miRNA-449a在肺癌组织中的表达及其检测意义

目的探讨miRNA-449a在肺癌组织中的表达及其临床应用价值。方法收集右江族医学院附属医院2011年1月1日~2013年6月30日收治的58例肺癌患者为研究对象,采用反转录荧光定量聚合酶链式反应(RT-PCR)检测miRNA-449a在肺癌组织和癌旁正常组织中的表达量,分析miRNA-449a与临床病理特征的关系,并采用荧光电子显微镜观察miRNA-449a模拟物对体外培养肺癌细胞株95D细胞凋亡的影响。结果鳞癌组和腺癌组miRNA-449a平均表达量均明显低于癌旁正常对照组(LSD-t=6.712,P=0.000;LSD-t=4.572,P=0.000),其相对表达量与瘤体大小(u=78.412,P=0.012)有关,与患者年龄(u=920.000,P=0.615)、性别(u=800.000,P=0.215)、病理类型(χ2=4.221,P=0.155)和临床分期(u=754.000,P=0.009)无关。与阴性对照组比较,miRNA-449a模拟物可明显促进肺癌细胞的凋亡,且呈剂量依赖性。结论 miRNA-449a在肺癌组织中呈低表达,可诱导肺癌细胞凋亡,发挥抑癌基因的作用,可能成为肺癌早期诊断与治疗的新分子靶标。     

miR-101在维吾尔族妇女子宫颈癌中的表达及其与COX-2的关系

目的研究miR-101与其靶基因环氧合酶-2(Cyclooxygenase,COX-2)在维吾尔族妇女慢性宫颈炎、宫颈上皮内瘤样病变Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ(CINⅠ、Ⅱ、Ⅲ)及子宫颈癌组织中的表达,以探讨miR-101及其与COX-2的关系。方法应用锁定核苷酸原位杂交技术(LNA-ISH)检测维吾尔族妇女慢性宫颈炎、CINⅠ～Ⅲ和子宫颈癌组织中miR-101的表达情况;应用免疫组化Envision两步法检测COX-2在维吾尔族妇女慢性宫颈炎,宫颈上皮内瘤样病变Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ及子宫颈癌组织中的表达情况,并进行相关性分析。结果 miR-101在慢性宫颈炎、CINⅠ～Ⅲ及子宫颈癌中的表达率分别为80%、72%、48%、24%和8%,差异具有统计学意义(χ2=37.828,P=0.000)。慢性宫颈炎组织中未见COX-2阳性表达;CINⅠ、Ⅱ、Ⅲ以及子宫颈癌组织中COX-2阳性表达率分别为12%、36%、60%、84%,差异具有统计学意义(χ2=28.846,P<0.05)。miR-101与其靶基因COX-2呈负相关性(R=-0.997,P=0.000)。结论 miR-101与其靶基因COX-2可能与子宫颈癌的发病机制有关。     

miRNA-34a和miRNA-29b在非小细胞肺癌中的表达及意义

目的 探讨非小细胞肺癌(NSCLC)患者肺癌组织标本中miRNA-34a和miRNA-29b基因的表达与临床特征及化疗疗效的相关性.方法 将已确诊的80例NSCLC患者肿瘤肺组织作为试验组(并按病理类型及TNM分期分组),同期随机选择肺部为良性疾病肺组织100例作为对照组,通过实时荧光聚合酶链反应(RT-PCR)法检测 miRNA-34a和miRNA-29b基因表达水平,并回顾性分析miRNA-34a和miRNA-29b基因表达与化疗疗效情况.结果 miRNA-34a在试验组的组织表达水平高于对照组(P<0.05);miRNA-29b在试验组的组织表达水平低于对照组(P<0.05);miRNA-34a在腺癌组与鳞癌组均明显高于其他型肺癌组(P<0.05),在腺癌组组中的表达高于鳞癌组(P<0.05),miRNA-29b在腺癌组与鳞癌组均明显低于其他型肺癌组,在腺癌组中的表达低于鳞癌组(P<0.05),miRNA-34a和miRNA-29b在肺癌组织分级、TNM分期及淋巴结转移呈密切相关性(P<0.05).miRNA-34a高表达组患者化疗有效率显著低于低表达组患者(P<0.05);miRNA-29b低表达组患者化疗有效率显著低于高表达组患者(P<0.05).NSCLC组织中miRNA-34a的表达和 miRNA-29b的表达之间呈负相关(r=-0.79,P<0.01).结论 miRNA-34a的基因表达在NSCLC中高表达,miRNA-29b的基因表达在NSCLC中低表达,它们表达水平有助于临床分期组、织学分级和淋巴结转移的判断,并且miRNA-34a低表达或者miRNA-29b高表达的患者化疗有效率高,是化疗受益的指标之一.     

