A Novel Hypoxia-inducible Factor 1α Inhibitor KC7F2 Attenuates Oxygen-induced Retinal Neovascularization

PurposeKC7F2 is a novel molecule compound that can inhibit the translation of hypoxia-inducible factor 1α (HIF1α). It has been reported to exhibit potential antiangiogenic effect. We hypothesized that KC7F2 could inhibit oxygen-induced retinal neovascularization (RNV). The purpose of this study was to investigate this assumption.MethodsOxygen-induced retinopathy (OIR) models in C57BL/6J mice and Sprague-Dawley rats were used for in vivo study. After intraperitoneal injections of KC7F2, RNV was detected by immunofluorescence and hematoxylin and eosin staining. Retinal inflammation was explored by immunofluorescence. EdU incorporation assay, cell counting kit-8 assay, scratch test, transwell assay, and Matrigel assay were used to evaluate the effect of KC7F2 on the proliferation, migration and tube formation of human umbilical vein endothelial cells (HUVEC) induced by vascular endothelial growth factor (VEGF) in vitro. Protein expression was examined by Western blot.ResultsKC7F2 treatment (10 mg/kg/d) in OIR mice significantly attenuated pathological neovascularization and decreased the number of preretinal neovascular cell nuclei, without changing the avascular area, which showed the same trends in OIR rats. Consistently, after the KC7F2 intervention (10 µM), cell proliferation was inhibited in VEGF-induced HUVEC, which was in agreement with the trend observed in the retinas of OIR mice. Meanwhile, KC7F2 suppressed VEGF-induced HUVEC migration and tube formation, and decreased the density of leukocytes and microglia colocalizing neovascular areas in the retinas. Moreover, the HIF1α–VEGF pathway activated in retinas of OIR mice and hypoxia-induced HUVEC, was suppressed by KC7F2 treatment.ConclusionsThe current study revealed that KC7F2 was able to inhibit RNV effectively via HIF1α–VEGF pathway, suggesting that it might be an effective drug for RNV treatment.     

糖皮质激素与脉络膜新生血管性疾病

脉络膜新生血管(choroidal neovascularization,CNV)与眼内疾病密切相关,是引起视力严重下降的主要病理因素之一.抑制CNV生长是此类疾病当前临床治疗关键,也是该基础研究领域的核心问题.本文就糖皮质激素在眼内CNV的实验研究和临床治疗方面进行相关综述.     

Ranibizumab治疗湿性AMD的相关研究

脉络膜新生血管(choroidal neovascularization,CNV)形成是湿性AMD导致视力丧失的重要因素。大量证据表明,血管内皮生长因子-A(vascular endothelial growth factor A,VEGF-A)是湿性AMD新生血管生成和血管渗漏的重要调质。VEGF的抑制剂已在临床中应用,其中,ranibizumab是一种重组的人源化抗VEGF单克隆抗体片段,能够结合并抑制VEGF,阻止血管渗漏和新生血管的形成,抑制CNV的发生。III期临床试验结果表明,ranibizumab不仅可以延缓患者视力的降低,同时相当一部分患者出现临床有意义视力提高。而且,在治疗过程中严重不良事件发生率低。ranibizumab很有可能首次使多数AMD患者获得良好而稳定的视力。2006-06-30ranibizumab经美国食品药物管理局批准应用于湿性AMD的治疗。本文简要回顾VEGF的生物学特点,临床应用的途径,同时对ranibizum-ab临床研究结果进行总结。     

内皮抑素与眼部新生血管

眼部新生血管导致眼结构和功能的破坏,造成严重的视功能损害,是当前最难解决的眼科难题之一。内皮抑制素(endostatin,ES)是目前公认的最强的血管生成抑制因子之一,已经用于抑制眼部新生血管的实验研究,表明内皮抑制素具有强大的抗眼部新生血管作用。本文就内皮抑素的结构、功能及与眼部新生血管的相关研究进行综述。     

光动力疗法治疗脉络膜新生血管性疾病的初步临床观察

目的:观察使用维替泊芬光动力疗法(photodynamic thera-py,PDT)治疗年龄相关性黄斑变性(age-related maculardegeneration,AMD)、病理性近视和特发性脉络膜新生血管(choroidal neovascularization,CNV)等3种主要的CNV相关疾病的临床效果。方法:对96例(109眼)经临床确诊的上述CNV患者进行PDT治疗,随访1～24(平均9.4)mo。采用最佳矫正视力、荧光素血管造影、吲哚青绿血管造影、光学相干断层成像等指标,观察治疗前后患者的视功能、CNV病灶大小及渗漏情况、以及视网膜水肿变化等,评价PDT治疗CNV的疗效。结果:本组病例包括AMD42例(54眼),病理性近视17例(18眼),特发性CNV患者37例(37眼)。AMD、病理性近视和特发性CNV的平均治疗次数分别为1.2,1.5和1.2次;视力稳定和提高者各组分别为83.3%,83.3%和86.5%;CNV渗漏停止或减少者各组分别为90.7%,83.3%和89.2%:视网膜水肿减轻者各组分别为77.8%,88.9%和86.5%。除3例AMD患者出现眼部严重不良反应外,未发现其他严重不良反应。结论:PDT可有效地改善或稳定AMD、病理性近视和特发性CNV患者的视功能,控制病变进展,近期随访结果安全有效。     

