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981.
重组人骨形态发生蛋白-2/7融合基因的构建及其在大肠杆菌中的表达和初步活性测定 总被引:7,自引:0,他引:7
构建重组人骨形态发生蛋白-2/7融合体, 研究其在大肠杆菌中的表达及生物学活性。利用DNA 重组技术,将编码人骨形态发生蛋白-2 (BMP-2) 成熟肽的0.36 kb 基因片段与编码人骨形态发生蛋白-7 (BMP-7) 成熟肽的0.44kb 基因片段连接,得到重组人骨形态发生蛋白-2/7 融合基因; 经测序鉴定后,将其克隆到表达载体pBV222中,转化大肠杆菌DH5α, 温度诱导表达。表达蛋白经初步纯化后测定其对培养小鼠成骨样细胞增殖、分化及碱性磷酸酶活性的影响。克隆质粒转化的工程菌,经42℃诱导4~6 h 后,高效表达重组人骨形态发生蛋白-2/7, 在SDS-PAGE上出现一新的蛋白带, 分子量约29 ku,约占菌体总蛋白的20% ,表达蛋白以包涵体的形式存在,经初步纯化、裂解、复性后的BMP-2/7 蛋白具有促进成骨样细胞分化、增殖及增加碱性磷酸酶活性的作用。BMP-2/7 融合基因的构建和表达,可能提供一种全新的具有诱导成骨作用的蛋白 相似文献
982.
GCK,HK2基因微卫星多态标志与NIDDM的关系 总被引:2,自引:0,他引:2
应用PCR技术对100例NIDD患者和86例正常人进行GCK,HK2基因微卫星多态标与NIDDM关系的研究。结果:NIDDM患者GCK基因中的1,1及2,2型频率均明显高于正常对照组,2,1型明显低于正常对照组;HK23种基因型频率在两组均无差异。结果表明:GCK基因与NIDDM有关而HK2基因与NIDDM无关联。 相似文献
983.
目的探讨具有不同潜在转移能力的黑色素瘤细胞恶性表型的演进及其侵袭转移的机制。方法采用细胞培养,p53蛋白免疫组化,PCR-SSCP检测;酶活性分析,流式细胞术检测。结果人类黑色素瘤细胞中存在有p53基因的突变,瘤细胞表面671kDa层粘连蛋白受体(LN-R)的荧光阳性率和全部细胞的平均荧光强度大小顺序为:WM451>WM983A>WM1341B>WM35。MMPs的产生情况:早期WM35不产生MMPs,WM1341B仅产生72kDa(MMP-2),不产生92kDa(MMP-9);进展期WM983A和远处转移瘤株WM451均产生72kDa和92Kda。其侵袭、转移的潜能与其产生或诱导产生的MMPs的能力和其表面67kDaLN-R的表达水平密切相关。结论p53基因突变;MMPs的产生和细胞表面67kDaLN-R的高表达是人黑色素瘤细胞侵袭转移能力获得的关键因素。 相似文献
984.
急性白血病患者MGMT基因突变的研究 总被引:1,自引:0,他引:1
目的研究甲基鸟嘌呤-脱氧核糖核酸-甲基转移酶(MGMT)基因突变与急性白血病发病的关系。方法应用聚合酶链反应-单链构象多态性(PCR-SSCP)技术对62例急性白血病中MGMT基因进行了突变分析。结果MGMT基因突变在急性白血病中为14.5%。结论急性白血病中存在MGMT基因突变,其在急性白血病的发生与发展中起到一定作用。 相似文献
985.
目的观察76例乳腺病变组织中nm23-H1及突变型P53基因的表达情况,分析其与乳腺癌生物学行为及淋巴结转移的关系。方法应用SP免疫组织化学方法检测76例乳腺病变组织中nm23-H1及突变型P53蛋白表达。结果nm23-H1基因在56例乳腺癌中表达率为44.64%,10例乳腺纤维瘤均阳性,10例纤维囊性病9例阳性,后二者均高于乳腺癌中阳性率(P<0.005,P<0.01);P53在乳腺癌中阳性率35.71%,在所有良性乳腺疾患中均阴性(P<0.025)。同时发现nm23-H1表达与乳腺癌组织分化程度及淋巴结转移呈负相关(P<0.025,P<0.05),与病理组织类型无关;P53表达与乳腺癌淋巴转移正相关(P<0.05),与组织类型及分化程度无关;nm23-H1与P53表达呈负相关(P<0.05);另外,nm23-H1表达缺失与P53的阳性表达在乳腺癌淋巴结转移上有协同作用。结论nm23-H1的表达缺失及P53的阳性表达提示乳腺肿瘤恶性度高、淋巴转移潜能大,二者联合检测对乳腺癌患者预后的评价更为全面可靠。 相似文献
986.
