丙种球蛋白和维生素C对实验性自身免疫性心肌炎作用的研究

目的：探讨丙种球蛋白（IVIG）和不同剂量维生素C（VitC）对实验性自身免疫性心肌炎（EAM）的保护作用。方法：Balb／c小鼠52只，随机分为6组：空白组不予任何处理；其余小鼠分别于第1天和第7天在双测腹股沟皮下注射充分乳化的猪心肌肌凝蛋白，剂量为每次每只100μg；从免疫的当天开始给每只小鼠腹腔注射所给药物。小剂量VitC组：150mg／kg·d^-1 VitC；大剂量VitC组：300mg／kg·d^-1 VitC；IVIG组：1g／kg·d^-1 IVIG；IVIG＋VitC组：1g／kg·d^-1 IVIG和150mg／kg·d^-1 VitC；对照组：与干预组等量的生理盐水。小鼠于第21天给予称重，麻醉后处死，并摘眼球取血，用Elisa法测定血清肿瘤坏死因子α（TNF—α）水平；取心脏、脾脏和肾脏分别称重，得心脏、脾脏和肾脏与体重之比（C／W、S／W、R／W）；脾脏在肉眼观察后作病理切片和H—E染色。心脏分为三部分：一部分作病理切片和H—E染色，一部分作冰冻切片，在荧光显微镜下用直接免疫荧光法测定心肌组织中沉积的IgG水平，一部分作电镜检查。结果：（1）心脏的病理改变：大、小剂量VitC组心肌炎性细胞的浸润及心包钙化有所减轻；IVIG组和IVIG＋VitC组心肌偶有淋巴细胞浸润，无心包钙化。（2）脾脏的病理改变：除空白组外，其余脾脏均明显增大，IVIG组和IVIG＋VitC组更是明显，镜检表现为红髓充血和白髓增生。（3）心脏、脾脏、肾脏与体重之比：各干预组C／W明显低于对照组；各干预组和对照组S／W明显高于空白组，IVIG组和IVIG＋VitC组S／W明显高于大、小剂量VitC组；R／W各组无差异。（4）TNF—α水平：大、小剂量VitC组的TNF—α水平略低于对照组，IVIG组和IVIG＋VitC组的TNF—α水平明显低于对照组。（5）心肌的免疫荧光检测：对照组比较粗的荧光条带主要集中在心肌间质，大、小剂量VitC组荧光的密度和强度有所降低，而IVIG组和IVIG＋VitC组的荧光条带增宽，在心肌间质中呈宽大的条索状分布，亮度明显增强。（6）心肌的电镜检测：对照组心肌肌丝排列紊乱，肌节断裂严重，线粒体肥大，并出现空泡变性；大、小剂量VitC组病变比对照组有所减轻；IVIG组和IVIG＋VitC组肌丝排列紊乱明显减轻，肌节断裂比对照组减少，线粒体基本正常。结论：IVIG和VitC对EAM都有一定的保护作用，可以减轻心脏的病理改变，抑制TNF—α的产生；但IVIG或IVIG＋VitC作用更为明显，并可刺激机体的免疫反应，增加心肌中IgG的沉积。     

益寿饮颗粒对衰老动物模型免疫功能的影响

目的探讨益寿饮颗粒剂对衰老动物模型免疫功能的影响。方法模型大、小鼠各60只，按20只分组，分为生理盐水对照组、益寿饮小剂量组和益寿饮大剂量组。各组连续灌胃30d，停药后小鼠摘取眼球取肝素抗凝静脉血，大鼠自尾静脉取血，测IL-1α，IL-2，IL-6，RBC—C3bRR，RBC-ICR以及外周血T淋巴细胞亚群。结果大、小剂量组与对照组比较，IL-1α，IL-2，IL-6水平明显升高，RBC—C3bRR结合率明显升高，RBC—ICR结合率明显下降，CD3^＋，CD4^＋淋巴细胞的比值明显升高，CD8^＋淋巴细胞的比值明显降低，各项指标均具有统计学意义。结论益寿饮颗粒提高衰老动物模型T淋巴细胞增殖和产生白介素-1（IL—1）、白介素-2（IL-2）、白介素-6（IL-6）的能力，增强红细胞膜RBC—C3bRR活性及粘附IC的能力，影响外周血T淋巴细胞亚群分类的水平，影响外周血T淋巴细胞亚群的数量、活性及亚群细胞之间的比例，调节T细胞的免疫功能，改善机体免疫调节功能。     

