RP-HPLC测定恩替卡韦钠片剂含量

目的:建立高效液相色谱法测定恩替卡韦钠片的含量。方法:采用 Capcell Park C_(18)色谱柱(4.6 mm×200 mm,5μm),以甲醇-水-三乙胺(20:80:0.1)为流动相,流速为1.0 mL·min~(-1),检测波长243 nm,柱温为室温。结果:恩替卡韦钠在3.0～200μg·mL~(-1)(r=0.9992,n=6)范围内呈良好的线性关系;最低检测限为0.01 ng;高、中、低3种不同浓度的平均回收率为100.1%～100.6%,精密度为0.48%。结论:本方法简便快速结果准确可靠,可用于该药物质量标准研究。     

Synthesis of [14C]‐radiolabelled entecavir

Radiolabelled [¹⁴C]entecavir, ( 1 ), was prepared in 12 steps from (1S,2R,3S,5R)‐3‐(benzyloxy)‐2‐(benzyloxymethyl)‐6‐oxa‐bicyclo[3.1.0]hexane 2 . The chemical yield of [¹⁴C]entecavir was 14% from the epoxide 2 . Introduction of [¹⁴C] radiolabel was achieved by elaboration of 4,5‐diaminopyrimidine 8 with triethyl[¹⁴C]orthoformate to purine derivative 9 . The radiochemical yield of [¹⁴C]entecavir from triethyl[¹⁴C]orthoformate was 11.3%. Radiochemical purity of [¹⁴C]entecavir determined by HPLC was 99.8%. The specific activity of [¹⁴C]entecavir was 108 µCi/mg (29.9 mCi/mmol). Copyright © 2005 John Wiley & Sons, Ltd.     

恩替卡韦联合扶正化瘀胶囊治疗慢性乙型肝炎肝纤维化50例

目的探讨恩替卡韦联合扶正化瘀胶囊治疗慢性乙型肝炎肝纤维化的疗效。方法将慢性乙肝肝纤维化患者100例随机分为两组,治疗组50例口服恩替卡韦片0.5 mg、每日1次,扶正化瘀胶囊1.5 g、每日3次;对照组50例口服恩替卡韦片0.5 mg、每日1次。疗程均为1年。分别于于治疗前、治疗后进行主要症状体征变化比较、检测肝功能、肝纤四项及超声影像学检查。结果治疗后,两组患者肝功能、肝纤维化指标和超声影像学指标均有不同程度好转,治疗组肝纤维化指标和超声影像学指标(脾厚度)方面的改善较对照组明显(P<0.05)。结论恩替卡韦联合扶正化瘀胶囊抗慢性乙肝肝纤维化疗效良好。     

Isothiafludine,a novel non-nucleoside compound,inhibits hepatitis B virus replication through blocking pregenomic RNA encapsidation

Aim： To investigate the action of isothiafludine （NZ-4）, a derivative of bis-heterocycle tandem pairs from the natural product leucamide A, on the replication cycle of hepatitis B virus （HBV） in vitro and in vivo. Methods： HBV replication cycle was monitored in HepG2.2.15 cells using qPCR, qRT-PCR, and Southern and Northern blotting. HBV protein expression and capsid assembly were detected using Western blotting and native agarose gel electrophoresis analysis. The interaction of pregenomic RNA （pgRNA） and the core protein was investigated by RNA immunoprecipitation. To evaluate the anti-HBV effect of NZ-4 in vivo, DHBV-infected ducks were orally administered NZ-4 （25, 50 or 100 mg.k~l{1-1） for 15 d. Results： NZ-4 suppressed intracellular HBV replication in HepG2.2.15 cells with an IC~o value of 1.33 pmol/L, whereas the compound inhibited the cell viability with an IC5o value of 50.4 pmol/L. Furthermore, NZ-4 was active against the replication of various drug- resistant HBV mutants, including 3TC/ETV-dual-resistant and ADV-resistant HBV mutants. NZ-4 （5, 10, and 20 pmol/L） concentration- dependently reduced the encapsidated HBV pgRNA, resulting in the assembly of replication-deficient capsids in HepG2.2.15 cells. Oral administration of NZ-4 dose-dependently inhibited DHBV DNA replication in the DHBV-infected ducks. Conclusion： NZ-4 inhibits HBV replication by interfering with the interaction between pgRNA and HBcAg in the capsid assembly process thus increasing the replication-deficient HBV capsids. Such mechanism of action might provide a new therapeutic strategy to combat H BV infection.     

