小鼠肾脏缺血-再灌注损伤miRNAs差异表达谱研究

目的  筛选小鼠肾脏缺血-再灌注损伤（IRI）差异性表达的微小核糖核酸（miRNAs）,为进一步深入阐明肾脏IRI发生、发展的分子机制奠定基础。方法  应用微型动脉夹夹闭小鼠双侧肾动脉制备急性肾缺血损伤模型,将15只小鼠分为IRI组和假手术组（E组）,IRI组再分为A组（缺血时间45 min,再灌注时间24 h）、B组（缺血时间25 min,再灌注时间24 h）、C组（缺血时间45 min,再灌注时间4 h）、D组（缺血时间25 min,再灌注时间4 h）,每组3只。采用肾脏组织形态学改变和肾功能评估结果来鉴定各组小鼠的IRI程度;采用miRNAs芯片聚类分析对小鼠IRI特定缺血时间（25、45 min）和再灌注时间（4、24 h）下肾脏差异性表达差异表达的miRNAs进行筛选鉴定;采用实时定量逆转录-聚合酶链反应（qRT-PCR）对小鼠IRI后差异表达miRNAs芯片miR-695与miR-145进行验证。结果  肾脏组织形态学改变和肾功能评估结果显示成功建立IRI模型。与假手术组相比,肾脏IRI组共检出71种差异性表达显著的miRNAs,其中30种下调表达,41种上调表达。qRT-PCR法检测结果表明,以E组特定miRNAs的表达量标准化为1,miR-695及miR-145在肾脏IRI组的相对表达量分别为11.82和0.31（均为P＜0.05）,与芯片结果基本一致。结论  肾脏IRI后,miRNAs表达谱发生差异性改变,这些差异性表达的miRNAs将可作为肾脏IRI的分子标志物而具有潜在的临床及科研应用价值。     

不同治疗方法对骨质疏松性胸腰椎压缩骨折椎体力学稳定性影响的有限元分析

目的采用有限元分析探讨不同治疗方法治疗骨质疏松性椎体压缩骨折（osteoporotic vertebral compression fracture，OVCF）对脊柱力学稳定性变化的影响。方法选择2020年1月—2021年6月收治的10例胸腰椎OVCF患者，其中5例行微创手术治疗（手术组），5例行保守治疗（保守治疗组）；另选择5例健康志愿者作为正常对照（正常对照组）。3组研究对象年龄及性别差异均无统计学意义（P>0.05）。手术组及保守治疗组于治疗前后行骨折椎体及邻近节段CT扫描，正常对照组行T₁₂～L₂ CT扫描检查。将CT扫描数据导入Mimics 10.01软件，构建三维有限元模型；将正常对照组模型与既往相关文献测量结果进行比较验证有效性后，测量各组不同运动状态下脊柱结构应力及活动度（range of motion，ROM）。结果 经验证研究构建的三维有限元模型有效。治疗后在不同运动状态下，3组结构应力比较差异均有统计学意义（P<0.05）。治疗前，手术组和保守治疗组各向ROM均低于正常对照组（P<0.05），保守治疗组和手术组差异无统计学意义（P>0.05）；治疗后，正常对照组和手术组各向ROM均高于保守治疗组（P<0.05），手术组与正常对照组差异无统计学意义（P>0.05）。结论 对于OVCF患者，采用微创手术治疗可以获得较好效果，与保守治疗相比，能提高脊柱稳定性，可以作为一种首选治疗方法，有助于改善患者预后。     

奥沙利铂通过调控miRNA-7-5p/RAF-1促进胃癌SGC-7901细胞凋亡的研究

目的探讨奥沙利铂如何调控MAPK通路,抑制胃癌细胞的增殖。方法 NCBI检索文献,利用TargetScan、StarBase和miRBase数据库,进行GO分析与KEGG通路富集,找到相关miRNAs,预测靶基因。应用Real-time PCR、MTT、Hoechst33258、流式细胞术、细胞划痕实验、Western blot等方法分析人胃癌SGC-7901细胞的增殖、细胞周期、侵袭及蛋白表达情况。结果胃癌细胞中miR-7-5p显著低表达,RAF1与miR-7-5p存在互靶关系。miR-7-5p mimics与奥沙利铂均可促进SGC-7901细胞的凋亡,提高G1期细胞百分率(P<0.05),降低侵袭、迁移速度。caspase3、caspase9蛋白表达升高,Bcl-2/Bax比值降低(P<0.05)。结论过表达mi R-7-5p与奥沙利铂均可促进胃癌SGC-7901细胞的凋亡,提示奥沙利铂可能通过上调mi RNA-7-5p促进SGC-7901细胞的凋亡,降低侵袭、迁移速度。     

