.0mL/min ,检测波长为 2 30nm。结果　芍药苷线性范围 2 0 12 0 μg /mL ,相关系数r =0 .9994 ,平均加样回收率为 99.79% ,相对标准偏差RSD为 1.5 2 % (n =6 )。结论　本法操作简便 ,准确 ,重复性好 ,可作为该制剂的定量分析方法     

HPLC法测定健脾口服液中芍药苷的含量

目的　建立健脾口服液中芍药苷含量测定方法。方法　采用HPLC法测定健脾口服液中芍药苷的含量 ,色谱柱为AlltimaC18柱 ,流动相为乙腈 水 (13∶87) ,流速为 1mL/min ,检测波长为 2 30nm ;柱温 :35℃。结果　进样量在 0 .16 5～ 6 .6 0 0 μg范围内芍药苷量与峰面积响应值呈良好的线性关系 ,r =0 .9997;平均回收率为 99.4 % ,RSD为 0 .7% (n =5 )。结论　本方法简便、准确 ,可作为该制剂的质控方法     

妇科养荣丸中芍药苷的HPLC测定

建立了HPLC法测定妇科养荣丸中芍药苷的含量.采用C18柱,乙腈-0.05mol/L磷酸二氢钾溶液(15:85)为流动相,检测波长230nm.1在0.08～0.32μg范围内线性关系良好,平均回收率99.6%,RSD为2.74%.     

高效液相色谱法测定消瘀康胶囊中芍药苷的含量

目的建立消瘀康胶囊中芍药苷的高效液相色谱测定方法.方法采用YWG-C18(4.6mm×250mm,10μm)色谱柱;甲醇-水(22:78)为流动相;流速1.0mL/min;检测波长为230nm;温度30℃;进样量10μL.结果平均回收率为99.3%,RSD=1.01%方法重现性的RSD=1.42%(n=5).芍药苷线性范围为0.21～1.05μg(r=0.9999).结论本法操作简便,结果准确,可用于消瘀康胶囊的质量控制.     

HPLC法测定健胃愈疡片中芍药苷的含量

目的:改进健胃愈疡片中芍药苷的含量测定方法.方法:采用HPLC测定健胃愈疡片中芍药苷的含量.色谱柱为ODS-C18(250×4.6mm,5μm),流动相为甲醇:水(25:70),检测波长为230nm.结果:平均回收率为98.8%,RSD=1.01%.结论:本法简便、灵敏、准确,具有实用价值.     

芍药苷对醋酸铅诱导海马神经元凋亡及Bcl-2/Bax蛋白表达的影响

目的 探讨芍药苷(paeoniflorin,PF)对醋酸铅诱导海马神经元凋亡及Bcl-2/Bax蛋白表达的影响。方法 分离培养胎鼠海马神经元细胞,细胞免疫荧光染色鉴定纯度。MTT测定海马神经元细胞活力以确定醋酸铅最适造模浓度及时间,同时筛选合适剂量PF干预海马神经元凋亡。依据MTT测定结果,分为空白组、模型组和20,40,80 μmol·L^-1 PF组干预海马神经元细胞,作用24 h后,加醋酸铅染毒,检测细胞色素C (cytochrome C,Cyt-C)含量、线粒体膜电位及细胞内Ca²⁺浓度。流式细胞仪检测细胞凋亡情况,Western blotting测定海马神经元细胞中caspase-3、cleaved-caspase-3、caspase-8、cleaved-caspase-8、caspase-9、cleaved-caspase-9、Bax、Bcl-2蛋白表达水平。结果 细胞免疫荧光染色鉴定结果显示分离培养的细胞为海马神经元细胞,且纯度较高。MTT测定结果显示醋酸铅最适造模浓度及时间为25 μmol·L^-1染毒24 h;PF剂量为20,40,80 μmol·L-1可显著改善海马神经元细胞活性,呈剂量依赖性。与空白组相比,模型组Cyt-C含量、凋亡率、细胞内Ca²⁺浓度显著升高(P<0.01),线粒体膜电位显著降低(P<0.01)。与模型组相比,40 μmol·L^-1 PF组和80 μmol·L^-1 PF组可降低Cyt-C含量、凋亡率、细胞内Ca²⁺浓度(P<0.05或P<0.01),升高线粒体膜电位(P<0.01),20 μmol·L^-1PF组可显著升高线粒体膜电位(P<0.05)。此外,一定剂量的PF可下调cleaved-caspase-3、cleaved-caspase-8、cleaved-caspase-9、Bax蛋白表达,上调Bcl-2蛋白表达。结论 PF可抑制醋酸铅诱导的海马神经元凋亡,可通过调控Bcl-2/Bax蛋白表达发挥神经保护作用。     

