HPLC-Q-TOF-MS鉴定注射用益气复脉冻干粉中皂苷类成分

目的:采用高效液相色谱-电喷雾质谱联用技术(HPLC-Q-TOF-MS)鉴定注射用益气复脉冻干粉中皂苷类成分,为后续该制剂皂苷类成分的定量研究及其药效物质基础研究提供参考。方法:分析人参皂苷Rg1,Re,Rb1的质谱裂解规律,结合HPLC-Q-TOF-MS鉴定注射用益气复脉冻干粉中皂苷类成分。结果:人参皂苷Rg1,Re,Rb1的质谱裂解主要有2条途径,分别为(1)依次丢失所有的配糖基直到形成稳定的去质子化母核;(2)配糖基的碎裂形成特征性碎片离子。在此质谱裂解规律的基础上,鉴定了注射用益气复脉冻干粉中21个皂苷类化合物,除了人参皂苷Rg1,Rb1,Re,Rc,Rd,Rf,Rg3及三七皂苷R1外,其他13个皂苷类化合物首次在益气复脉冻干粉中报道,同时通过文献对比初步鉴定了五味子甲素。结论:利用HPLC-Q-TOFMS鉴定了益气复脉冻干粉中大部分含量较高的皂苷类成分,为后续该制剂的深入研究奠定了物质基础。     

益气复脉口服液质量标准研究

目的:测定益气复脉口服液主要成分红参中人参皂苷Rg1、Re、Rb1的含量,以便更好进行药品质量控制。方法:采用高效液相色谱法测定红参中人参皂苷Rg1、Re、Rb1的含量。结果:人参皂苷Rg1在0.1972~2.958μg范围内,人参皂苷Re在0.1021~1.5315μg范围内,人参皂苷Rb1在0.2534~3.801μg范围内线性关系良好,平均回收率分别为99.99%、98.92%、99.46%,RSD分别为0.92%、1.15%、0.75%。结论:方法简便易行,重现性好,可以用于益气复脉口服液的质量控制。     

中药三七化学成分的 HPLC/ESI-MS分析

目的建立分析中药三七的HPLC-UV-MS方法, 鉴定三七的化学成分.方法色谱柱: Phenomenex Luna C18 柱 (250 mm×4.6 mm ID, 5 μm); 流动相:0.005%甲酸水溶液(A) 和0.005%甲酸乙腈溶液(B), 梯度洗脱;紫外检测波长范围:195-400 nm; 采用正负离子检测模式.结果三七成分获得了良好的分离与检测.通过与对照品的保留时间、正负离子质谱比较, 鉴定了14个成分, 根据正负离子质谱数据和文献, 分析推断了41个成分, 其中, 野三七皂苷-H、野三七皂苷-E、竹节参皂苷-L5、丙二酰基人参皂苷-Rg1、以及三七皂苷-J、-A、-R1、-G、-R2和人参皂苷-Rh3的异构体为首次在三七中发现.结论本方法灵敏度高、分离度好, 适合三七成分的鉴定.本结果有助于进一步对三七进行活性成分研究及质量控制.     

人参总皂苷对血管紧张素Ⅱ所致乳大鼠心肌细胞肥大的抑制作用

目的 探讨人参总皂苷(TG)对血管紧张素 (Ang Ⅱ) 所致心肌细胞肥大的抑制作用及其可能的机制。方法 培养3 d的乳大鼠心肌细胞加入TG 50, 100和200 mg·L^-1,同时加入AngⅡ 0.1 μmol·L^-1,作用48 h后行HE染色测定细胞直径,Bradford法测定蛋白质含量;Fura-2/AM负载检测细胞内游离钙离子浓度(_i);实时PCR法检测心肌细胞心房利钠因子(ANF),钙调神经磷酸酶(CaN)和细胞外信号调节激酶1(ERK1)mRNA的表达;Western蛋白质印迹法检测CaN的α-亚基(CnA)和促分裂原活化的蛋白激酶磷酸酶1(MKP1)蛋白的表达。结果 在AngⅡ的作用下,心肌细胞直径由(32±8)μm增加至(79±17)μm,蛋白质含量由每个细胞的(416±9)pg增加至(541±16)pg,ANF mRNA表达由34±5上调至268±36;_i明显升高,CaN和ERK1 mRNA以及CnA蛋白表达显著上调。TG 50, 100和200 mg·L^-1使AngⅡ所诱导增大的细胞直径分别缩小15.3%, 37.7%和51.2%(P<0.05),并使AngⅡ所增加的细胞蛋白质含量分别减少4.0%, 15.6%和19.4%,_i显著下降以及 ANF, CaN和ERK1 mRNA表达和CnA蛋白表达明显下调(P<0.05),而MKP1蛋白表达显著升高(P<0.05)。结论 TG对AngⅡ诱导的心肌细胞肥大具有明显抑制作用,其分子机制可能与抑制CaN和ERK信号转导通路有关。     

