丹参对大鼠胫骨骨折早期愈合过程中血清、骨痂及骨组织中钙、锌、铜的影响

本实验采用原子吸收光谱法,对大鼠胫骨闭合性骨折早期愈合过程中血清、骨痂及骨组织中钙、锌、铜含量的变化以及应用丹参治疗后的影响作了研究。发现丹参可明显增加血清和骨痂中钙、锌含量及锌/铜比值,抑制血清铜水平的升高和降低骨折断端邻近骨组织中锌的含量;且骨痂钙含量与骨痂中锌/铜比值呈明显的正相关。结果提示,丹参促进骨折愈合的作用,与其提高血清锌含量、加强骨折断端邻近骨组织中锌的动员,以及通过提高骨痂中锌含量、锌/铜比值来加速骨痂组织生长和钙化过程有关。     

干旱胁迫对管花肉苁蓉组织培养体系中苯乙醇苷类成分含量的影响

目的建立管花肉苁蓉Cistanche tubulosa组织培养体系,并考察干旱胁迫对其中苯乙醇苷类成分含量的影响。方法通过液质联用技术分析管花肉苁蓉愈伤组织与悬浮培养体系中的主要化学成分,绘制其生长曲线,并通过渗透压调节剂(NaCl、甘露醇和PEG6000)模拟干旱胁迫环境,考察组织培养体系中松果菊苷和毛蕊花糖苷含量的变化。结果管花肉苁蓉愈伤组织与悬浮培养细胞均能生成松果菊苷和毛蕊花糖苷;绘制管花肉苁蓉愈伤组织生长曲线,确定30d为最佳继代时间;NaCl和甘露醇所诱导的干旱胁迫不利于愈伤组织细胞的生长及其苯乙醇苷类成分的积累,而6%PEG6000能显著促进悬浮细胞中苯乙醇苷类化合物的生成,诱导15d后,松果菊苷和毛蕊花糖苷的生物量分别为(1.07±0.10)g/L和(0.12±0.01)g/L,分别可达细胞干质量的20.94%和2.27%,为对照组的1.29倍和1.19倍。结论 PEG6000介导的干旱胁迫对管花肉苁蓉悬浮细胞中松果菊苷和毛蕊花糖苷的积累有明显促进作用。     

滇龙胆丛芽高效诱导与植株再生体系的建立

目的以滇龙胆Gentiana rigescens带叶茎尖、带芽茎段、叶片、根为外植体,建立滇龙胆高效、稳定的丛芽诱导体系,筛选出适宜的植株再生途径。方法以MS为基本培养基,在单因素实验的基础上,通过L16(45)正交及完全组合实验研究不同外植体和不同植物激素种类及其质量浓度对愈伤组织诱导、丛芽发生及植株再生的影响。结果带芽茎段为间接器官发生最佳材料,其在MS+6-BA 1.5 mg/L+NAA 1.5 mg/L+KT 0.05 mg/L中培养10 d、节上腋芽开始萌发后,基部可诱导出再分化能力极强的愈伤组织,得愈率为97.73%;15 d后愈伤组织开始分化出绿色丛芽,分化率100%;30 d后不定芽分化系数达18.65,增殖系数可达63.58。带叶茎尖为直接器官发生最佳材料,其在MS+6-BA 0.5 mg/L+NAA 1.0 mg/L+KT 0.5mg/L中培养30 d后,增殖系数亦可达44.36。2种材料培养获得的试管苗茎细瘦弱,不利于生根培养,试管苗在MS+6-BA1.5 mg/L+NAA 1.5 mg/L+KT 0.05 mg/L+PP333 10 mg/L中培养60 d后可获得健壮度大为改善的复壮苗。复壮苗生根则在1/2MS+6-BA 0.1 mg/L+NAA 2.0 mg/L中进行,45 d后可获得生长健壮的再生植株,生根率100%。再生苗移栽成活率达95%以上。结论建立的滇龙胆无性快速繁殖体系,为保护滇龙胆野生资源、优质种苗繁育提供了有效途径,也为其遗传转化研究奠定了实验基础。     

Tibia Vara (Osteochondrosis Deformans Tibiae or Blount's Disease): Treatment and Follow-up Examination

The collagen metabolism of callus tissue from closed, non-immobilized rat femoral fractures was studied in vitro after in vivo treatment with indomethacin 2 mg/kg/day for 6, 9 and 12 days after fracture. Total hydroxyproline synthesis and incorporation of hydroxyproline into collagen were found to be significantly increased after indomethacin treatment, whereas no significant difference was found regarding collagen resorption. The results Surggest that the recently demonstrated inhibition of fracture healing by indomethacin is not brought about by an inhibition of collagen synthesis.     