白芍粗提物及芍药苷对变异链球菌作用的体外实验

目的 研究白芍粗提物及其主要成分芍药苷对变异链球菌的作用。 方法 采用醇提法制取白芍粗提物,通过高效液相色谱法测定白芍粗提物的主要活性成分,分别观察白芍粗提物及其主要成分芍药苷在不同药物浓度下对变异链球菌的粘附、产酸、合成水不溶性胞外多糖以及葡聚糖转移酶(GTF)比活力等方面的影响。 结果 白芍粗提物及芍药苷对变异链球菌的体外生长最小抑菌浓度(MIC)分别为3.130和1.770 mg/mL,当两者的浓度分别为≥1.565和≥0.885 mg/mL时,有明显的抑制变异链球菌粘附、合成水不溶性胞外多糖和GTF比活力的作用(P<0.05); 当白芍粗提物浓度为3.130 mg/mL时,有明显的抑制变异链球菌产酸的作用(P<0.05),而不同浓度的芍药苷对变异链球菌产酸均无影响(P>0.05)。不同浓度白芍粗提物组和芍药苷组的水不溶性胞外多糖含量和GTF比活力之间均呈正向直线相关。 结论 白芍粗提物可抑制变异链球菌的粘附、产酸、合成水不溶性胞外多糖和GTF活性,其主要活性成分芍药苷可抑制变异链球菌的粘附、合成水不溶性胞外多糖和GTF活性,但不影响变异链球菌的产酸活动。     

Paeoniflorin ameliorates ischemic neuronal damage in vitro via adenosine A1 receptor-mediated transactivation of epidermal growth factor receptor

Aim:

Paeoniflorin from Chinese herb Paeoniae Radix has been shown to ameliorate middle cerebral artery occlusion-induced ischemia in rats. The aim of this study was to investigate the mechanisms underlying the neuroprotective action of PF in cultured rat cortical neurons.

Methods:

Primary cultured cortical neurons of rats were subjected to oxygen-glucose deprivation and reoxygenation (OGD/R) insult. Cell survival was determined using MTT assay. HEK293 cells stably transfected with A₁R (HEK293/A₁R) were used for detailed analysis. Phosphorylation of the signaling proteins was evaluated by Western blot or immunoprecipitation. Receptor interactions were identified using co-immunoprecipitation and immunofluorescence staining.

Results:

Paeoniflorin (10 nmol/L to 1 μmol/L) increased the survival of neurons subjected to OGD/R. Furthermore, paeoniflorin increased the phosphorylation of Akt and ERK1/2 in these neurons. These effects were blocked by PI3K inhibitor wortmannin or MEK inhibitor U0126. Paeoniflorin also increased the phosphorylation of Akt and ERK1/2 in HEK293/A₁R cells. Both A₁R antagonist DPCPX and EGFR inhibitor AG1478 not only blocked paeoniflorin-induced phosphorylation of ERK1/2 and Akt in HEK293/A₁R cells, but also paeoniflorin-increased survival of neurons subjected to OGD/R. In addition, paeoniflorin increased the phosphorylation of Src kinase and activation of MMP-2 in HEK293/A₁R cells. Both Src inhibitor PP2 and MMP-2/MMP-9 inhibitor BiPs not only blocked paeoniflorin-induced phosphorylation of ERK1/2 (and Akt) in HEK293/A₁R cells, but also paeoniflorin-increased survival of neurons subjected to OGD/R.

Conclusion:

Paeoniflorin promotes the survival of cultured cortical neurons by increasing Akt and ERK1/2 phosphorylation via A₁R-mediated transactivation of EGFR.     

复方白芍颗粒质量控制研究

目的 建立复方白芍颗粒的质量标准.方法 采用薄层色谱法对制剂中的白芍、泽泻进行定性鉴别,采用高效液相色谱法测定制剂中芍药苷含量.结果 薄层色谱斑点清晰,且阴性对照无干扰;芍药苷浓度在33.35～333.50μg/mL范围内与峰面积的线性关系良好,平均回收率为97.39％(RSD=1.35％,n=6).结论 所建立的方法操作简单,重复性好,可有效控制复方白芍颗粒质量.