miR-152通过调节AKT-ERK信号通路对骨肉瘤细胞增殖和迁移的影响

目的:探讨miR-152对骨肉瘤细胞增殖和迁移的影响。方法:通过实时定量PCR法检测miR-152在骨肉瘤组织和细胞中的表达;在骨肉瘤细胞中进行miR-152过表达后,MTT联合克隆形成法检测细胞增殖的变化;划痕法考察miR-152对骨肉瘤细胞迁移的影响;Western blot法检测骨肉瘤细胞中AKT-ERK的表达;免疫组化方法分析骨肉瘤组织和癌旁组织中AKT-ERK蛋白的表达。结果:相比于癌旁组织以及成骨细胞,miR-152在人骨肉瘤组织和骨肉瘤细胞中表达有不同程度降低,其中在U2OS细胞中降低最为显著（P<0.01）;在U2OS细胞中过表达miR-152,72 h后细胞增殖能力明显降低（P<0.01）;同时,骨肉瘤细胞的迁移率也显著降低（P<0.01）。AKT-ERK蛋白在骨肉瘤组织和细胞中高表达,miR-152能够降低AKT-ERK表达及其磷酸化。结论:miR-152作为一种抑癌小RNA,其能够通过调节AKT-ERK通路,从而抑制骨肉瘤细胞的增殖、迁移。     

miR-148a 靶向HMGB3抑制非小细胞肺癌细胞迁移、侵袭和增强顺铂抗肿瘤效应的机制研究

目的:探讨miR-148a靶向HMGB3抑制非小细胞肺癌细胞迁移和侵袭的作用机制。方法:采用RT-qPCR和Western blot检测非小细胞肺癌组织和癌旁组织标本中miR-148a和HMGB3相对表达水平;以A549、H1299细胞为研究对象,Transwell和MTT法分别检测过表达miR-148a、敲低HMGB3和DDP干预对细胞迁移、侵袭及细胞活力的影响;TargetScan在线预测、双荧光素酶报告基因实验和Western blot验证miR-148a与HMGB3的靶向关系;miR-148a过表达或敲减HMGB3并联合DDP,Transwell和MTT法检测细胞迁移、侵袭和细胞活力。结果:非小细胞癌组织中miRNA-148a表达明显下调（P<0.05）,HMGB3在mRNA和蛋白水平表达均明显上调（P<0.05）,miR-148a与HMGB3表达呈负相关（r=-0.856 8,P<0.000 1）;过表达miR-148a或敲低HMGB3能明显抑制细胞迁移和侵袭（P<0.05）,过表达miR-148a或敲低HMGB3联合DDP干预,细胞活力明显下降（P<0.05）;TargetScan在线预测、双荧光素酶报告基因实验和Western blot检测表明miR-148a能调控HMGB3表达。结论:miR-148a在非小细胞肺癌组织中表达下调,HMGB3是miR-148a的靶基因,过表达miR-148a能抑制HMGB3表达从而抑制非小细胞肺癌细胞A549、H1299迁移和侵袭并增强顺铂抗肿瘤效应。     

MiR-183 家族在肝癌筛查中的作用

目的：系统评价肝癌循环系统及（或）组织中 miR-183 家族对肝癌的诊断价值。方法：计算机检索万方数据库、中国生物医学服务系统、中国知网、PubMed、Medline、Embase、Cochrane 临床试验数据库等,于 2010年 1 月—2016 年12 月发表的关于肝癌中（组织或循环系统）的 miR-183 家族（包括 miR-182、miR-96、miR-183）表达的文章,用 Sstate12.0 计算合并后的敏感性、特异性、阳性似然比、阴性似然比、诊断比值比以及合并的受试者工作曲线（SROC）。结果：经过筛选共得到 6 篇相关文献,分析 3 种不同 miR-183 家族成员或来源的指标,其中肝癌 497 例,各类对照组共 736 人。因为研究之间存在异质性,采用随机效应模型进行合并。合并后的灵敏度、特异度、阳性似然比、阴性似然比、诊断比值比及合并后的 ROC 面积（含 95%CI）分别为 0.76（0.70,0.84）、0.83（0.79,0.87）、4.64（3.6,5.97）,0.27（0.20,0.36）、17.22（11.12,26.67）及 0.88（0.85,0.90）。结论：miR-183 家族对肝癌具有一定诊断价值,可能作为肝癌的新型肿瘤标志物。     

