血清微小 RNA-33、微小 RNA-122水平与冠心病病人 Gensini积分的相关性分析

目的 探究血清微小RNA(miR)-33、miR-122水平与冠心病病人Gensini积分的相关性.方法 以随机抽签法选取2014年1月至2015年12月在南阳市第一人民医院行冠脉造影术的200例冠心病病人为冠心病组,并根据病变涉及冠脉支数将其分成单支、2支、3支病变组,Gensini评分计算冠脉病变严重程度;另外对照组120例.采用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(qRT-PCR)检测冠心病组和对照组血清中miR-33和miR-122表达水平,采用Pearson分析法分析血清miR-33和miR-122水平与Gensini积分的相关性,采用logistic多重回归分析冠心病发生的危险因素.结果 与对照组相比,冠心病组病人在年龄、性别、腰臀比、血清肌酐异常和冠心病家族史方面无差异(P>0.05),冠心病组病人吸烟情况、高血压病史、糖尿病病史比例均显著高于对照组(P<0.05),血清三酰甘油、低密度脂蛋白胆固醇(LDL)水平、血清中miR-33、miR-122水平显著上调(P<0.05);冠心病组中,2支组、3支组miR-33水平分别为(0.48±0.07)、(0.62±0.13),miR-122水平分别为(5.19±0.32)、(5.63±0.24),Gensini积分分别为(22.49±7.03)分、(65.57±15.32)分,均较单支组(0.37±0.04)、(4.89±0.56)、(9.43±3.68)分显著升高(P<0.001),且均随病变支数增加而增加,两两比较差异有统计学意义(P<0.001);Pearson结果 显示,miR-33、miR-122水平与冠心病病人Gensini积分均呈正相关(r=0.706、0.458,P<0.05);logistic回归结果 显示,血清LDL含量、miR-33、miR-122水平及年龄是冠心病的独立危险因素(OR=1.862,95％CI:1.359～2.57;OR=4.157,95％CI:2.597～6.654;OR=4.196,95％CI:2.362～7.453,OR=1.824,95％CI:1.213～2.454).结论 血清miR-33、miR-122水平是评价冠心病的独立危险因素,miR-33、miR-122水平均随着Gensini积分增加而增加,可能与冠心病严重程度有关.     

MicroRNA-122-5p、microRNA-33a-3p在胃癌患者中的表达及与临床病理特征和预后的关系

目的 探究胃癌患者血清microRNA-122-5p(miR-122-5p)、microRNA-133a-3p(miR-133a-3p)mRNA相对表达量与临床病理特征及预后的关系.方法 采集胃癌患者血清标本94例,以相同例数的健康体检者的血清样本作为对照.采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-qPCR)技术检测血清m...     

MiR-122通过靶向SIRT1抑制肝癌细胞的增殖、迁移和侵袭

目的?探讨微小RNA-122（microRNA-122, miR-122）通过靶向沉默信息调节因子1（silent information regulator 1, SIRT1）对肝癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响。方法?用实时荧光定量PCR（real-time quantitative PCR, RT-qPCR）法检测肝癌组织和细胞中miR-122和SIRT1 mRNA表达水平；用生物信息学和双荧光素酶报告基因分析并验证miR-122和SIRT1靶向关系。培养肝癌细胞HepG2，将其分为空白对照组（control组）、miR-122过表达阴性对照组（miR-NC mimic组）、miR-122过表达组（miR-122 mimic组）、miR-122过表达和SIRT1过表达阴性对照组（miR-122 mimic+pcDNA组）、miR-122过表达和SIRT1过表达组（miR-122 mimic+pcDNA-SIRT1组）。用细胞计数试剂（cell counting kit-8, CCK-8）和5-乙炔基-2’脱氧尿嘧啶核苷分析各组细胞增殖情况；划痕愈合实验和Transwell实验分析各组细胞迁移和侵袭能力；用Western blot法分析各组细胞中增殖、迁移和侵袭相关蛋白p53、细胞周期蛋白D1、E-钙粘蛋白、N-钙粘蛋白和波形蛋白及SIRT1蛋白表达水平。结果?MiR-122表达水平在肝癌组织和细胞中下调，SIRT1 mRNA表达水平在肝癌组织和细胞中上调（P＜0.05）。MiR-122负靶向调控SIRT1表达（P＜0.05）。过表达miR-122抑制HepG2细胞增殖、迁移和侵袭，降低SIRT1、细胞周期蛋白D1、N-钙粘蛋白和波形蛋白蛋白水平，升高p53和E-钙粘蛋白蛋白水平（P＜0.05）。然而，SIRT1过表达可部分逆转过表达miR-122对HepG2细胞的作用（P＜0.05）。结论?MiR-122通过负靶向调控SIRT1抑制肝癌细胞增殖、迁移和侵袭。     

miR-122-5p靶向KDM2A对骨髓间充质干细胞成骨分化的影响

目的 探讨miR-122-5p靶向组蛋白去甲基化酶2A（histone demethylation protein 2A, KDM2A）对骨髓间充质干细胞成骨分化的影响。方法 体外培养人骨髓间充质干细胞（bone marrow mesenchymal stem cell, BMSC），利用qRT-PCR和Western blot方法检测miR-122-5p和KDM2A对BMSC成骨相关指标（OPN、OCN和RUNX2）表达情况的影响；茜素红染色和碱性磷酸酶染色检测miR-122-5p和KDM2A对BMSC钙沉积和碱性磷酸酶活性的影响；双荧光素酶实验验证miR-122-5p和KDM2A之间的结合关系；miR-122-5p inhibitor和si-KDM2A共转染研究两者对BMSC成骨分化的影响。结果 miR-122-5p mimic和si-KDM2A能够促进BMSC成骨相关基因的表达水平、钙结节沉积及碱性磷酸酶活性，miR-122-5p和KDM2A两者之间存在靶向结合关系，且miR-122-5p能够靶向抑制KDM2A表达，进而促进BMSC成骨相关基因的表达水平、钙结节沉积及碱性磷酸酶活性。结论 miR-122-5p靶向抑制KDM2A表达，进而促进BMSC成骨分化。