氯化铵裂解法与非裂解法提取人脂肪干细胞生物学特性的差异

文题释义： 氯化铵红细胞裂解液：含有氯化铵成分的红细胞裂解液,此种裂解液被广泛应用于骨髓干细胞及脂肪干细胞的提取,其目的是去除组织内的红细胞,使目的细胞群进一步纯化。其作用机制为：红细胞内有大量碳酸酐酶,可自发将NH₃转化为NH₄⁺,CO₂转化为HCO₃^-,促使胞外NH₃和CO₂连续内流造成细胞裂解。 基质血管成分：脂肪组织中除了含有成熟脂肪细胞外,还包含一组混杂的细胞群,即基质血管成分。基质血管成分包括血管内皮细胞、脂肪祖细胞、成纤维细胞、周细胞、脂肪干细胞,造血干细胞、红细胞等,其具有多向分化潜能及促进组织血管再生等功能,在组织及器官的再生、修复中具有极大的应用前景。 背景：脂肪干细胞的提取及纯化流程尚未建立统一标准。最常用的纯化脂肪干细胞的方法是利用红细胞裂解液处理基质血管成分。但这一步骤是否对脂肪干细胞存在不良影响仍缺乏证据,是否有利于未来临床应用仍有待探讨。 目的：比较氯化铵红细胞裂解液法和非裂解法提取脂肪干细胞的效率,并进一步比较两种方法提取脂肪干细胞的生物学特性。 方法：收集吸脂手术患者脂肪组织,经Ⅰ型胶原酶消化后,利用或不用氯化铵红细胞裂解液对基质血管成分进行纯化,Muse^TM细胞状态分析仪对活细胞计数及活细胞比例评估;将基质血管成分接种后培养人脂肪干细胞至第2代,光学显微镜观察脂肪干细胞形态,流式细胞学分析脂肪干细胞表型,CCK-8法绘制细胞增殖曲线,成脂及成骨培养基诱导后油红O及茜素红染色法分别评估成脂、成骨分化能力。该实验经中国医学科学院整形外科医院伦理委员会批准,并与患者签署相关知情同意书。 结果与结论：①与裂解组相比,非裂解组提取即刻的基质血管成分中非红活细胞数更多,活细胞百分比更大;②两组脂肪干细胞均呈梭形、鱼群状排列;③两组细胞均高表达CD90、CD73、CD105等细胞表面抗原,低表达或不表达CD11b、CD34、CD19、CD45、HLA-DR等细胞表面抗原;④非裂解组细胞增殖速度更快,成脂及成骨能力两组间无明显区别;⑤结果表明,利用氯化铵红细胞裂解液法提取基质血管成分降低了脂肪干细胞提取效率,抑制了脂肪干细胞增殖能力。非裂解过程不影响脂肪干细胞表型及成脂、成骨分化能力。因此不建议在人脂肪干细胞提取过程中进行氯化铵法红细胞裂解。 ORCID: 0000-0002-8958-4975(李梓菲) 中国组织工程研究杂志出版内容重点：干细胞;骨髓干细胞;造血干细胞;脂肪干细胞;肿瘤干细胞;胚胎干细胞;脐带脐血干细胞;干细胞诱导;干细胞分化;组织工程     

A hyper-ferritinemia syndrome evolving in recurrent macrophage activation syndrome,as an onset of amyopathic juvenile dermatomyositis: A challenging clinical case in light of the current diagnostic criteria

Juvenile dermatomyositis is an immune-mediated inflammatory multi-system disease involving mainly striated muscles and skin. Typical dermatological features are fundamental to establish the diagnosis, especially whenever the myopathy is very mild or absent, as it occurs in the form called as amyopathic juvenile dermatomyositis. Sometimes, systemic rheumatic diseases can develop a hyperferritinemia syndrome characterized by hemophagocytosis, namely macrophage activation syndrome, which represents a severe and life-threatening complication. Here, we describe a complex clinical history characterized by a hyper-ferritinemia syndrome after infectious mononucleosis, leading to recurrent episodes of macrophage activation syndrome. Finally, the late onset of several skin changes brought to a diagnosis of amyopathic juvenile dermatomyositis.     