miR-96与miR-103在肝癌组织中的表达及其与预后的关系

目的探讨miR-96与miR-103在肝癌组织中的表达及其与预后的关系。方法选取122例肝细胞癌患者作为本研究对象。聚合酶链式反应检测miR-96和miR-103表达水平,采用单因素和多因素Cox回归模型,探讨肝癌患者中位生存时间的危险因素并建立预测模型。结果肝癌组织中miR-96和miR-103相对表达水平均显著高于癌旁正常组织;肝癌组织中miR-96和miR-103的表达与肿瘤直径、淋巴结转移、临床分期及分化程度均有关(均P<0.05),而与性别、年龄及合并肝硬化等无关(P>0.05);所有患者随访60月,中位生存时间为37.8月。单因素分析结果显示:肝细胞癌患者中位生存时间与肿瘤直径、淋巴结转移、TNM分期、病理分化程度、miR-96和miR-103表达水平差异均有统计学意义(均P<0.05)。多因素分析结果显示:TNM分期为Ⅲ～Ⅳ、低分化、淋巴结转移、miR-96和miR-103高表达是肝癌患者中位生存时间独立危险因素。结论肝癌组织中miR-96和miR-103的高表达是患者预后差的独立影响因素,可作为原发性肝癌患者预后评估指标。     

LINC01018通过miR-297调控胃癌HGC-27细胞的增殖、凋亡及放射敏感性

目的:探讨长基因间非编码RNA(long intergene non-coding RNA,LINC)01018是否通过抑制miR-297调控胃癌HGC-27细胞的增殖、凋亡及放射敏感性.方法:收集于青海省第五人民医院接受手术的胃癌患者(21例)及化疗抵抗胃癌患者(19例)的癌组织和癌旁组织,以qPCR检测胃癌组织、化...     

急性髓系白血病患者血清miR-370、miR-203的表达及临床意义

目的:探讨microRNA-370 (miR-370)、microRNA-203(miR-203)在急性髓系白血病(AML)患者血清中的表达情况,并分析其临床诊断和预后意义.方法:选取AML患者57例为实验组,健康体检者21例作为对照组.采集各组人员的空腹静脉血,采用实时荧光定量PCR法检测各组miR-370、miR2...     

靶向抑制miR-155增加骨髓瘤细胞对化疗药物的敏感性

目的:探讨靶向抑制miR-155对骨髓瘤细胞化疗敏感性的影响,并研究其分子作用机制.方法:利用qRT-PCR测定人骨髓瘤细胞株及耐药株中miR-155的表达水平;利用LipofectamineTM 2000将miR-155 inhibitor和阴性对照转染至人骨髓瘤耐药细胞株中;利用MTT法检测转染后人骨髓瘤耐药细胞对...     

miR-4324与Talin2在乳腺癌中高表达

目的 探讨miR-4324对踝蛋白2(Talin2)调控和乳腺癌细胞的影响及临床意义。方法 利用免疫组化法检验Talin2在乳腺癌组织（BCT）和对应癌旁乳腺组织（PCBT）的表达,结合病理资料分析Talin2与乳腺癌预后及病理特征间的关联;qRT-PCR法测定miR-4324在BCT和PCBT的表达;人乳腺癌细胞株（SKBR-3）体外培养,分为Control对照组（正常培养)及相关转染组（转染相关片段）：miR-4324 mimics组;miR-4324 inhibitor组;miR-4324 NC组;si-Talin2组;miR-4324 inhibitor+si-Talin2组。通过细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭实验,检测SKBR-3的生物学活性改变;通过qRT-PCR及Western-blot实验测定Talin2的表达;利用荧光素酶活性实验验证miR-4324对Talin2靶向表达;利用Transwell回复实验验证miR-4324调控Talin2影响SKBR-3细胞的迁移能力。结果 Talin2在BCT中的表达高于PCBT,并与淋巴结转移、HER-2的高表达有关（P<0.0...     

微小RNA-29a通过沉默信息调节因子2相关酶类1基因调控肝细胞脂肪变性的机制

目的 探讨人肝细胞株L02脂肪变性时微小RNA-29a(miR-29a)的表达变化及其靶向沉默信息调节因子2相关酶类1(silent mating type information regulation 2 homolog-1,Sirt1)调节脂肪肝细胞脂肪沉积的机制.方法 采用油酸和棕榈酸混合物诱导建立非酒精性脂肪肝...