应用电化学测菌法检测变形链球菌的初步探讨

目的:探讨应用电化学测菌法检测变形链球菌的可行性。方法:利用本课题组前期建立的电化学测菌法检测变形链球菌,记录检测参数,并将电化学测菌法的检测结果与细菌培养结果进行比较。结果:①微流芯片样本通道内层流形成时间为(3.17±0.16)min,从进样到获得稳定电阻抗数据的时间为(10.20±0.16)min。②当变形链球菌浓度为104～109cells/mL时,细菌浓度C的对数与系统阻抗值Z呈良好的线性关系(R2=0.98)。③与细菌培养的检测结果相比,电化学测菌法获得的细菌数多,差异有统计学意义(P<0.05)。④变形链球菌浓度为105cells/mL时,电化学测菌法检测值与细菌培养法检测值之间的线性函数关系式为:y=0.94x+0.32E4(R2=0.95),两种方法的检测值高度正相关(P=0.001<0.01)。结论:电化学测菌法能为变形链球菌的快速检测提供新的思路。     

基于HPLC指纹图谱评价的当归补血汤传统汤剂与配方颗粒汤剂的成分差异分析

目的以当归补血汤为研究对象,比较其传统汤剂、自制配方颗粒汤剂与市售配方颗粒剂化学成分种类和含量的差异,为中药配方颗粒的临床应用提供科学依据。方法采用HPLC建立指纹图谱,从化学成分的种类、指标性成分含量、共有峰峰面积总和、指纹图谱的相似度4个方面进行评价。结果色谱峰数目由传统汤剂的15个共有色谱峰到配方颗粒的13个(A厂)、12个(自制)、11个(B厂)、9个(C厂)。指标成分的含量上,配方颗粒中阿魏酸含量与传统汤剂存在显著性差异(P0.05),其中阿魏酸含量:传统汤剂A厂配方颗粒汤剂自制配方颗粒汤剂B厂配方颗粒汤剂C厂配方颗粒汤剂;毛蕊异黄酮苷含量:自制配方颗粒汤剂传统汤剂A厂配方颗粒汤剂B厂配方颗粒汤剂C厂配方颗粒汤剂。配方颗粒汤剂中共有峰峰面积的总和均低于传统汤剂,若传统汤剂为1,其他(自制和A、B、C 3厂家)分别相当于0.95、0.66、0.40、0.47。自制配方颗粒汤剂以及A、B厂配方颗粒与传统汤剂相比相似度较高(0.97、0.96、0.98),C厂家稍低(0.85)。通过对当归补血汤主要色谱峰进行归属发现,其色谱峰基本均来自各单味药材,在本实验条件下,未见明显的新化学成分的产生,配方颗粒汤剂较传统汤剂有成分的消失。结论当归补血汤传统汤剂与配方颗粒汤剂相比,传统汤剂无论在指标成分的含量还是特征图谱中色谱峰的数量上均高于配方颗粒汤剂,两者存在一定的差异。这表明配方颗粒标识的临床当量与汤剂实际不符,应对中药配方颗粒的临床推荐当量进行校正,促进临床合理应用;同时也为国家中药配方颗粒质量的统一化管理提供科学的研究思路。     

基于信息熵理论的正交设计优化消乳增胶囊的提取工艺

目的优选消乳增胶囊中7味药材的提取工艺参数。方法采用HPLC测定芍药苷、阿魏酸、橙皮苷、欧前胡素、藁本内酯的含量,以此5种指标成分的提取率、药材提取的干膏得率和提取物指纹图谱相似度为综合评价指标,通过正交试验考察乙醇浓度、提取溶剂倍量、提取时间和提取次数对提取工艺的影响,采用信息熵赋权法确定各指标的客观权重,优选消乳增胶囊中7味药材的提取工艺参数。结果根据综合评分结果,确定该制剂最佳提取工艺为选用6倍量的50%乙醇,煎煮2次,每次2 h。3批验证综合评分均值为99.72,RSD为0.24%。结论优选后的工艺提取率高、稳定性和重复性好,适用于该制剂的大批量生产。     

