过表达DBHS家族基因可促进食管鳞癌细胞的迁移侵袭

目的 研究人类剪切蛋白(drosophila behavior human splicing,DBHS)家族基因,包括p5nrb、PSF、PSPC1基因,对食管鳞状细胞癌(以下简称食管磷癌)细胞系TE-8细胞系迁移、侵袭能力的影响。方法 构建p54nrb、PSF、PSPC1基因过表达载体,通过脂质体法转染TE-8细胞,转染48 h后qRT-PCR和Western blotting检测各组细胞p54nrb、PSF、PSPC1在mRNA和蛋白质水平的表达。细胞划痕实验及覆盖有Matrigel的Transwell小室检测食管鳞癌细胞的迁移、侵袭能力。结果 过表达p54nrb、PSF、PSPC1后,qRT-PCR和Western blotting检测证实食管鳞癌TE-8细胞中上述基因表达在mRNA水平和蛋白质水平均明显上调,细胞划痕实验及Transwell小室实验证实食管鳞癌TE-8细胞过表达p54nrb、PSF、PSPC1后,其迁移、侵袭能力增强。结论 过表达DBHS家族基因可促进食管鳞癌细胞的迁移侵袭。     

A Stable Q Compensated Reverse Time Migration Method Based on Excitation Amplitude Imaging Condition

The stability and efficiency, especially the stability, are generally concernedissues in Q compensated reverse time migration (Q-RTM). The instability occurs because of the exponentially boosted high frequency ambient noise during the forwardor backward seismic wavefield propagation. The regularization and low-pass filteringmethods are two effective strategies to control the instability of the wave propagation in Q-RTM. However, the regularization parameters are determined experimentally, and the wavefield cannot be recovered accurately. The low-pass filtering methodcannot balance the selection of cutoff frequency for varying Q values, and may damagethe effective signals, especially when the signal-to-noise ratio (SNR) of the seismic datais low, the Q-RTM will be a highly unstable process. In order to achieve the purposeof stability, the selection of cutoff frequency will be small enough, which can causegreat damage to the effective high frequency signals. In this paper, we present a stable Q-RTM algorithm based on the excitation amplitude imaging condition, which cancompensate both the amplitude attenuation and phase dispersion. Unlike the existing Q-RTM algorithms enlarging the amplitude, the exponentially attenuated seismicwavefield will be used during both the forward and backward wavefield propagationof Q-RTM. Therefore, the new Q-RTM algorithm is relative stable, even for the lowSNR seismic data. In order to show the accuracy and stability of our stable Q-RTMalgorithm clearly, an example based on Graben model will be illustrated. Then, a realistic BP gas chimney model further demonstrates that the proposed method enjoysgood stability and anti-noise performance compared with the traditional Q-RTM withamplitude amplification. Compare the Q-RTM images of these two models to the reference images obtained by the acoustic RTM with acoustic seismic data, the new Q-RTMresults match the reference images quite well. The proposed method is also testedusing a field seismic data, the result shows the effectiveness of our proposed method.     

虫草素对人肝癌细胞迁移及侵袭的机制研究

目的 研究虫草素对人肝癌细胞Bel-7402迁移和侵袭的影响,并探讨其作用机制。方法 以人肝癌细胞Bel-7402为研究对象,虫草素处理Bel-7402细胞。MTT法检测细胞活力;划痕实验检测细胞迁移能力;侵袭小室实验检测细胞侵袭能力;实时荧光定量聚合酶链反应（qRT-PCR）检测MMP-2和MMP-9 mRNA 表达情况;Western blotting实验检测MMP-2、MMP-9、ERK、p-ERK、EGFR及p-EGFR蛋白表达水平。结果 虫草素在0～80?μmol/L时对细胞活力无明显影响;而在80～640?μmol/L时,细胞活力出现下降;在320和640?μmol/L时显著降低（P?<0.05）。40和80?μmol/L虫草素均能显著抑制细胞迁移和侵袭活动（P?< 0.05）。与空白对照组比较,虫草素（40和80?μmol/L）处理Bel-7402细胞48?h后,MMP-2和MMP-9 mRNA 及蛋白表达均下降（P?<0.05）。与空白对照组比较,虫草素（40和80?μmol/L）处理明显下调p-ERK和p-EGFR蛋白表达（P?<0.05）。结论 虫草素可能通过EGFR-ERK通路介导MMP-2和MMP-9表达下调,从而调控人肝癌细胞Bel-7402的迁移和侵袭活动。     