���ϸ����̬ѧ�������������С����Ѫ��ļ�ֵ

??Abstract?? Urinary erythrocyte morphology??UEM?? analysis is the most commonly used clinical examination method to identify the sources of hematuria??with characteristics of being simple?? practical?? reliable and noninvasive. Because of the limitations of the method itself and some interference factors ??such as urine specific gravity?? urine pH and diuretic therapy?? etc.???? there may be false negative results in the diagnosis of glomerular hematuria with UEM. UEM analysis combined with other hematuria positioning method or indicators could reduce the rate of misdiagnosis and missed diagnosis in clinical work.     

南宁地区疑难输血患者红细胞不规则抗体的分析

目的对南宁地区疑难输血患者中红细胞不规则抗体检出情况进行分析,以了解本地区患者红细胞不规则抗体的发生情况。方法对2008-2018年间南宁市各医院送检的疑难配血案例标本1 463例,应用盐水法、凝聚胺法、抗球蛋白法、微柱凝集法、酶法、吸收放散法检测红细胞不规则抗体。结果共鉴定确认红细胞不规则抗体335例,发生率为22.90%(335/1463)。主要涉及6个血型系统:Rh系统55.52%(186/335),Kidd系统2.69%(9/335),MNS系统18.21%(61/335),Lewis系统4.48%(15/335),P系统5.07%(17/335),Rh合并Lewis系统0.30%(1/335),Rh合并P系统0.60%(2/335),Rh合并MNS系统5.97%(20/335),Rh合并Kidd系统5.67%(19/335),Rh、MNS合并Kidd系统1.19%(4/335),Rh、Kidd合并Duffy系统0.30%(1/335)。结论从南宁地区疑难输血患者红细胞不规则抗体检出情况分布看,以Rh和MNS血型系统为主,以Rh合并MNS血型系统的不规则抗体比率最高,尤其是Rh系统和抗-Mur同时存在多见。     

IL-6、ESR、CRP和常规生化检测用于诊断新型冠状病毒肺炎的临床价值分析

目的探讨白细胞介素-6(IL-6)、红细胞沉降率(ESR)和C反应蛋白(CRP)和常规生化指标在新型冠状病毒肺炎(COVID-19)诊断中的应用价值。方法收集2020年1-2月湖南中医药大学第一附属医院和厦门大学附属第一医院44例COVID-19确诊患者作为新冠肺炎组,30例体检健康者作为健康对照组。采集研究对象的血液标本,检测其IL-6、ESR、CRP和常规生化指标的水平,对IL-6、ESR、CRP作受试者工作特性曲线(ROC曲线),分析灵敏度和特异度,并且对IL-6、ESR、CRP和常规生化指标的结果进行综合比较。结果新冠肺炎组的IL-6水平为4.12(1.53~14.16)pg/mL,高于健康对照组,但差异无统计学意义(P>0.05);新冠肺炎组ESR和CRP的水平分别为61.50(19.75~85.00)mm/h、16.16(8.30~37.33)mg/L,显著高于健康对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。IL-6、ESR和CRP单项检测诊断COVID-19的ROC曲线下面积(AUC)依次分别为0.577、0.872、0.905,灵敏度依次分别为38.6%、75.0%、72.7%,特异度依次分别为100.0%、96.7%、100.0%。CRP对COVID-19的诊断效能要优于ESR、IL-6,ESR对COVID-19的诊断效能要优于IL-6。而IL-6、ESR和CRP三项联合检测诊断COVID-19的AUC为0.939,灵敏度为86.4%,特异度为96.7%,要优于IL-6+ESR、IL-6+CRP、ESR+CRP两项联合检测及IL-6、ESR和CRP单项检测的诊断效能。同时40.91%的患者IL-6升高,79.55%的患者ESR升高,68.19%的患者CRP升高,93.18%的患者肌酸激酶(CK)正常,95.45%的患者肌酸激酶同工酶(CK-Mb)正常,48.00%的患者白细胞计数(WBC)正常,44.00%的患者WBC下降,64.00%的患者淋巴细胞百分率(LYMPH%)下降,52.00%的患者淋巴细胞计数(LYMPH)下降。结论IL-6、CRP和ESR三项指标联合检测的诊断效能优于IL-6、CRP、ESR单项检测和其他两项指标联合检测的诊断效能,所以IL-6、ESR和CRP对COVID-19有一定的诊断价值。     