提高芍药愈伤组织中芍药苷和芍药内酯苷的含有量

目的进一步优化芍药愈伤组织中积累芍药双苷(芍药苷和芍药内酯苷)的培养条件。方法以芍药愈伤组织中芍药双苷的量为响应值,采用Plackett-Burman实验设计对8个影响愈伤组织生长和芍药双苷积累的植物激素(NAA、2,4-D、6-BA、TDZ)的质量浓度、蔗糖的含有量、Ca2+量、NH4+∶NO3-的比例及光照中筛选出了3个关键因素,通过最陡爬坡逼近和响应面优化方法确定这些因素的最适水平。结果三个因素的最佳条件为:40.20 g/L蔗糖、0.33 mg/L 6-BA和1.08 mg/L NAA。结论在此最优培养条件下,芍药愈伤组织合成芍药双苷的能力比优化前提高了33%,芍药双苷占愈伤组织干重含有量达到37.60 mg/g。     

不同浓度外源激素对黄芩愈伤组织诱导影响

目的：运用植物组织培养技术选择适合黄芩愈伤组织诱导的生长素与细胞分裂素的配比及浓度。方法：以黄芩幼根、叶片和带节茎段为外植体,用不同浓度生长素和细胞分裂素对黄芩进行愈伤组织诱导试验。结果：6-BA1.0mg·L-1诱导形成的愈伤组织疏松,诱导率高。诱导黄芩愈伤组织最佳生长素与细胞分裂素的浓度配比为NAA0.5mg·L-1＋6-BA1.0mg·L-1。结论：生长素与细胞分裂素配合使用时,愈伤组织的诱导率明显高于单个激素的处理,诱导结果也有差异。     

骨折愈合过程中低氧诱导因子-1α的表达及其调节作用

目的 探讨骨折愈合过程中低氧诱导因子-1α(HIF-1α)的表达及其调节作用.方法 建立小鼠胫骨骨折模型,骨折后1、3、7、14、21、28 d取材,应用X线摄片、Micro-CT和四环素荧光双标记技术,观测骨痂组织的演变和新骨形成状况;采用RT-PCR、Western blotting和免疫组织化学方法 ,检测骨痂组织细胞HIF-1α、血管内皮生长因子(VEGF)和成骨性标志物(Runx2和ALP)的表达状况,分析HIF-1α与骨折愈合进程的关系.结果 在早期骨痂组织中,募集于骨折处的细胞以及由此演化的成骨细胞、软骨细胞及骨细胞在低氧环境中均表达HIF-1α.骨折后第7天,HIF-1α阳性细胞百分率达到峰值,持续高表达7 d后逐渐下降,骨折后第28天基本恢复至骨折前水平;细胞VEGF表达特征的变化与HIF-1α的表现相似;早期骨痂细胞的骨形成功能活跃,骨痂体积较大,至骨折后14 d达到峰值后随骨改建的发生而逐步减小,骨痂矿化沉积主要发生于骨折愈合的中晚期(14～28 d).结论 骨折愈合过程中,参与骨折愈合的细胞属低氧感应细胞并表达HIF-1α;HIF-1α可调节细胞自身的状态,通过调控早期骨痂细胞的功能和刺激血管新生而参与调节骨折的愈合.     

四倍体平贝母的诱导及鉴定

目的运用组织培养技术诱导平贝母四倍体。方法采用不同质量浓度(200、500、1 000、2 000 mg/L)秋水仙素和不同的诱导时间(12～72 h)处理平贝母愈伤组织。结果离体培养条件下,平贝母激素自养型培养材料在秋水仙素诱导下得到四倍体,四倍体染色体4n=44,四倍体植株出现明显的多倍体特征。结论 500 mg/L秋水仙素处理24 h为最佳组合,可以诱导四倍体平贝母以平贝母子球做鉴定材料,获得较好的结果。     

东北红豆杉愈伤组织中紫杉烷类化合物的分离与鉴定

目的明确东北红豆杉(Taxus cuspidata)愈伤组织中的化学成分,为开发可持续利用的红豆杉资源提供理论依据。方法采用硅胶柱色谱、制备型高效液相色谱等手段对愈伤组织的正己烷和乙酸乙酯提取物进行分离和纯化;根据化合物的理化性质和波谱数据并结合相关文献对化合物结构进行鉴定。结果从东北红豆杉愈伤组织中分离得到11个紫杉烷类化合物,分别鉴定为tax-uyunnanine C(1)、2α,5α,10β-triacetoxy-14β-propionyloxy-4(20),11-taxadiene(2)、2α,5α,10β-tri-acetoxy-14β-isobutyryloxy-4(20),11-taxadiene(3)、2α,5α,10β-triacetoxy-14β-(2′-methyl)butyrylo-xy-4(20),11-taxadiene(4)、云南红豆杉甲素(yunnanxane,5)、紫杉醇(paclitaxel,6)、taxol C(7)、baccatin VI(8)、1β-deoxybaccatin VI(9)、taxayuntin C(10)、baccatin I(11)。结论化合物9、11为首次从东北红豆杉愈伤组织中分离得到,化合物1-4、8-10尚未在东北红豆杉中发现。     

百合的组织培养

目的 研究百合组培快繁的最佳途径。方法 在MS培养基上添加不同的激素配比;采用鳞叶不同部位作为外植体;改变培养方式。结果 确定了外植体产生小鳞茎的最佳培养基为MS＋NAA 0．5mg/L GA3 2.0mg/L;鳞叶的下部小块分化率最高,92．5％;小鳞茎叶脱分化形成愈伤组织后再分化可获得多而健壮的次级小鳞茎;次级小鳞茎采用液体振荡培养可快速增重。结论 采用组织培养方式可进行百合的快速繁殖,使百合种球的工厂化生产成为可能。