苦参碱类生物碱联合恩替卡韦抗耐药HBV的作用效果及机制分析

目的:研究苦参碱类生物碱联合恩替卡韦抗耐药乙型肝炎病毒(HBV)的作用效果以及对p38 MAPK,钠离子-牛磺胆酸共转运蛋白(NTCP)表达的影响。方法:以解放军第302医院自行构建的恩替卡韦耐药乙型肝炎病毒复制细胞株Hep G2.A64为模型,采用CPE,CCK-8分别考察苦参碱类生物碱氧化苦参碱、苦参碱、槐果碱、槐定碱和核苷类药物恩替卡韦单独用药及两者联合用药的细胞毒性;采用酶联免疫法(ELISA),实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR),蛋白质免疫印迹法(Western blot)分别观察联合用药对Hep G2.A64细胞HBs Ag分泌,HBV DNA复制,p38和NTPC mRNA表达,细胞中p38和p-p38蛋白表达水平的影响。结果:与单独用药比较,氧化苦参碱和恩替卡韦联合用药72 h后能显著抑制HBs Ag分泌,HBV DNA复制(P0.05),同时能显著降低NTCP基因和蛋白的表达水平以及磷酸化p38蛋白水平。结论:氧化苦参碱联合恩替卡韦可能通过下调NTCP的表达同时抑制p38蛋白磷酸化达到抗病毒的效果。氧化苦参碱联合恩替卡韦能显著增强抗耐药HBV病毒的效果。     

乙肝肝硬化并发皮下脂膜炎样T细胞淋巴瘤伴噬血细胞综合征的治疗分析

目的 探讨乙肝肝硬化并发皮下脂膜炎样T细胞淋巴瘤(SPTCL)伴噬血细胞综合征(HPS)的临床特征和治疗方法。 方法 回顾性分析2014年8月第二军医大学附属东方肝胆外科医院1例乙肝肝硬化并发SPTCL伴HPS病例的临床资料。 结果 T细胞受体(TCR)表型不同则该病的侵袭性、治疗反应性及预后明显不同,伴HPS者治疗效果不佳,生存期短。 结论 乙肝肝硬化并发SPTCL伴HPS罕见,早期骨髓形态学、病理学、免疫组化及基因重排检测对确诊有重要意义,及早有效控制乙肝病毒尤为重要。早期诊断及治疗对延长患者生存期有重要意义。     

妊娠期和哺乳期抗乙肝病毒药物治疗的安全性

乙型肝炎病毒（HBV）感染呈世界性流行,母婴传播是我国HBV感染的主要传播途径,育龄期女性常常面对妊娠期和哺乳期的抗病毒治疗问题。本文通过检索国内外数据库文献,综述了目前我国所有批准用于抗乙肝病毒感染药物（包括干扰素α、拉米夫定、替比夫定、替诺福韦酯、恩替卡韦、阿德福韦酯和恩曲他滨）在妊娠期和哺乳期使用的安全性数据和经验,依次从胎盘转运、动物生殖毒性和致畸性研究、人类妊娠期使用经验、药物乳汁分泌及人类哺乳期使用经验4方面进行阐述。其中替诺福韦和替比夫定研究资料相对较多,动物研究未发现致畸性,人类妊娠期使用也未见出生缺陷发生率增加,可作为妊娠期抗HBV治疗的选择。拉米夫定在妊娠期应用广泛（HIV治疗）,未发现出生缺陷发生率增加,故也可作为妊娠期抗HBV治疗的选择之一。     

恩替卡韦治疗乙型肝炎的疗效及安全性

恩替卡韦是一种有效的、选择性抑制乙型肝炎病毒复制的脱氧鸟嘌呤核苷类似物,由Bristol MyersSquibb公司研究开发,用于治疗乙型肝炎。体外试验表明,恩替卡韦比其他核苷类似物更有效。动物模型和人体临床研究结果显示,恩替卡韦具有极强的抑制乙型肝炎病毒复制,降低血清病毒DNA水平的作用,对耐拉米夫定的突变病毒株仍然有效,且未见明显的不良反应和线粒体毒性。     