miR-27a-3p在高血压性脑出血患者外周血中呈下调表达

目的探讨脑出血患者外周血血清miR-27a-3p的表达情况。方法选取31例脑出血患者(脑出血组)和11例体检健康对照者(对照组),收集临床资料,qRT-PCR法测定外周血血清中miR-27a-3p的表达水平。结果与健康对照组比较,脑出血组血清miR-27a-3p表达呈显著下调(miR-27a-3p相对表达量为0.29),脑出血组血清miR-27a-3p表达水平与血肿体积呈明显线性负相关(相关系数R=--0.502,P=0.004)。结论在脑出血患者外周血血清miR-27a-3p表达水平呈下调趋势,其表达量与血肿体积呈线性负相关关系,可能成为脑出血患者血肿体积的预测指标。     

miR-34a在复发-缓解型多发性硬化患者血清中表达情况研究

目的检测复发-缓解型多发性硬化患者在急性复发期及缓解期外周血血清miR-34a的表达情况,探讨其作为新的血清标记物的可能性,以及其血清表达情况与疾病活动的关系。方法选取2014年1月至2015年12月在哈尔滨医科大学附属第四医院神经内科就诊的复发-缓解型多发性硬化患者20例为观察组,患者均处于急性复发期且近期未接受任何治疗;患者均接受随访,在缓解期未用药物治疗(免疫调节药物等)。同时,选取年龄、性别与观察组相匹配的20例健康人作为健康组。分别采集两组患者外周静脉血,提取血清总RNA,并对miR-34a进行RT-qPCR检测验证,对观察组急性复发期和缓解期、健康组分别进行多种microRNA的相对定量分析。结果 RT-qPCR检测结果显示,观察组急性复发期与健康组比较,血清中miR-34a的含量明显降低,对照组平均表达量约为观察组急性复发期的1.91倍,差异有统计学意义(P<0.05);miR-34a在观察组缓解期的血清表达与健康组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论 miR-34a在复发-缓解型多发性硬化患者的急性复发期中表达降低,并可能具有作为复发-缓解型多发性硬化急性复发期诊断的血清生物标志物潜质。     

三阴性乳腺癌中miRNA-124表达与E-钙黏蛋白及雄激素受体的关系

目的 研究三阴性乳腺癌(Triple-negative breast cancer,TNBC)中miRNA-124(miR-124)的表达与E-钙黏蛋白(E-cadherin)及雄激素受体(Androgen receptor,AR)的关系。方法 采用RT-PCR在TNBC组织和癌旁正常乳腺组织中检测miR-124的表达,免疫组化检测TNBC中E-cadherin及雄激素受体(AR)的表达。结果 与癌旁正常乳腺组织相比,TNBC组织中miR-124表达明显降低(P＜0.05);TNBC组织中,miR-124表达与组织分级、E-cadherin表达有关(P＜0.05),与AR表达无关(P＞0.05)。结论 在TNBC中,miR-124可能通过调节E-cadherin的表达发挥抑癌作用。     

miR-100抑制肝癌细胞恶性生物学行为的分子机制

目的:研究miR-100对肝癌细胞恶性生物学行为的影响及其分子机制。方法:采用实时定量PCR检测miR-100在36例原发性肝细胞癌和对应癌旁组织中的表达及其与患者临床病理参数之间的关系;在肝癌细胞系中上调/下调miR-100的表达,检测其对肝癌细胞增殖能力及成瘤能力的影响。miRNA靶基因预测软件分析miR-100下游靶基因。结果:miR-100在肝癌组织中低表达并且与肝癌的恶性程度与患者的预后相关。过表达miR-100能够抑制肝癌细胞的恶性生物学行为;干扰miR-100促进肝癌细胞的恶性生物学行为。靶基因预测软件分析显示miR-100能够靶向IGF1R抑制该基因的表达。结论:miR-100在肝癌组织中低表达,能够抑制肝癌细胞的恶性生物学行为并且与患者的预后相关,有望成为潜在的肝癌治疗的分子靶点。     

miR-204对乳腺癌MCF-7细胞增殖及凋亡的影响

目的 探讨miR-204在人乳腺癌组织及MCF-7细胞中的表达水平及其对乳腺癌细胞增殖及凋亡的影响。方法 提取癌症和肿瘤基因组图谱（the cancer genome atlas,TCGA）数据库中浸润性乳腺癌的miR-204相关数据进行汇总,转染miR-204过表达病毒,筛选稳定转染细胞株并通过RT-qPCR检测转染率,MTT法检测过表达miR-204后乳腺癌MCF-7细胞的增殖情况,流式细胞仪检测细胞凋亡情况。 结果 miR-204在浸润性乳腺癌组织中的表达水平较癌旁组织明显下调（P＜0.001）,且与淋巴结转移和远处转移相关（P＜0.05）。过表达miR-204能够抑制乳腺癌MCF-7细胞的增殖能力（P＜0.05）;miR-204上调后,细胞凋亡率达到（34.7±1.9）%,细胞凋亡能力明显增强（P＜0.001）。结论 miR-204可抑制乳腺癌细胞增殖并介导细胞凋亡。