miR-7靶向缺氧诱导因子1α对肝癌细胞的影响

目的：探究微小RNA-7(miR-7)靶向缺氧诱导因子1α(HIF-1α)对肝癌细胞迁移、凋亡及干细胞特性的影响。方法 ：采用慢病毒转染肝癌细胞MGCC97H,分为对照组、miR-7模拟物组、miR-7干扰组（转染miR-7模拟物组+干扰物）、HIF-1α过表达组（转染pc-HIF1α）和共转染组（转染miR-7模拟物+pc-HIF1α）,RT-PCR检测各组细胞miR-7、HIF-1α mRNA表达量,免疫印迹检测各组HIF-1α蛋白的表达量,Transwell实验检测细胞迁移能力,流式细胞法检测细胞凋亡情况,软琼脂克隆形成实验分析其干细胞特性,荧光素酶实验验证miR-7与HIF-1α靶向关系。结果 ：miR-7模拟物组细胞HIF-1α蛋白表达、迁移率、克隆形成率低于对照组,凋亡率高于对照组;HIF-1α过表达组细胞迁移率、克隆形成率高于对照组,凋亡率低于对照组;共转染组HIF-1α蛋白表达、细胞迁移率、克隆形成率低于HIF-1α过表达组,凋亡率高于HIF-1α过表达组。结论 ：miR-7靶向HIF-1α可降低肝癌细胞迁移能力及干细胞特性,促进细胞凋亡,miR-7及HIF-1α可能是...     

microRNA-124与糖尿病肾脏疾病

microRNA(miRNA)广泛存在于真核生物体内,参与蛋白质的转录和转录后的调控.miRNA具有高度进化保守性及组织特异性,在生物的生长发育、细胞分化、疾病的发展过程中起作用.miRNA-124是microRNAs家族的重要成员,近年研究显示,miRNA-124能够作用于整合素,进而影响肾脏纤维化进程,可能作用于Rho/Rho相关蛋白激酶信号通路,起到保护肾小球滤过屏障的作用,能够作用于信号转导与转录激活因子3、Toll样受体、磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶B信号通路调节炎性反应,可能成为糖尿病肾脏疾病诊断和治疗的新靶点.     

微 RNA-21和微 RNA-146a 在结直肠肿瘤中的表达及临床意义

目的探讨结直肠肿瘤患者组织和血清中 miRNA-21和 miRNA-146a 的表达情况,并分析其临床意义。方法收集100例结直肠癌、80例结直肠腺瘤患者和65名健康对照者的内镜活检组织,同时收集其血清标本,应用实时荧光定量 PCR 检测 miRNA-21和 miRNA-146a 的表达水平,分析其表达与临床病理特征间的关系,并评估血清差异表达的 miRNA 在结直肠肿瘤诊断中的价值。组间比较采用 Mann-WhitneyU 检验和 Kruskal-Wallis 检验;Spearman 相关性检验用于分析组织和血清中 miRNA 表达的关联性。结果在结直肠癌和结直肠腺瘤患者病变组织中 miRNA-21的表达分别为8．573±0．898和7．746±1．183,显著高于健康对照者的6．160±0．835（U ＝120．129、33．230,P 均＜0．01）;在结直肠癌和结直肠腺瘤患者血清中的表达分别为1．829±0．303和1．624±0．226,也高于健康对照者的1．391±0．221（U ＝40．353、15．512,P 均＜0．01）;miRNA-21在结直肠癌患者组织中和血清中的表达均高于结直肠腺瘤患者（U＝11．384、10．189,P 均＜0．01）。miRNA-21在结直肠癌患者中的高表达与肿瘤临床分期、淋巴结转移有关;miRNA-21在结直肠腺瘤中的表达水平与病理类型有关。Spearman 分析结果示,miRNA-21在结直肠癌患者组织和血清中的表达呈正相关（r ＝0．459,P ＜0．01）。miRNA-146a 在结直肠癌患者组织中为2．556±0．351,血清中为0．249±0．038,低于健康对照者的3．428±0．328和0．279±0．053（U ＝102．134、30．111,P 均＜0．01）;其在结直肠腺瘤患者组织中为3．255±0．332,血清中为0．290±0．036,与健康对照者比较差异无统计学意义（U＝3．936、3．180,P 均＞0．05）。miRNA-146a 在结直肠癌患者组织中和血清中的表达均低于结直肠腺瘤患者（U＝73．809、21．123,P 均＜0．01）。结直肠癌患者miRNA-146a 的下降程度与肿瘤临床分期、肿瘤分化程度有关,而在结直肠腺瘤中的表达与临床特征间无明显关系。根据 ROC 曲线分析,鉴别结直肠癌与健康者,血清 miRNA-21、miRNA-146a 及二者联合检测 ROC 的 AUC 分别为0．889、0．791和0．863;鉴别结直肠腺瘤与健康者,其 AUC 分别为0．784、0．692和0．761;鉴别结直肠癌与结直肠腺瘤患者,其 AUC 分别为0．705、0．820和0．713。结论血清 miRNA-21和 miRNA-146a 的差异表达在结直肠癌的早期诊断中具有潜在的价值。     