九节龙皂苷Ⅰ聚合物载药胶束的制备及体外表征

目的制备九节龙皂苷Ⅰ普朗尼克F127载药胶束。方法采用成膜-水化法制备该胶束体系,通过正交实验优化处方,用透射电镜和激光粒子测定仪对胶束的粒径分布和形态进行表征,用透析法考察体外释药特征。结果最优处方制备的九节龙皂苷Ⅰ普朗尼克F127载药胶束的粒径为18.74nm,外观呈圆球形,包封率大于90%,较九节龙皂苷Ⅰ(ADS-Ⅰ)纯药具有显著的缓释效果。结论九节龙皂苷Ⅰ普朗尼克F127载药胶束的粒径小,包封率高,可显著增加所载药物的溶解性,且具有显著缓释作用,是1种具有应用前景的抗肿瘤药物给药系统。     

miR-144 靶向NF-κB受体活化因子配体蛋白调控树突状细胞分泌细胞因子

目的：本实验探讨了miRNA-144对树突状细胞（dendritic cells,DC）成熟过程中细胞因子分泌的影响及机制。方法：通过miRNA芯片比较DC成熟过程中miRNA的改变,筛选得到DC成熟过程中显著下调的miRNA-144,并在LPS刺激DC过程中发现了相同的现象;检测miR-144转染DC后相关细胞因子的改变,与信号通路活化情况;使用Targetscan预测miR-144的作用靶点为RNAKL蛋白并通过双荧光报告系统验证。结果：体外培养的DC经 LPS刺激活化后miR-144的表达下调。miR-144 拟似物转染DC后,TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-23均出现显著下降,NF-κB磷酸化水平下降。信息学分析并通过双荧光报告系统证明miR-144的靶点是RNAKL。结论：miR-144 靶向RNAKL 蛋白调控DC细胞因子分泌。     

老年直肠癌患者外周血与癌组织miR-141的表达及其临床相关性

目的 研究老年直肠癌患者外周血与癌组织微小RNA(miR)-141的表达及临床相关性.方法 75例直 肠癌患者取直肠癌组织及癌旁正常组织并抽取肘静脉血,应用实时聚合酶联法检测直肠癌、癌旁正常组织标本和 外周血中miR-141的表达水平,分析直肠癌组织和外周血miR-141的相关性,外周血miR-141与临床病理特征和临 床预后的关系.结果 (1)与健康体检者外周血或者与正常癌旁组织相比,miR-141的表达水平在直肠癌患者外 周血和直肠癌组织中均明显下调(P<0.01);(2)有淋巴结转移的患者中直肠癌组织miR-141水平与外周血 miR-141水平呈正相关(r=0.694,P<0.01),无淋巴结转移的患者中直肠癌组织miR-141水平与外周血miR-141 水平呈正相关(r=0.725,P<0.01);(3)直肠癌患者外周血miR-141表达与肿瘤分期、肿瘤分化程度和有无淋 巴结转移相关;(4)术后6个月随访显示,75例患者中有13例(17.33%)患者出现复发/转移,复发/转移患者 外周血miR-141水平为(2.64±0.34),显著低于未复发/转移患者(P<0.01).结论 miR-141在直肠癌患者外 周血中表达与在癌组织中表达变化趋势一致,可反映直肠癌的临床病理特征.     