上调Mg2+/Mn2+依赖性蛋白磷酸酶1F表达对鼻咽癌HONE-1细胞增殖和迁移的影响

目的 探讨上调Mg²⁺/Mn²⁺依赖性蛋白磷酸酶1F（PPM1F）对鼻咽癌HONE-1细胞增殖、迁移的影响,并阐明其作用机制。 方法 鼻咽癌HONE-1细胞分为pcDNA3.1组（转染pcDNA3.1质粒）和pcDNA3.1-Flag-PPM1F组（转染pcDNA3.1-Flag-PPM1F质粒）。实时荧光定量PCR（RT-qPCR）法和Western blotting法检测2组细胞中PPM1F和E-钙黏蛋白（E-cadherin）mRNA及蛋白表达水平,CCK-8法和克隆形成实验检测2组细胞增殖活性和克隆形成率,细胞划痕实验检测2组细胞划痕愈合率,Transwell实验检测2组细胞中迁移细胞数。 结果 与pcDNA3.1组比较,pcDNA3.1-Flag-PPM1F 组细胞中PPM1F mRNA表达水平明显升高（P<0.01）,且PPM1F蛋白表达量明显增加,细胞中E-cadherin mRNA和蛋白表达水平明显升高（P<0.01）,细胞增殖活性、克隆形成率和划痕愈合率明显降低（P<0.05或P<0.01）,迁移细胞数明显减少（P<0.05）。 结论 上调PPM1F表达能够抑制鼻咽癌HONE-1 细胞增殖和迁移,其机制可能与细胞间的黏附作用有关。     

miR-150-5p与NCAPG的靶向关系及其对肝细胞肝癌Huh7细胞的抑制作用

目的：探究miR-150-5p与非SMC凝聚体Ⅰ复合物亚基G (NCAPG)的靶向关系及其对肝细胞肝癌(HCC)细胞生物学功能的影响,为HCC的临床诊断和治疗提供潜在靶点。方法：通过双荧光素酶报告基因实验验证miR-150-5p与NCAPG的靶向关系。将HCC Huh7细胞根据转染质粒不同分为模拟物阴性对照(mimic NC)组、miR-150-5p模拟物(miR-150-5p mimic)组、miR-150-5p模拟物+过表达阴性对照(miR-150-5pmimic+ovNC)组和miR-150-5p模拟物+过表达NCAPG(miR-150-5p mimic+ovNCAPG)组。实时荧光定量PCR (RT-qPCR)法检测各组细胞中NCAPG mRNA表达水平,Western blotting法检测各组细胞中NCAPG蛋白表达水平,5-乙炔基-2’-脱氧尿嘧啶核苷(EdU)实验检测各组细胞EdU阳性率,流式细胞术检测各组细胞凋亡率,Transwell实验检测各组细胞中迁移和侵袭细胞数。将裸鼠分为agomiR-NC组、agomiR-150-5p组、agomiR-150-5p+过表达阴性...     

炭疽毒素受体2表达受miR-145-5p调控在胰腺癌的作用机制研究

目的：探讨炭疽毒素受体2(anthrax toxin receptor 2,ANTXR2)在胰腺癌组织和细胞中的表达、临床意义和细胞功能,验证miR-145-5p在胰腺癌细胞中调控ANTXR2的作用机制。方法：分析GEO和TCGA数据库中胰腺癌的转录数据和临床数据。通过CCK-8实验、流式细胞术、划痕实验和Transwell实验进行细胞功能验证。采用miRNA靶点预测数据库反向预测可能通过ceRNA机制抑制ANTXR2表达的miRNA,并使用双荧光素酶报告实验进行验证。结果：ANTXR2在胰腺癌组织和细胞中的表达均上调（均P<0.05）,ANTXR2上调预示着原发肿瘤等级（P<0.05）、肿瘤细胞分化等级（P<0.05）和总体生存期（P<0.05,HR=1.72）均较差。ANTXR2可以促进胰腺癌细胞增殖、迁移和侵袭（均P<0.05）。ANTXR2是miR-145-5p下游的靶标（P<0.01）,miR-145-5p可以通过抑制ANTXR2的表达抑制胰腺癌细胞增殖、迁移和侵袭。结论：ANTXR2在胰腺癌组织和细胞中过表达,促进胰腺癌细胞增殖、迁移和侵...     

Amotl2促进肝细胞肝癌血管生成拟态及EMT形成

目的:研究Amotl2对肝癌细胞迁移侵袭能力的影响及其在诱导肝癌上皮间充质转化（EMT）及血管生成中的作用。方法:将Amotl2过表达质粒和干扰质粒分别转染至肝癌细胞系HepG2和Bel7402中,Western blot检测转染前、后HepG2和Bel7402中Amotl2、EMT相关蛋白（E-cadherin、Vimentin）表达变化情况;划痕、侵袭实验检测Amotl2对肝癌细胞迁移和侵袭能力的影响;三维培养检测Amotl2对HCC细胞形成血管样结构的影响。结果:促进Amotl2表达后HepG2表现出EMT样改变,E-cadherin表达下降、Vimentin表达上升、细胞迁移侵袭和三维成管的能力增强。抑制Amotl2表达后Bel7402由间质样表型转变为上皮样表型,E-cadherin表达上升、Vimentin表达下降、细胞迁移侵袭和三维成管的能力减弱。结论:Amotl2可能通过诱导EMT促进原发性肝癌的迁移侵袭能力和血管生成拟态的形成。     

