基于新一代测序筛选急性心肌梗死患者血清外泌体miRNA的差异表达谱

目的 分析基于新一代测序筛选急性心肌梗死患者血清外泌体miRNA的差异表达谱,阐明该病与血清外泌体miRNA的相关性。方法收集郴州市第一人民医院心内科2020年1月～2021年12月急性心肌梗死患者和正常体检者的血液样本各200例,提取并鉴定外泌体、总RNA,测序分析miRNA表达谱,运用qRT-PCR对测序结果进行验证。对比急性心肌梗死患者和正常体检者的外泌体标记CD63和CD81表达、总RNA鉴定结果、miRNA的差异表达谱、qRT-PCR检测结果。结果 外泌体标记CD63和CD81的测定结果显示,急性心肌梗死患者和正常体检者均能检测到CD63和CD81,提示CD63和CD81均为外泌体标记蛋白;急性心肌梗死患者和正常体检者的OD260/OD280比值均处于1.8～2.1之间,提示总RNA的质量较高,可进行下一步实验检测;经过新一代测序筛选,检测出急性心肌梗死患者和正常体检者血清外泌体miRNA的差异表达谱共89个,其中包括上调63个,下调26个;对三个增加倍数较大的miRNA(miR-1、miR-133a、miR-208a)进行qRT-PCR检测,结果显示急性心肌梗死患者miR-...     

化痰逐瘀法对尿酸性肾病模型大鼠肾小管间质PAI-1 mRNA表达的影响

目的:从肾小管间质PAI-1的表达入手,进行化痰逐瘀法对尿酸性肾病模型大鼠肾小管间质PAI-1 mRNA表达影响的实验研究。方法:RT-PCR法。结果:各组大鼠PAI-1 mRNA含量分别为,正常组41.65±15.03,模型组72.87±11.96,中药治疗组34.16±12.91,西药治疗组49.22±9.19。结论:化痰逐瘀方药可降低尿酸性肾病模型大鼠肾间质PAI-1 mRNA水平,从而提高PA活性,促进纤维蛋白及细胞外基质(ECM)降解,延缓肾间质纤维化的进展。     

急性髓系白血病全外显子组测序基因突变特点及其与疗效的关系

目的探讨急性髓系白血病(AML)患者全外显子组测序(WES)基因突变特点及其与疗效的关系。方法回顾性分析2014年12月至2019年9月安徽医科大学第二附属医院收治的30例AML患者资料, 总结WES结果及疾病类型、疾病分型、遗传学预后分层、疗效等情况, 比较不同临床特征和遗传学预后分层患者突变类型及突变频率。结果 30例AML患者中26例(86.7%)至少发生1个基因突变, 其中突变频率>10.0%的基因依次为NRAS、RUNX1、TET2、CEBPA、IDH2、ASXL1, 这些突变基因的功能涉及信号通路、转录因子、表观遗传、RNA剪接及其他生物学功能, 19例(63.3%)在突变方式上呈现为多种组合的联合突变。在年龄、性别、疾病类型、疾病分型及遗传学预后分层各组中突变率差异均无统计学意义(均P>0.05)。融合基因阳性8例中突变7例, 平均突变频率175.0%(14/8);融合基因阴性22例中突变19例, 平均突变频率213.6%(47/22);两组间突变频率差异有统计学意义(P=0.001)。持续缓解14例中突变11例, 平均突变频率157.1%(22/14);复发...     

慢性粒细胞白血病酪氨酸激酶抑制剂耐药的研究进展

慢性粒细胞白血病(CML)是一种骨髓造血干细胞克隆性增殖形成的恶性肿瘤。随着对疾病认识的提高以及新型药物的面市, 90%以上的CML患者可以获得长期生存, 然而仍有少部分患者耐药。文章分析了应用酪氨酸激酶抑制剂(TKI)治疗CML患者发生耐药的机制, 以及ABL激酶区突变的特征。     

Rett综合征1例

<正>1临床资料患儿,女,21个月,主因诊断孤独症3个月,运动发育停滞伴倒退1个月于2021年1月14日就诊邯郸市儿童医院。3个月前患儿因唤名无反应伴清醒期频繁双眼上翻就诊于河北省儿童医院,初步诊断为孤独症,自行回当地县医院进行康复训练治疗,双眼上翻症状明显减少。1个月前患儿双手功能退化,不能定向抓握伴震颤,精细运动不能,伴拍手、掐指、绞手等重复刻板动作出现,易激惹,尖叫样抗拒,步态逐渐不稳,未予特殊治疗。     