委陵菜HPLC指纹图谱及多指标含量测定研究

目的建立委陵菜的指纹图谱及多指标含量测定方法,为委陵菜的质量标准提升提供实验依据。方法采用HPLC法,色谱柱Diamonsil C18(250 mm×4.6 mm,5μm),以乙腈-0.1%磷酸水为流动相,梯度洗脱;体积流量1.0 mL/min;柱温25℃;进样量10μL;检测波长260 nm;建立10批委陵菜的指纹图谱,用中药色谱指纹图谱相似度评价系统软件(2004版)进行评价,聚类分析将10批药材分为2类;建立同时测定委陵菜药材中没食子酸、槲皮素及山柰酚3种成分的含量测定方法。结果建立了委陵菜的HPLC指纹图谱,共标定了12个共有峰;没食子酸、槲皮素和山柰酚线性关系良好,相关系数(r)均大于0.999。精密度、稳定性、重复性的RSD均小于3%,平均回收率分别为97.44%、97.64%、99.19%。结论建立的委陵菜的指纹图谱及多指标含量测定方法专属性强、重复性好,能有效地控制委陵菜的内在质量,为提高委陵菜的质量评价方法提供参考。     

基于UPLC结合比色法的葛桑降糖胶囊质量控制研究

目的构建葛桑降糖胶囊的质量控制方法。方法采用比色法测定葛桑降糖胶囊粗多糖、总皂苷和总黄酮含量;采用UPLC建立葛桑降糖胶囊的指纹图谱,测定了10个批次产品;并利用中药色谱指纹图谱相似度评价系统(2012版本)进行相似度评价,确定共有峰。结果 3批次葛桑降糖胶囊中粗多糖平均质量分数为4.56%,总皂苷平均质量分数为2.97%,总黄酮平均质量分数为2.61%;建立了10批次葛桑降糖胶囊的UPLC指纹图谱,确立15个共有峰,经对照品指认出7个共有峰,分别是葛根素、芦丁、三七皂苷R1、人参皂苷Rg1、商陆苷、人参皂苷Rb1、商陆黄素,对应1、5、8、10、12、14、15号峰。结论此方法可用于葛桑降糖胶囊的质量控制。     

玉泉丸HPLC指纹图谱的建立及6个成分定量分析

目的建立玉泉丸HPLC指纹图谱,并同时测定玉泉丸中6种成分含量,为玉泉丸质量控制提供科学依据。方法采用HPLC法,Symmetery C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),以乙腈-0.1%磷酸水溶液为流动相梯度洗脱,体积流量1.0m L/min,柱温30℃。建立11批玉泉丸HPLC指纹图谱,用中药色谱指纹图谱相似度评价系统软件(2012A版)、聚类分析及主成分分析进行评价,同时测定葛根素、大豆苷元、毛蕊花糖苷、五味子醇甲、甘草酸及甘草苷的含量。结果建立了玉泉丸的HPLC指纹图谱,标定了共有峰12个,各批相似度均在0.9以上。多成分定量分析条件通过方法学考察,6个成分加样回收率均在92.06%～109.34%,RSD均在0.22%～2.76%。11批玉泉丸中葛根素、大豆苷元、毛蕊花糖苷、五味子醇甲、甘草酸及甘草苷含量范围分别为0.838～2.777、0.550～1.014、0.312～0.618、0.023～0.092、1.154～1.674、0.035～0.052 mg/g。结论 HPLC指纹图谱结合多成分同时测定的方法,快速、简便、重复性好,可为玉泉丸的质量控制提供方法学参考。     