CD4+ CD25+ CD127low/-调节性T细胞在晚期胃癌中的表达及意义

目的 研究CD4+ CD25+ CD127low/-调节性T细胞(Treg)在晚期胃癌患者外周血中的表达水平及其对化疗疗效判断的意义.方法 采用流式细胞术(FCM)检测30例晚期胃癌患者和10例健康体检者外周血中CD4+ CD25+ CD127low/-Treg的表达水平.结果 晚期胃癌患者外周血中CD4+ CD25+ CD127low/-Treg占CD4+T淋巴细胞的百分比为(10.41±2.85)％,明显高于健康体检者(5.05±1.32)％(t=8.04,P＜0.01),也明显高于化疗2周期后(7.07±1.45)％,(t=5.72,P＜0.01)和化疗4周期后(7.30±1.65)％(t=5.17,P＜0.01).晚期胃癌患者化疗2周期后外周血中CD4+ CD25+ CD127low/-Treg占CD4+T淋巴细胞的百分比为(7.07±1.45)％,与化疗4周期后(7.30±1.65)％比较,差异无统计学意义(t=0.57,P＞0.05).晚期胃癌患者外周血中CD4+ CD25+ CD127low/-Treg表达水平与患者性别、年龄、胃癌相关肿瘤抗原及肿瘤部位无相关性(P＞o.05),低分化程度与中分化程度差异无统计学意义(P＞0.05).晚期胃癌患者化疗2周期后缓解组(完全缓解+部分缓解)外周血CD4+T细胞中CD4+ CD25+ CD127low/-Treg的水平为(6.25±1.08)％与化疗2周期后未缓解组(病变稳定+疾病进展)的(7.98±1.27)％比较,差异有统计学意义(t=4.02,P＜0.01).结论 晚期胃癌患者外周血中CD4+ CD25+ CD127low/-Treg的表达水平与肿瘤缓解情况有关.     

急性白血病患儿CD4~+CD25~+调节性T细胞和NK细胞免疫作用探讨

目的观察外周血CD4+CD25+调节性T细胞(CD4+CD25+Treg)及自然杀伤细胞(na-ture killer cell,NK)在白血病患儿及非白血病患儿的不同,了解白血病患儿的免疫状态,探讨CD4+CD25+Treg细胞及NK细胞在小儿急性白血病肿瘤免疫中的意义。方法以流式细胞术检测急性白血病初诊患儿及非白血病患儿各30例的外周血CD4+CD25+Treg细胞、NK细胞的数量及比例。结果外周血CD4+CD25+CD127-细胞占CD4+T细胞的比例白血病组为(11.45±1.41)%,显著高于对照组为(6.98±1.09)%(P<0.05)。而NK细胞数量白血病组为(5.13±2.97)%,显著低于对照组为(15.06±3.91)%(P<0.05)。结论 (1)急性白血病患儿外周血CD4+CD25+Treg细胞数量升高,NK细胞数量降低,表明急性白血病患儿NK细胞免疫功能处于抑制状态。CD4+CD25+Treg细胞可能在白血病的发生、发展中起一定作用。(2)通过检测CD4+CD25+CD127-T细胞可较好的反映CD4+CD25+Treg细胞的比例,简便可行、重复性好、检测结果准确、可靠。     

Evaluation of miRNA-21 and miRNA Let-7 as Prognostic Markers in Patients With Breast Cancer

Background

Breast cancer remains one of the top threats to women’s health. The current lack of tumor markers with desirable sensitivity and specificity is a major obstacle toward the future management of breast cancer. Many studies are directed to reveal the diagnostic and prognostic potentials of circulating miRNAs in breast cancer. In this study, we attempt to evaluate the feasibility and clinical utility of circulating miRNA-21 and let-7 as prognostic biomarkers for breast cancer.