VEGF siRNA对兔眼碱烧伤后角膜新生血管的抑制作用

目的:研究血管内皮生长因子小干扰RNA(VEGF small in-terfering RNA,VEGF siRNA)对兔眼碱烧伤后角膜新生血管的抑制作用。方法:普通家兔25只以碱烧伤法(1mol/LNaOH溶液)诱导角膜新生血管(CNV)生成。碱烧伤后立即以脂质体(LF2000)为载体,右眼球结膜下注射VEGF siRNA重组质粒,左眼球结膜下注射pSilencer 2.1-U6 hygro空白质粒作为阴性对照。碱烧伤后1,3,5,7,14d,形态学分析评价角膜新生血管的生长情况。结果:与对照眼相比,碱烧伤后球结膜下注射VEGF siRNA重组质粒,实验眼在各时间段(3,5,7,14d),CNV长度明显变短,面积明显变小,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:VEGF siRNA能有效地抑制碱烧伤后CNV的形成。     

经瞳孔温热疗法治疗隐匿性脉络膜新生血管

目的:对经瞳孔温热疗法(transpupillary thermotherapy,TTT)治疗隐匿性脉络膜新生血管(occult choroidal neovas-cularization,OCNV)的效果进行评价。方法:眼底荧光素血管造影(fundus fluorescence angiog-raphy,FFA)及吲哚青绿血管造影(indocyanine green angiography,ICGA)检查后确诊为单眼或双眼OCNV患者35例43眼,使用Iris810nm半导体激光进行TTT治疗,选择1.2,2.0及3.0mm直径的光斑,以光斑大小能够完全覆盖FFA及ICGA所显示的病变范围为宜,长脉冲模式,能量80~300mW,照射时间60s。结果:TTT治疗后,18/43眼(42%)视力提高,23/43眼(53%)视力无变化,2/43眼(5%)视力下降;20/43眼(47%)CNV渗漏完全停止,18/43眼(42%)渗漏明显减少,4/43眼(9%)渗漏无改变,1/43眼(2%)渗漏扩大。结论:TTT治疗OCNV效果较好,其适宜的参数及治疗机制还需进一步探讨。     

基质金属蛋白酶-9在兔角膜新生血管模型的表达

目的：研究兔正常角膜及损伤后角膜中MMP-9的表达,探讨其与角膜新生血管的关系。方法：将45只健康新西兰大白兔随机取5只,为正常对照组,余40只作角膜缝线,建立角膜新生血管动物模型,用免疫组化和图像分析研究MMP-9的平均积分光密度（MMP-9IOD）微血管计数。结果：在术后不同时间点,MMP-9IOD,微血管计数间有高度相关性（r=0．7260）。结论：MMP-9表达与角膜新生血管的形成与退化平行。     

Angiostatin基因转染对膀胱癌BIU-87细胞系生物学行为的影响

目的 探讨外源性血管抑素(angiostatin)基因在人膀胱癌BIU-87细胞中的表达及其意义。方法 将人全长angiostatin基因经脂质体包裹转染膀胱癌BIU-87细胞,行G418筛选获得转基因瘤细胞克隆,比较转基因和未转基因的瘤细胞生长特性。采用免疫荧光、免疫组化及Western blot等方法检测瘤细胞angiostatin蛋白的表达,并应用鸡胚尿囊膜血管生成实验及脐静脉内皮细胞增殖实验检测其活性。结果 外源性angiostatin基因的表达对BIU-87瘤细胞的生长并无影响。转染细胞在体外明显抑制脐静脉内皮细胞的增殖并对鸡胚尿囊膜的血管生成具有明显的抑制作用。结论Angiostatin能特异性地抑制血管内皮细胞增殖,进而抑制血管生成。     

实验性碱烧伤角膜新生血管的观察研究

目的利用碱烧伤诱导实验性角膜新生血管(CRNV)的发生,探讨定量分析CRNV和观察CRNV通透性的方法。方法取36只C57BL/6小鼠,随机分为:实验组(n=30):采用浸润l mol/L NaOH的滤纸片接触角膜5 s,诱导碱烧伤CRNV;对照组(n=6):不进行任何处理。于碱烧伤后第4、7、10、14天测量CRNV面积;第3、7、10、16、28天取眼球做切片的HE染色行组织学检查;第10天使用CD31抗体标记CRNV并计数,行荧光血管造影观察CRNV的通透性;每日观察角膜溃疡和前房积血等情况。结果实验性碱烧伤CRNV存在生长和消退的过程。无菌性角膜溃疡和前房积血较为常见,发生率分别为6.7%和10.0%。眼球切片的HE染色可观察到不同时间角膜组织的病理变化。碱烧伤后第10天,CD31抗体免疫组化标记并记数CRNV,荧光血管造影可观察到显著的CRNV渗漏。结论CD31抗体免疫组化标记、记数CRNV及联合CRNV面积测量,是CRNV定量分析较为客观的方法;荧光造影是观察和记录CRNV通透性可行的方法。