衢枳壳HPLC指纹图谱的建立及特征成分分析

目的 建立衢枳壳的HPLC指纹图谱方法,并联合聚类分析技术,评价衢枳壳的质量。方法 色谱柱采用Extend XDBC18（250 mm×4.6 mm,5 μm）,以乙腈-0.1%甲酸溶液为流动相进行梯度洗脱,检测波长为330 nm,柱温为30℃,流速为1.0 mL·min^-1。结果 通过11批衢枳壳样品建立了对照指纹图谱,得到19个共有峰,利用多级质谱信息,结合对照品和文献对9个共有峰进行指认,同时采用相似度分析和系统聚类分析方法对指纹图谱数据进行模式识别研究。衢枳壳相似度结果为0.995~1.000,并聚为一类,说明其质量较为一致,而其他混淆品差异性较大,另聚为一类。结论 该方法简便、快速,专属性强,可以有效地评价衢枳壳的质量。     

Leakage evaluation of three different root canal obturation techniques using electrochemical evaluation and dye penetration evaluation methods

The aim of this study was to compare the apical sealing ability of three different obturation techniques using an electrochemical evaluation and evaluating dye penetration. One hundred and thirty-two maxillary anterior teeth were randomly divided into six groups. There were 20 teeth in each group. The teeth were obturated as follows: Groups 1 and 4 with Thermafil, Groups 2 and 5 with System B, and Groups 3 and 6 with cold lateral condensation (CLC). The apical leakage in these groups was evaluated using an electrochemical method for Groups 1, 2, 3 and a dye penetration method for Groups 4, 5 and 6. In both methods, the lowest mean leakage values were observed for Thermafil and the highest were observed for the CLC groups. The difference between Thermafil and CLC was statistically significant (P < 0.05). In both groups, System B fillings showed moderate leakage and the difference was not significant with Thermafil and CLC groups.     

桂花果实HPLC指纹图谱及9种化学成分含量测定研究

目的建立桂花Osmanthus fragrans果实HPLC指纹图谱及9种化学成分的含量测定方法,为桂花果实的质量控制提供科学依据。方法采用YMC-Pack ODS-A色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),以乙腈-水(含0.1%磷酸)溶液为流动相进行梯度洗脱,体积流量1.0 mL/min,柱温25℃,进样量10μL,检测波长210 nm,对不同产地桂花果实样品进样分析;采用国家药典委员会"中药色谱指纹图谱相似度评价系统"(2012版),建立桂花果实的指纹图谱,同时测定其中9种化学成分含量。结果对不同产地20批桂花果实样品进行指纹图谱研究,共标定了24个峰,指认出其中9个色谱峰。含量测定结果表明,女贞苷G13、特女贞苷、新女贞苷及红景天苷为桂花果实中主要化学成分。经方法学考察,测定方法的精密度和重复性良好,样品在24 h内稳定;红景天苷、毛蕊花糖苷、新女贞苷、特女贞苷、异麦角甾苷、女贞苷G13、槲皮素、芹菜素、山柰酚在一定质量浓度范围内线性良好,加样回收率均在95%～105%。结论建立的桂花果实HPLC指纹图谱及9种化学成分的含量分析方法稳定、可靠,可为桂花果实的质量控制及综合开发提供参考。     

指纹图谱结合一测多评法评价拟草果质量的研究

目的建立拟草果Amomumparatsao-ko药材的质量评价方法。方法以鼠李柠檬素为参照峰确定共有峰,建立拟草果的HPLC指纹图谱;以鼠李柠檬素为内标,确定鼠李素、3,5-二羟基-7,4’-二甲氧基黄酮的相对校正因子并计算含量,实现一测多评。同时采用外标法测定3种成分的含量,比较计算值和实测值的差异。结果建立了拟草果的HPLC指纹图谱,10批样品相似度均在0.9以上;以鼠李柠檬素为内标建立的鼠李素、3,5-二羟基-7,4’-二甲氧基黄酮的相对校正因子分别为1.300、0.885,重现性良好,10批拟草果样品一测多评法计算值与实测值无显著差异。结论建立的HPLC指纹图谱和一测多评法可用于拟草果的质量评价。