海带多糖在高脂血症大鼠中的降血脂和抗氧化作用

目的 探讨海带多糖对高脂血症大鼠血脂的调节作用机制. 方法 健康雌性Wistar大鼠32只,应用高脂饲料喂养方法建立高脂血症动物模型,海带多糖干预治疗.血生化法检测大鼠血清甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白(LDL)、高密度脂蛋白(HDL)水平,硝酸还原酶法检测血清和肝组织一氧化氮(NO)含量,黄嘌呤氧化酶法测定血清和肝组织超氧化物歧化酶(SOD)活性,酶联免疫吸附法检测血清和肝组织中氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)水平,免疫组织化学技术检测肝细胞SOD和诱导性一氧化氮合酶(iNOS)表达. 结果 海带多糖治疗后,大鼠血清TG、TC和LDL水平较模型组显著下降,而HDL显著升高(P<0.05).肝组织匀浆ox-LDL和NO水平较模型组显著降低,而SOD活性显著升高.肝细胞iNOS表达较模型组显著降低,SOD表达显著增强(P<0.05). 结论 海带多糖可通过抗氧化机制而发挥调节血脂水平的作用.     

氧化低密度脂蛋白在尿酸致早期慢性肾脏疾病血管内皮损伤中的作用

目的：探讨氧化低密度脂蛋白（ox-LDL）在尿酸所致早期慢性肾脏疾病（CKD）血管内皮损伤中的作用。方法：30只雄性SD大鼠随机分为3组：A组（假手术组,n=10）,B组（右肾切除组,n=10）和C组（右侧肾切除＋氧嗪酸钾灌胃组,n=10）。检测血清尿酸（UA）、肌酐（Scr）、一氧化氮（NO）、内皮素-1（ET-1）、ox-LDL等指标。光镜观察血管壁病理损害。分析ox-LDL水平与UA、NO、ET-1、NO/ET-1比值的相关性。结果：（1）3组大鼠肾病理均未见明显病变,且血肌酐无明显差异,但C组血尿酸水平明显升高（P〈0.01）;（2）A组血管壁未见明显病变;C组可见内皮细胞脱落,内皮间隙增宽,细胞水肿,管壁炎症细胞聚集,血管中层平滑肌细胞增生明显,结构紊乱;B组病变与C组相似,但程度较轻。C组NO明显低下（P〈0.01）,ET-1明显增高（P〈0.05）,NO/ET-1比值明显降低（P〈0.01）;（3）单因素相关分析显示：尿酸与ET-1呈显著正相关（r=0.9374,P〈0.01）,与NO（r=-0.9462,P〈0.01）、NO/ET-1比值（r=-0.9230,P〈0.01）呈显著负相关;⑷C组ox-LDL水平显著升高（P〈0.05）,ox-LDL与尿酸（r=0.8479,P〈0.01）、ET-1（r=0.7900,P〈0.01）呈显著正相关,与NO（r=-0.7459,P〈0.05）、NO/ET-1比值（r=-0.7949,P〈0.01）呈显著负相关。结论：尿酸可致早期CKD血管内皮细胞损伤和功能紊乱,ox-LDL在其发生发展中可能起重要作用。     

美乐托宁对ox-LDL诱导的人脐静脉血内皮祖细胞增殖、凋亡及Bcl-2表达的影响

目的:探讨美乐托宁(melatonin,Mel)对氧化低密度脂蛋白(oxidized low-density lipoprotein,ox-LDL)诱导的人脐静脉血内皮祖细胞(endothelial progenitor cell,EPC)增殖、凋亡及Bcl-2表达的影响.方法:密度梯度离心法获取人脐静脉血单个核细胞,培养7 d后,贴壁细胞分成7组:对照组以RPMI1640培养液培养;ox-LDL各浓度组(共3组)分别用含5,10,20 mg/L ox-LDL的RPMI 1640培养液孵育;Mel各浓度组(共3组)分别先用含0.5,1.0,2.0 mmol/L Mel的RPMI 1640培养液培养24h,然后移去含Mel的RPMI 1640培养液,加入含10 mg/L ox-LDL的RPMI 1640培养液孵育.采用MTT法检测EPC增殖能力;流式细胞仪检测细胞凋亡率;提取细胞RNA,采用逆转录一聚合酶链式反应(RT-PCR)技术检测Bcl-2 mRNA表达;采用免疫细胞化学法检测Bcl-2蛋白表达水平.结果:ox-LDL呈浓度依赖性抑制EPC增殖,诱导EPC凋亡;在加ox-LDL(10 mg/L)前加Mel干预,EPC增殖能力较ox-LDL组明显增强,细胞凋亡率明显降低;RT-PCR和免疫细胞化学法检测显示,ox-LDL组EPC的Bcl-2 mRNA和蛋白表达明显低于对照组,Mel组明显高于ox-LDL组(P＜0.01).结论:ox-LDL呈浓度依赖性诱导EPC凋亡、抑制EPC增殖,Mel能抑制ox-LDL的上述作用,其机制与上调Bcl-2表达有关.     