六味五灵片联合恩替卡韦治疗慢性乙型肝炎的临床研究

目的探讨六味五灵片联合恩替卡韦治疗慢性乙型肝炎的临床疗效和作用机制。方法选取2012年1月至2013年12月青海省第四人民医院收治的慢性乙型肝炎78例,随机分为治疗组（39例）和对照组（39例）,对照组采用口服恩替卡韦片,1片/次,1次/d,餐前或餐后2 h服用;治疗组在对照组基础上口服六味五灵片,1片/次,3次/d,3个月后逐渐减量至1片/次,1次/d。两组均连续治疗48周。比较两组患者的临床疗效,并测定Th1/Th2细胞因子水平、外周血T淋巴细胞亚群及红细胞免疫功能。结果治疗组和对照组总有效率分别为89.74%、82.05%,两组比较差异有统计学意义（P〈0.01）。从治疗12周开始,两组谷丙转氨酶（ALT）、谷草转氨酶（AST）均较治疗前明显下降;治疗12周后,治疗组ALT显著低于同期对照组水平;治疗24周后,治疗组AST低于对照组,HBeAg转阴率高于对照组,两组比较差异有统计学意义（P〈0.01）。治疗后,两组IL-12、IL-2、和Th1/Th2细胞因子均较治疗前明显升高,IL-10、IL-4较治疗前明显降低,同组与治疗前相比差异有统计学意义（P〈0.01）;且治疗后,治疗组这些细胞因子水平改善程度优于对照组,两组比较差异有统计学意义（P〈0.01）。治疗后,两组患者CD3＋、CD4＋/CD8＋均高于同组治疗前水平,CD8＋显著降低,同组治疗前后差异有统计学意义（P〈0.01）。治疗组各亚群的改善程度优于对照组,两组比较差异有统计学意义（P〈0.01）。治疗后,两组患者红细胞黏附活性RCR明显上升,红细胞免疫复合物RICR明显下降,与治疗前相比差异有统计学意义（P〈0.01）;治疗组的改善程度优于对照组,两组比较差异有统计学意义（P〈0.01）。结论六味五灵片联合恩替卡韦治疗慢性乙型肝炎具有较好的临床疗效,提高患者肝功能和HBeAg转阴率,改善患者细胞免疫和RBC免疫功能,值得临床推广应用。     

参芪肝康片联合恩替卡韦治疗慢性乙型肝炎的临床研究

目的 探讨参芪肝康片联合恩替卡韦治疗慢性乙型肝炎患者的临床疗效。方法 选取2017年6月—2019年6月于新乡医学院第一附属医院感染科住院治疗的114例慢性乙型肝炎患者作为研究对象,按照住院时间和治疗方式差异随机将患者分为对照组（n=57）和观察组（n=57）。对照组口服抗病毒药物马来酸恩替卡韦片,0.5 mg/次,1次/d。观察组在对照组治疗的基础上口服参芪肝康片治疗,2.1 g/次,3次/d。两组疗程均为6个月。观察两组患者的临床疗效,比较两组治疗前后的肝功能指标、Th17细胞频率、Treg细胞频率、Th17/Treg细胞频率比值、白细胞介素-17（IL-17）、转化生长因子-β（TGF-β）水平以及不良反应发生率。结果 治疗后,对照组和观察组总有效率分别为77.19%和92.98%,两组比较差异具有统计学意义（P<0.05）。与治疗前相比,两组丙氨酸氨基转移酶（ALT）、天冬氨酸氨基转移酶（AST）、总胆红素（TBIL）水平均显著降低,差异均具有统计学意义（P<0.05）;与对照组相比,观察组治疗后血清ALT、AST和TBIL均显著降低,差异均具有统计学意义（P<0.05）。治疗后,两组患者Th17细胞频率、Th17/Treg细胞频率比值、IL-17水平均显著下降,而Treg细胞频率及TGF-β水平均显著升高（P<0.05）;与对照组相比,治疗后观察组Τh17细胞频率、Th17/Treg细胞频率比值、IL-17水平显著下降,而Treg细胞频率及TGF-β水平均显著升高（P<0.05）。对照组和观察组两组患者不良反应发生率分别为10.53%和14.04%,两组不良反应率相比较无显著差异。结论 参芪肝康片联合恩替卡韦治疗慢性乙型肝炎安全有效,能显著改善肝功能,并降低血清炎症因子水平,可能与影响Th17、Treg细胞频率及降低Th17/Treg细胞频率比值有关。