局部环孢霉素A对去势雄兔干眼模型疗效观察

目的观察去势雄兔泪液分泌、泪膜稳定性改变和结膜、泪腺病理组织学变化以及局部应用环孢霉素A的治疗效果。方法健康成年雄兔18只,随机分为正常组、干眼组和治疗组,每组6只。后两组行双侧睾丸及附睾切除制作干眼模型。治疗组去势后4周给予1%环孢霉素A点双眼,分别于去势前和去势后1、2、3、4、6、8、12周检测各组Shirmer试验、泪膜破裂时间、虎红染色;同时应用光镜进行结膜、泪腺的病理组织学观察。结果实验6周后治疗组泪液分泌增加,泪膜破裂时间延长,与干眼组相比有显著性差异(t=9.08,P<0.01;t=6.93,P<0.01)。治疗组泪腺及结膜组织中淋巴细胞浸润明显减少。结论去势后雄兔睾酮水平明显低下是造成干眼的原因之一,局部环孢霉素A治疗对该型干眼有效。     

珍香胶囊治疗子宫内膜异位症作用机制的初步研究

目的探索中药珍香胶囊治疗大鼠子宫内膜异位症的机制。方法采用自体子宫移植方法建立大鼠子宫内膜异位症模型。4周后，将大鼠随机分组进行药物治疗（珍香胶囊组、内美通组、空白对照组）。治疗4周后，免疫组化方法检测大鼠异位内膜组织的雌激素（ER）α和β受体、血管内皮生长因子（VEGF）、芳香化酶（Aromatase）。ELISA方法检测大鼠血清、腹腔液中白介素（IL）-6、VEGF、肿瘤坏死因子（TNF）α。结果疗效：珍香胶囊能够抑制、破坏异位内膜的增长，其作用与内美通相似。ER—α、ERβ、VEGF、IL-6、Afomatase在对照组及各用药组大鼠的移植组织中均有表达，各组之间无明显差异（P〉0．05）；ELISA检测各组大鼠血清、腹腔液中VEGF、IL-6、TNF—α水平，均未见阳性表达。结论珍香胶囊治疗大鼠子宫内膜异位症可能并不影响异位病灶组织的雌激素受体、血管内皮生长因子、芳香化酶，不影响大鼠血液、腹腔液的各种因子，其确切治疗机制目前尚不清楚。     

SD大鼠肥胖动物模型的建立

目的 建立营养性肥胖大鼠动物模型.方法 选用出生3～4周龄SD大鼠,用自制并经改进的高脂饲料喂养,分别于喂养后第5周和第7周,观察大鼠体重、身长,计算Lees指数,并与普食组进行平行比较分析.结果 喂养7周后,高脂组大鼠体重达到233.8±20.8 g,而普食组大鼠仅为167.7±21.5 g,Lee指数前者也高于后者(P＜0.05);高脂组内脏脂肪重量为33.5±4.6 g,高于普食组(15.7±2.8 g)(P＜0.05).结论 成功建立了SD大鼠肥胖动物模型,为肥胖等代谢综合征相关疾病的研究提供了研究平台.     

HCV非结构蛋白NS5A基因的斑马鱼肝脏表达模型

目的建立HCV非结构蛋白NS5A基因在斑马鱼肝脏特异表达的模型,研究HCVNS5A的体内作用机制并初步探讨HCVNS5A对肝病理标志基因表达的影响。方法克隆肝基因表达调控序列——斑马鱼脂肪酸结合蛋白基因增强子序列（eFABP）和HCV非结构蛋白基因NS5A序列,利用CMV启动子序列,构建HCVNS5A基因和报告基因绿色荧光蛋白基因eGFP在肝脏共表达的基因构件pFC-5AiR。经细胞转染实验验证所建构件的报告基因DsRed表达红色荧光蛋白后,将该基因构件线性化并经显微注射导入斑马鱼胚胎;通过荧光显微镜观察和整体原位杂交技术对目的基因NS5A的表达进行定位,验证其肝脏特异性表达。采用RT-PCR方法和westernblot方法对HCVNS5A基因的转录和翻译水平进行检测;并检测肝脏病理相关的标志基因的转录水平变化。结果细胞转染实验证明基因构件pFC一5AiR的报告基因DsRed能够在肝癌细胞Huh7中表达;斑马鱼胚胎注射该基因构件后在肝脏能够观察到红色荧光蛋白基因DsRed的表达;RT-PCR和westemblot结果显示HCV基因NS5A能够在斑马鱼体内正确表达;原位杂交结果进一步证明了NS5A的表达集中在斑马鱼肝脏内。进一步RT-PCR检测表明HCVNS5A在斑马鱼体内的表达可导致一些肝代谢和纤维化相关基因的上调,如Adiponectin、LDLR、Argsyn、TGF-β和HMGR等,推测NS5A在肝脏脂肪病变和纤维化中具有一定作用。结论成功建立了斑马鱼肝脏表达HCVNS5A的模型;初步数据表明HCVNS5A在斑马鱼体内的表达与部分肝代谢和纤维化标志基因的异常表达相关;该模型可以用于HCVNS5A的体内病理机制的研究。     