原儿茶醛对ox-LDL损伤的血管内皮细胞保护作用

目的:观察原儿茶醛对ox-LDL诱导的人脐静脉血管内皮细胞株(CRL-1730)损伤的保护作用。方法:ox-LDL诱导人血管内皮细胞损伤,并以不同剂量的原儿茶醛干预24 h,用四甲基偶氮唑蓝比色法检测细胞存活数量,比色法测定细胞培养液中NO含量和NOS活性,流式细胞术测定细胞内CD40蛋白表达。结果:原儿茶醛对ox-LDL引起的CRL-1730损伤血管内皮细胞数量的减少和培养液中NO、NOS的降低有明显的抑制作用;ox-LDL可引起细胞内CD40蛋白表达增加,原儿茶醛可以抑制此作用。结论:原儿茶醛对ox-LDL诱导的血管内皮细胞损伤具有保护作用,其机制可能与CD40/CD40L抗炎途径有关。     

左归双降方对葡萄糖胰岛素低密度脂蛋白诱导损伤的血管内皮细胞ICAM-1 tPA PAI的影响

目的:观察左归双降方提取液对葡萄糖(Glu)、胰岛素(Ins)、氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)联合诱导下血管内皮细胞损伤的干预作用与作用机理.方法:以人脐带静脉内皮细胞株ECV-304为受试对象,以不同浓度的Glu、Ins、ox-LDL联合作用24h,建立了一种糖尿病血管并发症的体外内皮细胞损伤模型;并在此基础上观测左归双降方提取液(ZGSJF)对该细胞损伤模型的调节作用.各试验组细胞继续培养48h后分别检测细胞活性及其细胞培养液中的细胞黏附因子(ICAM-1)、组织型纤溶酶原激活物(tPA)、纤溶酶原激活物抑制物(PAI)的含量.结果:细胞继续培养48h后,模型组较正常组细胞活力明显下降(P＜0.01),PAI及ICAM-1含量明显升高(P＜0.01).而不同剂量的ZGSJF给药后能显著地改善细胞活力(与模型组比较P＜0.05),降低PAI及ICAM-1含量(与模型组比较P＜0.01),对tPA的影响则无显著性意义.结论:左归双降方对血管内皮细胞具有一定的保护作用,而这一作用可能是通过促进内皮细胞的纤溶功能,抑制与炎症反应相关的细胞粘附过程等途径,从而改善糖尿病血管病变的血管损伤.     

系统性红斑狼疮患者血清对氧磷脂酶-1的测定及其临床意义

目的探探讨系统性红斑狼疮患者血清对氧磷脂酶-1(PON-1)活性水平及其临床意义。方法测定48例SLE患者(33例活动期和15例非活动期)、30例健康正常者血清PON-1活性、ox-LDL等指标。结果SLE患者PON-1活性为(131.5±45.2)IU/ml,显著低于健康正常者(223.4±65.8)IU/m(lP<0.01);且SLE患者活动期PON-1活性低于非活动期,相反血清ox-LDL水平则高于非活动期,有显著性差异(P<0.05)。PON-1与ox-LDL存在负相关性(r=-0.552,P<0.001),而PON-1与HDL-C不存在相关性(r=0.173,P>0.05)。结论SLE患者血清PON-1活性下降;PON-1与血清ox-LDL水平、高脂质过氧化有关。PON-1活性下降可能是SLE早发动脉粥样硬化的一大因素。     

ox-LDL对JEG-3细胞系LOX-1和凋亡相关分子表达的调控及意义

目的 检验ox-LDL对滋养细胞中Lox-1和凋亡相关分子表达的调控,探讨ox-LDL和Lox-1与子痫前期发病的关系.方法 JEG-3细胞培养并传代;采用细胞免疫化学方法、RT-PCR和Westem-blot进行IEG-3细胞LOX-1和凋亡相关基因的检测.结果 细胞免疫化学检测到LOX-1和Caspase-3在JEG-3细胞浆及细胞膜中均有表达;加入ox-LDL继续培养24和48 h后,细胞的LOX-1和Caspase-3表达显著增强,同时加入LOX-1抑制剂角叉菜胶后,又逆转上述作用;RT-PCR与Western-blot结果一致,ox-LDL可剂量和时间依赖地诱导JEG-3细胞LOX-1、Caspase-3和Bax蛋白及mRNA的表达,下调Bcl-2蛋白的表达,LOX-1抑制剂角叉菜胶可逆转上述作用.ox-LDL对JEG-3细胞LOX-1表达的调控与Caspase-3和Bax的趋势一致,而与Bcl-2的趋势相反.结论 ox-LDL可诱导滋养细胞LOX-1的表达,并可能导致滋养细胞凋亡增加,为进一步解释子痫前期的发病机制提供了实验基础.     