为证实肿瘤多项耐药基因( M D R1) 产物 P G P170 与膀胱癌化疗失败及复发的关系,利用免疫组化方法对72例膀胱癌进行了研究。发现膀胱癌术后丝裂霉素膀胱灌注化疗失败者的 P G P170 阳性率及强阳性率均明显高于初发膀胱癌,并且高分级肿瘤的 P G P170 阳性及强阳性表达均高于低分级肿瘤。通过本实验可以认为膀胱癌化疗效果如何与膀胱癌组织中 M D R1 产物的量有关。 相似文献
987.
目的:探讨反义BCR和ABL融合基因(BCR/ABL融合基因)寡核苷酸体外抑制K562细胞的作用及机制。方法:采用K562细胞培养,观察反义BCR/ABL寡核苷酸体外对K562细胞数、台盼蓝拒染率及克隆形成等的影响。结果:经反义BCR/ABL寡核苷酸b3a2(ASb3a2)处理后培养8d的K562克隆抑制率达6069%,液体培养中细胞数从24h开始较对照组减少,细胞存活率从8h开始即较对照组明显下降,BCR/ABL寡核苷酸b2a2(ASb2a2)及无义寡核苷酸对K562细胞数和存活率无明显影响;3种寡核苷酸对HL60细胞数和存活率也无影响。结论:ASb3a2对K562细胞有序列特异性的抑制作用。ASb3a2的这种抑制作用可能在于它诱导K562细胞的凋亡。 相似文献
988.
采用新近发展的cDNA代表性差异分析法筛选鼻咽癌中不表达的或表达降低的cDNA序列。结果显示:有9个与已知基因高度同源的cDNA序列。通过对这些已知基因的结构和功能分析,发现有与细胞骨架成分相关的基因:αactinin,ezrin和细胞角蛋白13;直接与瘤基因和抑瘤基因相互作用的基因:鲨烯合成酶和TRIP1基因;直接参与DNA合成以及调控基因转录和翻译的基因:TAFⅡ68和组蛋白H10;另外还有人类补体因子B及类转运RNA合成酶的基因。这些基因大多具有相当于抑瘤基因的功能。从而进一步说明鼻咽癌的发生是多基因相互作用的结果。 相似文献
989.
用 R T P C R 检测了28 例急性白血病患者 W T1 表达水平。结果显示:19 例 W T1 表达阳性,阳性率679 % ;其中16 例 A N L L 中有11 例表达阳性,12 例 A L L 有8 例表达阳性。表明 W T1 在急性白血病中有高度表达,可作为一种新的检测标记物,在白血病疗效观察、判定预后及 M R D 研究中有重要意义。 相似文献
990.
采用改良的PCRRFLP方法测定长沙地区291名儿童载脂蛋白(Apo)E基因型。结果发现ε2,ε3,ε4等位基因的频率分别是0081,0857和0062。ApoE等位基因频率分布无明显的性别差异(P>0.05)。Apoε2等位基因携带者与其它ApoE基因携带者相比,血高密度脂蛋白胆固醇、ApoE和ApoA1浓度较高,而总胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇、ApoB100水平较低(P<0.05)。ε4等位基因携带者的血脂、脂蛋白、Apo改变则相反(P<0.05)。结果还显示ApoE等位基因对血甘油三酯、脂蛋白(a)浓度的影响不明显(P>0.05)。ε2,ε3,ε4等位基因与血总胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇、ApoB100浓度呈等级正相关,与高密度脂蛋白胆固醇、ApoA1及ApoE水平呈等级负相关(P<0.05)。ApoE基因对血清脂类的影响存在性别差异。ApoE基因多态性影响小儿血清脂类代谢。 相似文献