人参的化学成分及药理活性的研究进展与展望

对人参化学成分、人参与西洋参的鉴别方法、人参皂苷的代谢及人参的药理研究的新进展给予综述并对人参的研究作一简要展望     

基于高分离度和高色谱峰纯度的红参UPLC指纹图谱研究

采用UPLC建立红参指纹图谱。采用Waters Acquity BEH C18(2.1 mm×50 mm,1.7μm)色谱柱进行分离,乙腈-水为流动相,梯度洗脱,检测波长203 nm。通过对22批红参进行测定,建立了红参的UPLC指纹图谱,并定义了26个共有峰。采用对照品比对,指认了其中的11个共有峰,它们分别是人参皂苷Rg_1、人参皂苷Re、人参皂苷Rf、人参皂苷Rh1、人参皂苷Rg_2、人参皂苷Rb_1、20(S)-人参皂苷F1、人参皂苷Rb_2、人参皂苷Rb3、20(S)-人参皂苷Rg_3、20(R)-人参皂苷Rg_3。其中的20(S)-人参皂苷Rg_3和20(R)-人参皂苷Rg_3这一组差向异构体是红参的特征成分,它们不仅可以用于区分红参与人参,同时也可用于红参炮制的过程控制。采用"中药色谱指纹图谱相似度评价系统"对22批红参UPLC指纹图谱进行了相似度评价,结果 18批样品的相似度大于0.9。与文献报道的红参指纹图谱测定方法比较,该研究所建立的方法具有高效、专属性强、分离度高、色谱峰纯度高、方法简单易行的特点,可用于人参类药材的品种鉴定和质量控制,并为上述药材质量标准的提升提供了理论依据。     

近红外光谱法测定注射用益气复脉(冻干)中的10种人参皂苷

目的:利用近红外光谱法快速测定注射用益气复脉(冻干)中10种人参皂苷的总量.方法:用HPLC分别测定60批样品中10种人参皂苷的总量,运用偏最小二乘法(PLS)建立50批测定值与NIR光谱之间的校正模型,并对10批样品的含量进行预测.结果:运用一阶导数+多元散射校正的预处理方法,选择波段为4246.8～4602.2,5 446.8～6 102.6 cm-1,最佳维数为9时,建立的定量模型准确性好,R2(决定系数)和RMSECV(内部交叉验证均方差)分别为94.2,0.186;对10批样品的预测值与HPLC测定值之间的RMSEP为0.234.结论:近红外光谱法能快速对注射用益气复脉中的10种人参皂苷的含量进行预测,方法简便、精密.     

人参皂苷Rh_2脂质纳米粒的制备表征及冰片对其抗肿瘤活性的协同作用研究

制备人参皂苷Rh2脂质纳米粒,并考察其协同冰片的体外抗肿瘤活性。借助正交设计优化工艺,采用超声辅助溶剂挥发法制备人参皂苷Rh2脂质纳米粒,并对其包封率、载药率、粒径分布、Zeta电位、形态、体外药物释放行为等进行表征,MTT法初步考察其协同冰片的抗肿瘤活性。运用优化工艺制备的纳米乳颗粒圆整均匀,形态良好,3批平均包封率为(77.3±2.5)%,载药率为(7.2±0.2)%。,体外具有明显的缓释特征,96 h累计释放52.42%;人参皂苷Rh2纳米粒作用24,48 h对脑胶质瘤C6细胞体外增殖作用的IC50分别为22.33,11.46μmol·L-1,纳米粒配伍冰片后IC50为16.36,8.04μmol·L-1,并呈现浓度依赖性。     

中西医结合防治经动脉化疗栓塞术后综合征的研究

目的 观察人参皂甙及小剂量糖皮质激素防治经动脉化疗栓塞术(transcatheter arterial chemoembolization,TACE)后综合征的效果。方法 采用随机、双盲对照方法,将80例原发性肝癌患者分为4组,每组20例。A组用安慰剂,B组用地塞米松,C组用人参皂甙,D组用地塞米松加入参皂甙。观察TACE后临床症状、理化指标等变化。结果 地塞米松加人参皂甙可显著降低恶心、呕吐、发热等症状的发生率及症状持续的中位时间,并具有缓解骨髓抑制的作用。结论 地塞米松加人参皂甙可有效防治TACE栓塞后综合征。     

人参皂苷对胃癌术后化疗患者血清VEGF的影响

目的研究人参皂苷对胃癌术后患者血清血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)浓度的影响,评价人参皂苷对胃癌患者的治疗作用。方法以门诊浅表性胃炎患者30例为正常组,42例胃癌患者术后采用FOLFOX4方案化疗为对照组,另外52例胃癌患者术后除采用FOLFOX4方案化疗外,同时服用人参皂苷Rg3为实验组。分别比较正常组、对照组、实验组术前、术后1、3、6个月的血清VEGF浓度,并比较同一组别在不同时间点的血清VEGF浓度变化,并比较对照组及实验组术后6个月肿瘤复发情况以及复发患者与未复发患者血清VEGF浓度的差异。结果胃癌患者术前血清VEGF浓度显著高于正常组(P<0.01),对照组术后血清VEGF浓度显著下降,但仍显著高于正常组(P<0.05),而实验组术后6个月基本降至正常人群水平,显著低于对照组(P<0.05)。实验组术后6个月复发率为5.77%,显著低于对照组14.29%的复发率(P<0.05)。结论人参皂苷Rg3可明显降低胃癌患者术后血清VEGF浓度,抑制胃癌细胞的生长,并呈浓度、时间依赖关系,并降低胃癌术后患者的复发率。