血细胞体积分布直方图的临床应用

在临床血常规的检测中,血细胞体积直方图往往含有丰富的图像信息。本文全面地分析了白细胞体积分布直方图、红细胞体积分布直方图、血小板体积分布直方图的正常形态及异常形态的图谱特征,详尽地探讨了血细胞体积分布直方图在临床诊断、治疗、预后等方面的重要意义。     

悬浮红细胞与异体血浆混合输注的危害性

目的 探讨悬浮红细胞与异体血浆混合输注的弊端,明确掌握输血适应证的重要性.方法 统计某医院2005年共1182份输血申请单的申请用血情况,分为单纯输注全血悬浮RBC血浆机采PC冰冻机采PC机采WBC以及悬浮红细胞与异体血浆混合输注全血与异体血浆混合输注.结果 1182份输血申请单中,悬浮红细胞与异体血浆混合输注的申请单数比例高达20.5%;其中实施输注的798份临床用血申请单中,混合输注的悬浮红细胞成分血输血率(RBC%)占比高达32.6%.结论 悬浮红细胞与异体血浆混合输注的危害性远远大于全血输注,混合输注的做法导致患者发生输血付反应和传播输血相关传染病的危险性成倍增加,同时又增加了患者的经济负担,而且容易引起柠檬酸钠中毒,导致患者凝血功能障碍.临床以悬浮红细胞与异体血浆混合输注来代替全血输注,以提高临床成分血输血率,这与国家推行成分输血的宗旨(使临床输血更安全、科学、合理、有效)不符.     

红景天苷对高原红细胞增多症大鼠红细胞膜结构和功能的影响

目的研究红景天苷对高原红细胞增多症(HAPC)大鼠红细胞膜结构与功能的影响,为红景天苷防治HAPC提供科学依据。方法 40只Wistar大鼠随机分为对照组、HAPC模型组及红景天苷高、中、低剂量(200、100、50 mg/kg)组,每组8只,雌雄各半。除对照组外,其余4组制备HAPC模型。对照组、模型组大鼠ig生理盐水,红景天苷组大鼠同时ig红景天苷,给药体积为10 mL/kg,1次/d,连续给药40 d。给药结束后,股动脉取血,采用生化、酶联免疫法测定大鼠红细胞膜脂质流动性和红细胞膜总胆固醇含量、总磷脂含量,以及磷脂成分磷脂酸(PA)、磷脂酰胆碱(PC)、磷脂酰乙醇胺(PE)、磷脂酰丝氨酸(PS)的含量,Na~+,K~+-ATPase和Ca~(2+),Mg~(2+)-ATPase的活性,红细胞内Na~+和Ca~(2+)浓度。结果红景天苷可显著提高HAPC大鼠红细胞膜脂质流动性和红细胞膜总磷脂、PA、PC、PE、PS含量,提高Na~+, K~+-ATPase和Ca~(2+), Mg~(2+)-ATPase的活性;显著降低红细胞膜总胆固醇含量、红细胞内Na~+和Ca~(2+)浓度。结论红景天苷可通过调控红细胞膜脂质成分,改善红细胞膜的功能和细胞代谢活动,进而缓解HAPC的相关症状。     

红细胞沉降率在评估系统性红斑狼疮活动性中的应用价值

目的评价红细胞沉降率是否可用于评估系统性红斑狼疮患者的疾病活动性。方法选择2012年6~12月共77例系统性红斑狼疮患者纳入本研究,诊断符合美国风湿病协会要求,男14例,女63例,红细胞沉降率、补体3(C3)、补体4(C4)、抗dsDNA抗体等检测项目于就诊当天完成检测,按系统性红斑狼疮疾病活动度评分表(SLEDAI)评分标准将上述患者分为活动期组(n=44,SLEDAI4分)和缓解期组(n=33,SLEDAI=0~4分),比较两组上述指标差异有无统计学意义,计算各指标与SLEDAI评分的相关性。双侧以P0.05为差异有统计学意义。结果活动期红细胞沉降率[21(10,37)]mm/h,明显高于缓解期的[11(5,21)]mm/h,差异有统计学意义(Z=-2.787,P=0.005),在区分系统性红斑狼疮活动与否能力方面,红细胞沉降率与C3、C4及抗dsDNA抗体相比,差异并无统计学意义(P0.05)),Pearson相关性分析显示,红细胞沉降率与SLEDAI评分呈正相关(r=0.293,P=0.010)。结论红细胞沉降率可用于对系统性红斑狼疮患者进行疾病活动性评估。