不同血瘀证亚型对小鼠移植瘤及肺转移灶4T1细胞迁移及侵袭能力的影响

目的观察不同血瘀证亚型Balb/c小鼠移植瘤及肺转移灶4T1细胞的迁移及侵袭能力。方法将9只雌性8周龄Balb/c小鼠随机分为单纯荷瘤组、寒凝血瘀荷瘤组、热毒血瘀荷瘤组,每组3只,分别造模。造模第43天处死小鼠,无菌条件下取移植瘤及肺转移灶组织,通过细胞划痕试验、Transwell迁移及侵袭试验分别检测不同血瘀证亚型移植瘤及肺转移灶中4T1细胞迁移及侵袭能力。同一证型造模组中移植瘤与肺转移灶间采用t检验比较差异,同种组织来源部位(移植瘤或肺转移灶)中三组证型造模组间采用方差分析比较差异。结果单纯荷瘤组、寒凝血瘀荷瘤组、热毒血瘀荷瘤组中,移植瘤与肺转移灶的4T1细胞细胞划痕试验结果依次为(47.5±19.8)μm比(215.8±145.7)μm、(59.0±8.5)μm比(577.3±70.5)μm、(118.8±15.2)μm比(663.4±23.8)μm,除单纯荷瘤组外寒凝血瘀荷瘤组、热毒血瘀荷瘤组肺转移灶细胞迁移距离均大于移植瘤(P0.05);Transwell迁移试验结果为(13.5±8.4)个/视野比(25.9±12.8)个/视野、(17.5±3.8)个/视野比(49.0±9.7)个/视野、(38.5±11.3)个/视野比(65.8±31.2)个/视野,差异均有统计学意义(P0.05);Transwell侵袭试验结果为(15.8±5.6)个/视野比(45.1±16.1)个/视野、(38.0±18.1)个/视野比(129.2±47.6)个/视野、(48.6±19.4)个/视野比(83.5±46.7)个/视野,差异均有统计学意义(P0.05)。移植瘤及肺转移灶中不同证型造模组组间比较差异均具有统计学意义(P0.05)。结论与移植瘤比较,同一证型造模组肺转移灶4T1细胞总体具有更强迁移及侵袭能力;不同证型造模组间比较,寒凝血瘀证肺转移灶4T1细胞侵袭力明显增强,热毒血瘀证移植瘤及肺转移灶4T1细胞迁移力较强。不同血瘀证亚型对小鼠移植瘤及肺转移灶4T1细胞迁移及侵袭能力影响存在差异。     

结直肠癌中辅酶Q10的功能及分子机制探讨

目的：探索辅酶Q₁₀(coenzyme Q₁₀,CoQ₁₀)对结直肠癌细胞增殖和迁移能力的影响及潜在分子机制。方法：使用CoQ₁₀分别处理SW480细胞和RKO细胞后,采用细胞计数和细胞划痕实验探究CoQ₁₀对结直肠癌细胞增殖和迁移能力的影响;采用流式细胞术探究CoQ₁₀对结直肠癌SW480细胞周期和细胞凋亡的影响;采用RNA-seq测序分析CoQ₁₀对结直肠癌RKO细胞系基因表达谱的影响,将差异表达基因进行GO和KEGG通路分析,最后采用定量RT-PCR验证RNA-seq结果。结果：(1)CoQ₁₀对结直肠癌细胞系SW480的细胞增殖、细胞周期、细胞凋亡和细胞迁移均无明显影响,对结直肠癌细胞系RKO的细胞增殖也无明显影响,但可抑制RKO细胞迁移。(2)CoQ₁₀处理结直肠癌RKO细胞后的RNA-seq结果表明,差异表达基因明显富集于细胞黏附分子信号通路、细胞外基质受体信号通路和胆固醇信号通...     

敲减CMTM3增强前列腺癌细胞系PC3迁移与侵袭能力

目的：应用慢病毒载体shRNA对PC3细胞中的人趋化素样因子超家族成员3（CKLF-like MARVEL transmembrane domain containing 3,CMTM3）进行敲减,以探究CMTM3对前列腺癌细胞系生物学行为改变的影响。方法： 研究分为两组进行,其中shN为未敲减CMTM3的PC3细胞系对照组,sh393为敲减CMTM3的PC3细胞系实验组。运用Western blot检测PC3细胞系慢病毒shRNA敲减CMTM3后的表达,Transwell与细胞划痕实验检测敲减CMTM3对PC3细胞系迁移能力的影响,Matrigel实验检测敲减CMTM3对PC3细胞系侵袭能力的影响。结果： 前列腺癌细胞系PC3经慢病毒敲减CMTM3后,sh393组CMTM3表达水平明显低于shN组（0.004 0±0.000 4 vs. 0.490 0±0.055 7,P<0.001）, 且sh393组侵袭（248.6±4.5 vs. 113.0± 3.3）、迁移（203.6±1.9 vs. 103.0±1.2）及迁移愈合能力（95.0±2.9 vs. 33.0±1.5）均明显强于shN组（P<0.001）。结论： 敲减CMTM3可以影响PC3细胞的迁移与侵袭能力,CMTM3下调与PC3细胞系肿瘤生物学特性的改变可能具有负相关性。