B(A)亚型一家系的血清学及分子遗传学分析

目的:分析罕见的B(A)亚型一家系的血清学及分子遗传学特征,探讨其发生机制及输血策略。方法:通过标准血清学方法对先证者及其家庭成员进行ABO血型血清学检测,通过PCR技术对先证者及其家庭成员的ABO基因第6、7外显子进行测序分析,同时对BA.02等位基因携带者进行单倍型分析,通过家系分析调查其遗传方式。结果:血型血清学显示先证者正反定型不符,正定型与AwB或者B(A)亚型血清学正定型表现相符,反定型为B型。ABO基因测序结果显示,先证者第7外显子在B.01基因的基础上发生c.700C>G杂合突变,符合BA.02等位基因特征,单倍型分析确认先证者基因型为BA.02/O.01.02。家系分析显示BA.02等位基因从父亲遗传至先证者再到女儿而非自然突变。结论:该B(A)亚型家系中共发现5例BA.02等位基因携带者,其血清学表现存在一定差异,BA.02等位基因的分子遗传基础来源于ABO基因第7外显子c.700C>G突变,在该家系中表现为稳定的顺式遗传。     

骨肉瘤组织CD74的表达及其与患者预后的关系

目的:探讨CD74在骨肉瘤组织的表达及其与患者预后的关系。方法:将手术切除的骨肉瘤新鲜组织11例(原发病灶7例、复发病灶2例、肺转移病灶2例)分别解离成单细胞悬液,建立单细胞RNA测序文库并检测CD74 mRNA的表达,采用t分布随机邻居嵌入方法分析不同骨肉瘤组织单细胞CD74 mRNA的表达。83例骨肉瘤患者手术切除的原发病灶组织标本制备成组织芯片,采用免疫组化方法检测CD74蛋白的表达并分为CD74蛋白低表达和高表达组,采用Kaplan-Meier法绘制生存曲线并用Log-rank检验比较CD74蛋白高表达和低表达组生存曲线的差异,采用COX回归分析影响骨肉瘤患者预后的因素。结果:骨肉瘤原发病灶组织CD74 mRNA的表达程度最高。年龄、Enneking分期和有无肺转移与CD74蛋白的表达有关(P<0.05)。CD74蛋白高表达组患者的生存情况差于低表达组(P<0.001)。CD74蛋白高表达[HR(95%CI)为3.044(1.202～7.711)]和有肺转移[HR(95%CI)为2.877(1.192～6.946)]是骨肉瘤患者预后的危险因素。结论:CD74可能与骨...     

二代测序技术在感染性疾病诊断中的应用进展

目前全球感染性疾病现状严峻,但感染病原体大多仍不明确,病原体的快速测定对临床医师指导临床用药非常重要.然而,目前的诊断方法在许多方面都是有限的,如检测范围、耗时、特异性和灵敏度.传统病原检测方法包括微生物培养、镜检、抗原/抗体的免疫学方法、鉴定、药敏在感染控制中发挥着重要作用.检测病原体特异核酸序列的 PCR方法和基因...     

新生儿人双埃柯病毒的检测及遗传特性分析

目的:了解人双埃柯病毒(human parechovirus,HPeV)在新生儿中的流行情况.方法:采集新生儿血液、粪便及鼻咽分泌物样本各95份,共计285份样本.将其中45份新生儿粪便样本分为5组,利用病毒宏基因组学方法进行文库构建,再经高通量测序检测HPeV.通过Geneious软件拼接获取HPeV全基因组,并对该...     

良恶性胆道梗阻患者胆汁16S rRNA测序及菌群差异分析

目的 了解良性胆道梗阻(包括胆总管结石、胆总管狭窄等)初发与复发及恶性胆道梗阻胆汁菌群的分布情况、丰度及多样性,为良恶性胆道梗阻的形成及发展提供依据。方法 连续选取36例南京医科大学第二附属医院2017年3月至2018年11月因胆道梗阻行ERCP手术的患者,在其行ERCP术注入造影剂前抽取胆汁6～7 mL,通过lllumina平台对样品16S rRNA进行Paired-end测序,利用PCA分析、PLS-DA分析、α多样性分析、β多样性分析等,来对比分析良恶性胆道梗阻患者胆汁菌群组间及组内差异。结果 恶性胆道梗阻的患者胆汁微生物区系丰度增加,而首次ERCP和梗阻复发的ERCP良性患者胆汁菌群多样性差异不显著。良恶性胆管梗阻的患者胆汁细菌组成成分无显著差异。三组差异最大的分别为氏菌属、互养菌门和链球菌属。结论 胆道梗阻患者ERCP后胆道菌群的变化不一定与复发性胆道梗阻相关,但对恶性胆道梗阻的形成有一定的影响。