microRNA-146a与2型糖尿病的相关性研究进展

2型糖尿病是由遗传因素和环境因素共同导致的复杂疾病,胰岛素抵抗和胰岛β细胞功能障碍是其主要的发病机制.miRNAs是一类内源性非编码小RNA,通过调控各种基因的表达广泛参与细胞增殖、分化、凋亡、代谢等生物过程.近年研究发现,miRNA-146a与糖尿病、心血管疾病、自身免疫性疾病以及肿瘤等疾病密切相关,但miRNA-146a在2型糖尿病中的作用机制尚不清楚,还需进一步明确miRNA-146a对其的作用机制.该文就miRNA-146a与2型糖尿病及其并发症之间的相关性作一综述.     

Mesenchymal Stem Cell–Derived Extracellular Vesicles Alleviate M1 Microglial Activation in Brain Injury of Mice With Subarachnoid Hemorrhage via microRNA-140-5p Delivery

BackgroundIt is documented that mesenchymal stem cells (MSCs) secrete extracellular vesicles (EVs) to modulate subarachnoid hemorrhage (SAH) development. miR-140-5p expression has been detected in MSC-derived EVs, while the mechanism of MSC-derived EVs containing miR-140-5p in SAH remains unknown. We aim to fill this void by establishing SAH mouse models and extracting MSCs and MSC-EVs.MethodsAfter ALK5 was silenced in SAH mice, neurological function was evaluated, neuron apoptosis was detected by TdT-mediated dUTP-biotin nick end labeling with NeuN staining, and expression of serum inflammatory factors (interleukin-6, interleukin-1β, and tumor necrosis factor-α) was determined by enzyme-linked immunosorbent assay. The effect of ALK5 on NOX2 expression was assessed by western-blot analysis. Targeting the relationship between miR-140-5p and ALK5 was evaluated by dual luciferase assay. Following extraction of MSCs and MSC-EVs, EVs and miR-140-5p were labeled by PKH67 and Cy3, respectively, to identify the transferring of miR-140-5p by MSC-EVs. SAH mice were treated with EVs from miR-140-5p mimic/inhibitor-transfected MSCs to detect effects of MSC-EV-miR-140-5p on brain injury and microglial polarization.ResultsALK5 silencing increased the neurological score and reduced neuron apoptosis and neuroinflammation in SAH mice. ALK5 silencing inhibited M1 microglia activation by inactivating NOX2. ALK5 was a target gene of miR-140-5p. MSC-derived EVs contained miR-140-5p and transferred miR-140-5p into microglia. MSC-EV-delivered miR-140-3p reduced ALK5 expression to contribute to repression of brain injury and M1 microglia activation in SAH mice.ConclusionsMSC-derived EVs transferred miR-140-5p into microglia to downregulate ALK5 and NOX2, thus inhibiting M1 microglia activation in SAH mice.     