番石榴叶总黄酮抑制泡沫细胞形成及LOX-1表达的实验研究

目的 研究番石榴叶总黄酮抑制泡沫细胞形成及LOX-1表达的作用。方法 建立THP-1单核-巨噬细胞源性泡沫细胞模型,根据CCK-8法测定的番石榴叶总黄酮对该细胞的安全浓度范围,将配制的番石榴总黄铜溶液在其安全范围内选取低、中、高三个剂量组,以无血清培养液的空白对照组及ox-LDL模型组为对照。采用油红O染色观察细胞内脂质堆积情况,酶偶联比色法检测细胞内总胆固醇含量,Western blot法检测LOX-1的蛋白表达水平。结果 三个剂量组细胞内总胆固醇含量均低于模型组（P〈0.05）,并随番石榴叶总黄酮浓度升高而下降;三个剂量组的LOX-1蛋白表达均低于模型组（P〈0.05）,抑制作用随剂量升高而增强。结论 番石榴叶总黄酮通过抑制LOX-1的表达,减少巨噬细胞摄取ox-LDL,抑制泡沫细胞形成,从而起到抗动脉粥样硬化的作用。     

氧化型低密度脂蛋白自身抗体及其免疫复合物与冠心病的相关性

目的：探讨氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)自身抗体及其免疫复合与冠心病之间的关系。方法：采用酶联免疫法对61例确诊的冠心病患者、116例高血压患者和123例健康对照组进行血清ox-LDL自身抗体及其循环免疫复合物的检测，并同步测定ox-LDL和血脂水平。结果：冠心病患者自身抗体IgG[21.48(17.58-29.01)]U/L和IgM[(4.71(3.88-7.06)]U/L以及ox-LDL[0．87（0．4－1．08）]mg/L均显著高于高血压组[15．93（11．12－22．26）U／L、2．54（1．17－5．05）U／L、0．32（0．16－0．61）mg/L]和健康对照组[11．12（4．70－16．57）UL、1．61（0．60－3．03）U／L、0．23（0．2－0．36)mg/L]，P均＜0．001，而循环免疫复合物[2．63（1．69－5．90）U／L]显著低于高血压组[15．71（6．25－28．74）U／L]健康对照组[12．54（8．28－23．90）U／L]，P均＜0．001。ox-LDL与其自身抗体之间的关系在各组之间存在不一致性，结论：ox-LDL自身抗体与循环免疫复合物在冠心病患者中的变化可能与ox-LDL及其自身抗体在冠状动脉硬化进程中发挥作用有关。     

SDF-1 α／CXCR4对THP-1的趋化活性及其Ox-LDL的干预作用

目的探讨基质细胞衍生因子（SDF-1α）对单核细胞的趋化作用,ox-LDL对SDF-1α趋化单核细胞的影响及其对THP-1细胞表达CXCR4的影响。方法用Transwell迁移实验来研究SDF-1α对单核细胞的趋化作用,将单核细胞或经ox-LDL处理的单核细胞加入上室,在下室加入SDF-1α孵育10h后计数各组下室迁移的细胞数。RT-PCR检测CXCR4表达变化,Western blot检测其蛋白表达变化,观察ox-LDL对THP-1细胞CXCR4表达的剂量和时间效应。结果SDF-1α呈浓度依赖性诱导单核细胞的迁移,加入CXCR4抗体可明显抑制这种作用。经不同浓度OX-LDL处理48h后的THP-1细胞再用10ng／ml SDF-1α进行趋化时,结果发现ox-LDL呈浓度依赖性的增加单核细胞的迁移,50μg／ml ox-LDL组所迁移的细胞数是对照组的11倍。THP-1细胞有基础水平的CXCR4表达,50μg／ml ox-LDL可使CXCR4的表达上调4-5倍。CXCR4上调最早在6h内发生,12h达高峰。结论SDF-1α／CXCR4参与趋化单核细胞迁移,其作用被OX-LDL加强;ox-LDL上调CXCR4表达。