3D打印教学模具在医学影像本科教学中的初步应用

目的 探讨3D打印教学模具在医学影像诊断学本科教学中的应用价值。方法 实验组采用3D打印教学模具联合PPT授课完成医学影像诊断学理论授课,对照组采用传统PPT方式授课,利用理论考试、手绘影像解剖图像及教学质量问卷调查的方式评估医学影像诊断学教学效果。 结果 实验组理论考试成绩、绘图测试成绩均高于对照组,影像解剖空间理解能力均对照组明显提高。教学质量问卷调查医学生对3D打印教学模具质量、新教学方法认同,课堂气氛活跃,授课满意度有提高。 结论3D打印教学模具联合PPT教学授课可改善医学生空间解剖结构理解能力,提高教学质量。3D打印技术在医学影像诊断学本科教学中具有应用价值。     

The regenerative potential of fibroblasts in a new diabetes‐induced delayed humanised wound healing model

Cutaneous diabetic wounds greatly affect the quality of life of patients, causing a substantial economic impact on the healthcare system. The limited clinical success of conventional treatments is mainly attributed to the lack of knowledge of the pathogenic mechanisms related to chronic ulceration. Therefore, management of diabetic ulcers remains a challenging clinical issue. Within this context, reliable animal models that recapitulate situations of impaired wound healing have become essential. In this study, we established a new in vivo humanised model of delayed wound healing in a diabetic context that reproduces the main features of the human disease. Diabetes was induced by multiple low doses of streptozotocin in bioengineered human‐skin‐engrafted immunodeficient mice. The significant delay in wound closure exhibited in diabetic wounds was mainly attributed to alterations in the granulation tissue formation and resolution, involving defects in wound bed maturation, vascularisation, inflammatory response and collagen deposition. In the new model, a cell‐based wound therapy consisting of the application of plasma‐derived fibrin dermal scaffolds containing fibroblasts consistently improved the healing response by triggering granulation tissue maturation and further providing a suitable matrix for migrating keratinocytes during wound re‐epithelialisation. The present preclinical wound healing model was able to shed light on the biological processes responsible for the improvement achieved, and these findings can be extended for designing new therapeutic approaches with clinical relevance.     

大鼠实验性视网膜光损伤中的视细胞凋亡

目的 进一步探讨视网膜光损伤的发病机制。 方法 20只Wistar大鼠分为实验组、对照组,分别在光照后12,24,36小时摘除眼球,视网膜组织行HE染色和核苷酸末端转移酶介导的DUTP缺口翻译法(TdT-mediated dUTP nick end labelling method,TUNEL)标记凋亡细胞。 结果 光照后12小时,视杆细胞外节出现少量空泡变性;24小时后,外核层出现明显的细胞核破碎、浓染和DNA裂解;36小时后,视杆细胞内、外节溶解,外核层大量细胞核丢失。 结论 视细胞凋亡是大鼠实验性视网膜光损伤的重要机制之一。 (中华眼底病杂志, 1999, 15: 167-169)     

EDWARD COTLIER AND ROBERT WEINREB, EDITORS Retinoblastoma in Transgenic Mice: Models of Hereditary Retinoblastoma

Retinoblastoma, the most common intraocular malignancy in childhood, has served as a paradigm for the study of genetic mechanisms of oncogenesis. The retinoblastoma susceptibility gene RB1 was the first tumor suppressor gene to be cloned, and genetic and molecular biologic studies of this tumor have greatly expanded the understanding of the mechanics of tumorigenesis. Human retinoblastoma has essentially no naturally occurring animal counterpart. The development of transgenic murine models of retinoblastoma have created an experimental tool for manipulation of a tumor gene system in vivo. These models have also enabled studies of new therapeutic modalities. This review outlines the development of the transgenic murine models of retinoblastoma, together with the genetic mechanisms of retinoblastoma origin. Current therapeutic innovations developed by means of the transgenic models are described.