新诊断2型糖尿病患者血清miR-126、VEGF水平与胰岛素抵抗的相关性分析

目的分析新诊断2型糖尿病(T2DM)患者血清微小核糖核酸-126(miR-126)、血管内皮生长因子(VEGF)水平与胰岛素抵抗的相关性。方法选取该院2018年2月至2019年4月收治的T2DM患者86例设为观察组,另选取同期体检健康者86例设为对照组。检测两组空腹血清miR-126、VEGF、总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、空腹血糖(FPG)、糖化血红蛋白(HbA1c)、空腹血胰岛素(FIns)水平,计算体质量指数(BMI)、胰岛β细胞功能指数(HOMA-β)、胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)、胰岛素敏感指数(ISI)。分析新诊断T2DM患者miR-126、VEGF水平与胰岛素抵抗的相关性。结果两组性别、年龄比较,差异无统计学意义(P>0.05);两组BMI、血清TC、TG、FPG、HbA1c、FIns水平及HOMA-IR、HOMA-β、ISI比较,差异有统计学意义(P<0.05);观察组血清VEGF水平[(523.48±145.36)ng/L]明显高于对照组[(295.45±94.46)ng/L],血清miR-126水平明显[(0.08±0.01)ng/μL]低于对照组[(0.18±0.02)ng/μL],差异有统计学意义(P<0.05);Pearson相关分析发现:VEGF与BMI、TC、TG、FPG、HbA1c、FIns、HOMA-IR呈正相关,与HOMA-β、ISI呈负相关(P<0.05);miR-126与BMI、TC、TG、FPG、HbA1c、FIns、HOMA-IR呈负相关,与HOMA-β、ISI呈正相关(P<0.05);经多因素逐步回归分析得出:影响血清VEGF表达的因素为ISI,影响血清miR-126水平表达的因素为ISI、HbA1c(P<0.05)。结论新诊断T2DM患者VEGF水平升高、miR-126水平降低,二者可能参与了胰岛素抵抗及T2DM的发生、发展。     

微小RNA-155反义寡核苷酸对乳腺癌MDA—MB-157细胞及裸鼠移植瘤的作用

目的：探讨微小RNA-155（microRNA．155,miR-155）反义寡核苷酸（antisenseoligonucleotide,AS0）对乳腺癌MDA-MB-157细胞增殖、凋亡及裸鼠移植瘤的作用。方法：设计合成化学修饰的miR-155ASO,通过Lipofectamine^TM 2000转染MDA-MB-157细胞,激光共聚焦检测转染率,real-timePCR测定转柒后miR-155表达水平的变化,CCK-8法检测细胞增殖抑制率,流式细胞仪检测细胞凋亡率,观察miR-155ASO对裸鼠成瘤能力的影响,免疫组织化学法检测瘤体组织Caspase-3的表达。结果：激光共聚焦检测转染率达80％以上。转染miR-155AS0后,miR-155表达明显下降,细胞增殖能力降低,凋亡增加。miR-155AS0能明显抑制裸鼠移植瘤生长,抑制率为52．98％,并且能显著增加Caspase-3的表达。结论：miR-155AS0能显著下调miR-155的表达水平,继而抑制乳腺癌MDA-MB-157细胞的增殖,促进其凋亡;并且通过增加靶基因Caspase-3的表达,抑制裸鼠移植瘤的生长,为miR-155作为乳腺癌治疗靶点提供了实验依据。     

miR-372调控血管生成因子AGGF1的表达并抑制血管生成

目的:研究miR-372(miR-372)对新血管生成因子AGGF1基因的表达调控?方法:通过生物信息学预测找到可能靶向调控AGGF1基因的候选miRNA;通过荧光素酶报告基因实验?荧光定量聚合酶链反应(qPCR)和Western blot检测等实验证实miR-372对AGGF1基因表达的靶向调控;通过体外血管内皮细胞成管实验检测miR-372对血管生成的影响?结果:生物信息学预测显示miR-372靶向AGGF1;荧光素酶报告基因实验证实miR-372可通过结合AGGF1基因3′-非翻译区(3′-untranslational region,3′-UTR)而抑制其表达;qPCR和Western blot实验分别表明miR-372在mRNA水平和蛋白水平下调AGGF1表达;体外血管生成实验表明miR-372所介导的AGGF1表达下调可明显抑制血管生成?结论:miR-372可通过靶向结合AGGF1基因的3′-UTR下调其表达,并抑制内皮细胞血管生成能力?     

MiR-148a inhibits angiogenesis by targeting ERBB3

MicroRNAs (miRNAs) play an important role in carcinogenesis in various solid cancers including breast can-cer. Down-regulation of microRNA-148a (miR-148a) has been reported in certain cancer types. However, the biological role of miR-148a and its related targets in breast cancer are unknown yet. In this study, we showed that the level of miR-148a was lower in MCF7 cells than that in MCF10A cells. V-erb-b2 erythroblastic leukemia viral oncogene homolog 3 (ERBB3) is a direct target of miR-148a in human breast...